【摘要】：目的： 精子發(fā)生是男性生殖中的主要過程，精原細胞的不斷分裂增殖又保證了精子發(fā)生的順利進行。隨著年齡的不斷增長，男性精子的數(shù)量、質(zhì)量出現(xiàn)下降趨勢。mTOR信號轉(zhuǎn)導通路在細胞增殖分化中發(fā)揮著中心調(diào)控作用，因此mTOR信號通路可能在精子發(fā)生過程中有著重要的地位。通過檢測mTOR在大鼠睪丸組織中的表達規(guī)律，探討其與精子發(fā)生的關(guān)系，為進一步研究具體機制打下重要基礎(chǔ)。 方法： 采用免疫組化方法對mTOR進行組織學定位，RT-PCR方法研究mTOR在SD性成熟雄性大鼠心臟、肝臟、腎臟、腦、睪丸組織中的表達水平。 利用熒光定量PCR、western blot方法檢測mTOR在不同發(fā)育階段的SD雄性大鼠睪丸中的表達情況。用HE染色觀察不同發(fā)育階段過程中SD大鼠睪丸組織形態(tài)學上的改變。 構(gòu)建雷帕霉素SD大鼠模型，用熒光定量PCR檢測mTOR mRNA在正常組、雷帕霉素組、對照組中的表達情況。再采用western blot方法檢測mTOR蛋白以及mTOR下游靶蛋白P-P70S6K/P70S6K的表達情況。 結(jié)果： 1、免疫組織化學結(jié)果顯示mTOR陽性免疫染色主要位于睪丸生精小管的精母細胞及少量初級精母細胞的胞質(zhì)中。 2、與性成熟SD大鼠的其他各個主要器官相比，睪丸組織中mTOR的表達相對較高。隨著SD大鼠年齡的增長，，mTOR在睪丸中的表達逐漸降低，并且伴隨著生精小管空泡化的逐漸產(chǎn)生；mTOR下游靶蛋白P70S6K的磷酸化效率也逐漸降低。 3、雷帕霉素處理SD雄性大鼠后，睪丸中生精小管出現(xiàn)類似老齡鼠的空泡化以及mTOR下游靶蛋白P70S6K的磷酸化效率降低。 結(jié)論 1、我們首次發(fā)現(xiàn)mTOR在大鼠生精小管精母細胞表達。 2、隨著年齡的增長，由于mTOR表達下降及其對下游靶蛋白P70S6K的磷酸化能力下降，導致大鼠精子數(shù)量減少、生精小管空泡化增多。 3、mTOR通過對P70S6K的磷酸化，調(diào)控促進精原細胞增殖的蛋白合成，從而促進精子發(fā)生。
[Abstract]:Objective: spermatogenesis is the main process in male reproduction. The continuous division and proliferation of spermatogonia ensure the smooth progress of spermatogenesis. With the increasing of age, the quantity and quality of male spermatozoa decrease. The signal transduction pathway of mTOR plays a central role in cell proliferation and differentiation. Therefore, mTOR signaling pathway may play an important role in spermatogenesis. The relationship between mTOR and spermatogenesis was studied by detecting the expression of mTOR in rat testis, which laid an important foundation for further study of the specific mechanism. Methods: the expression of mTOR in the heart, liver, kidney, brain and testis of male SD rats was studied by immunohistochemical method. Fluorescence quantitative PCR,western blot was used to detect the expression of mTOR in the testis of SD male rats at different developmental stages. HE staining was used to observe the morphological changes of testis in SD rats during different developmental stages. The rat model of rapamycin SD was established, and the expression of mTOR mRNA in normal group, rapamycin group and control group was detected by fluorescence quantitative PCR. Western blot was used to detect the expression of mTOR protein and mTOR downstream target protein P-P70S6K/P70S6K. Results: 1. Immunohistochemical results showed that mTOR immunoreactive staining was mainly located in spermatocytes of testicular seminiferous tubules and in the cytoplasm of a small number of primary spermatocytes. 2. Compared with the major organs, The expression of mTOR was relatively high in testis. With the age of SD rats, the expression of mTOR in testis gradually decreased, and accompanied by the production of seminiferous tubule vacuolation. The phosphorylation efficiency of P70S6K, the downstream target protein of mTOR, was also decreased. 3After rapamycin was treated with rapamycin, vacuolation of seminiferous tubules in testis and phosphorylation of mTOR downstream target protein P70S6K were observed in testis of male rats. Conclusion 1. We found that mTOR was expressed in spermatocytes of rat seminiferous tubules for the first time. With the increase of age, the expression of mTOR decreased and its phosphorylation ability to downstream target protein P70S6K decreased. The result showed that the number of spermatozoa decreased and the vacuolation of seminiferous tubules increased. 3mTOR promoted spermatogenesis by phosphorylation of P70S6K and regulation of protein synthesis of spermatogonia proliferation.
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R321

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉奕,楊鳴良,張揚,于秉治;哺乳動物的雷帕霉素靶蛋白及其底物在口腔鱗狀細胞癌中的表達[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2004年04期

2 張麗紅;林鳳茹;;雷帕霉素對白血病細胞株的影響[J];中國實驗血液學雜志;2009年04期

3 李小明;楊作成;陳淳媛;李卓穎;;雷帕霉素對mTOR基因誘導的NIH3T3成纖維細胞增殖的影響[J];西部醫(yī)學;2010年09期

4 鄭杰;;mTOR信號途徑與腫瘤[J];生命科學;2006年03期

5 潘智;張令強;蔣繼志;賀福初;;mTOR的研究進展[J];細胞生物學雜志;2006年03期

6 曾蘭;劉學慶;;哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信號通路及其在生殖過程中的作用[J];生殖與避孕;2008年10期

7 顧玲;李強;高舉;朱易萍;賈蒼松;馬志貴;;雷帕霉素逆轉(zhuǎn)T-ALL Jurkat細胞對糖皮質(zhì)激素耐藥(英文)[J];臨床兒科雜志;2010年05期

8 牛培廣;史道華;;雷帕霉素抑制mTOR活性調(diào)控糖脂代謝的研究進展[J];中國藥師;2010年11期

9 孫炳奇;邱攀;鐘紅紅;于秉治;;mTOR抑制劑對小鼠受精卵卵裂以及MPF活性的影響[J];遼寧醫(yī)學雜志;2008年06期

10 李孟圈;劉娟娟;李靖若;李江濤;蘇靜;;mTOR在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其與C-erbB-2的關(guān)系[J];山東醫(yī)藥;2009年13期

相關(guān)會議論文 前10條

1 張彤;梅長林;付莉莉;熊錫山;王麗;戴兵;;驍悉和雷帕霉素對常染色體顯性多囊腎病治療作用的實驗研究[A];2007年浙滬兩地腎臟病學術(shù)年會資料匯編[C];2007年

2 沈曉蕓;劉芳;唐乙;王全興;;雷帕霉素促進Foxp3~+CD4~+CD25~+Treg細胞產(chǎn)生的分子機制[A];第六屆全國免疫學學術(shù)大會論文集[C];2008年

3 華雯;劉慧;夏麗霞;田寶平;陳志華;李雯;沈華浩;;雷帕霉素對哮喘小鼠骨髓嗜酸粒細胞祖細胞分化的影響[A];2011年第三十三屆浙江省呼吸系病學術(shù)年會暨呼吸疾病診治新進展學習班論文匯編[C];2011年

4 趙妍敏;周倩;黃河;;雷帕霉素對Jurkat細胞作用及機制研究[A];2007年浙江省血液病學術(shù)年會論文匯編[C];2007年

5 李學旺;;雷帕霉素在慢性腎臟疾病治療中的作用[A];中華醫(yī)學會腎臟病學分會2006年學術(shù)年會專題講座[C];2006年

6 蔡勇;陳琰;鄭少玲;陳必成;夏鵬;楊亦榮;;雷帕霉素對于蛋白負荷腎病大鼠模型腎臟的影響[A];2007年浙江省器官移植學術(shù)會議論文匯編[C];2007年

7 張勝利;祝仕清;牛長群;;國產(chǎn)雷帕霉素在恒河猴的藥代動力學研究[A];2002年靈長類實驗動物學術(shù)交流會論文摘要集[C];2002年

8 程元榮;鄭衛(wèi);;新分子靶位mTOR與雷帕霉素類藥物[A];創(chuàng)新藥物及新品種研究、開發(fā)學術(shù)研討會論文集[C];2006年

9 尤慶生;陳宏林;孟小勇;;血管外雷帕霉素緩釋涂層抑制橋靜脈再狹窄的實驗觀察[A];中華醫(yī)學會第七次全國胸心血管外科學術(shù)會議暨2007中華醫(yī)學會胸心血管外科青年醫(yī)師論壇論文集心血管外科分冊[C];2007年

10 董瑩;黃一飛;皮裕璃;;雷帕霉素對角膜移植術(shù)后VEGF的影響[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術(shù)大會論文匯編[C];2007年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 本報記者 白毅;mTOR信號通路為腫瘤治療提供新靶點[N];中國醫(yī)藥報;2010年

2 本報特約撰稿人 徐錚奎;雷帕霉素：新用途催生大市場[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2009年

3 駐京記者 李瑤;mTOR提供癌癥治療新思路[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2010年

4 歐颯;或許真有“長壽藥”,但真能帶來快樂？[N];新華每日電訊;2009年

5 馬艷紅;雷帕霉素藥物釋放支架安全、有效[N];中國醫(yī)藥報;2002年

6 實習生 李娜　本報記者 袁志勇;新發(fā)現(xiàn)可以阻斷腫瘤通路嗎[N];科技日報;2010年

7 方方;雷帕霉素藥物支架可降低冠心病再梗率[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2006年

8 本報記者 馮衛(wèi)東;雷帕霉素成為首種可延長哺乳動物壽命的藥物[N];科技日報;2009年

9 周婷玉　g品

本文編號：2250346