我國(guó)黑龍江林區(qū)鼠型動(dòng)物巴爾通體感染調(diào)查與分離鑒定
發(fā)布時(shí)間:2018-03-02 21:20
本文選題:巴爾通體 切入點(diǎn):鼠 出處:《中南大學(xué)》2012年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的:通過(guò)本研究了解我國(guó)東北林區(qū)鼠型動(dòng)物的巴爾通體的感染情況,從黑龍江林區(qū)鼠型動(dòng)物中分離培養(yǎng)巴爾通體,了解我國(guó)我國(guó)巴爾通體的遺傳進(jìn)化特征。 方法: 以軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院流行病室在黑龍江同江、綏芬河、東寧、牡丹江四個(gè)地區(qū)設(shè)置的蜱傳疾病研究監(jiān)測(cè)點(diǎn)作為本次研究野鼠捕獲點(diǎn)。按照橫斷面現(xiàn)況調(diào)查研究的樣本含量估算方法確定樣本含量。 用夾夜法捕鼠,鑒定鼠種后,無(wú)菌取脾臟組織。按照試劑盒操作步驟提取脾臟組織DNA。采用巴爾通體特異性引物擴(kuò)增gltA基因,gltA基因檢測(cè)陽(yáng)性作為標(biāo)本陽(yáng)性的判斷標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)一步擴(kuò)增16S/23SrRNAITS基因片段,并送測(cè)序,進(jìn)行同源比較和Neighbor-Joining (NJ)建樹(shù)分析。將陽(yáng)性標(biāo)本的脾臟組織接種于巧克力瓊脂平板上培養(yǎng),對(duì)疑似菌落首先再次檢測(cè)gltA基因,隨后針對(duì)gltA基因陽(yáng)性的分離株做:①進(jìn)一步擴(kuò)增16S/23SrRNAITS基因、16SrRNA基因、FtsZ基因來(lái)驗(yàn)證。②做形態(tài)學(xué)方面的鑒定,包括革蘭氏染色、吉姆薩染色、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡。③采用持續(xù)傳代培養(yǎng)保存和冷凍保存。④送測(cè)序,與脾臟組織的測(cè)序結(jié)果比較。 數(shù)據(jù)處理采用率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述,率的組間比較用χ2檢驗(yàn)、Fisher's確切概率法,陽(yáng)性率影響因素的分析用逐步Logistic回歸分析方法。運(yùn)用SPSS16.0軟件完成。 結(jié)果: 1.巴爾通體感染情況檢測(cè) 本研究在2009~2011年中,每年的4-7月從黑龍江林區(qū)4個(gè)調(diào)查點(diǎn)共捕獲野鼠514只,共11個(gè)種類。共71只檢出巴爾通體DNA,陽(yáng)性率為13.81%(95%CI:11.09%-17.06%),感染的鼠有倉(cāng)鼠、大倉(cāng)鼠、大林姬鼠、褐家鼠、黑線姬鼠、紅背鼠平、,
本文編號(hào):1558096
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