血紅蛋白催化過氧化氫氧化酪氨酸反應對血紅蛋白的保護作用
本文關(guān)鍵詞:血紅蛋白催化過氧化氫氧化酪氨酸反應對血紅蛋白的保護作用 出處:《西北大學》2012年碩士論文 論文類型:學位論文
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【摘要】:血紅蛋白氧載體應用于缺血再灌注,由于缺血再灌注產(chǎn)生活性氧簇(ROS)及活性氮簇(RNS)本身對機體造成損傷,而Hb更易被活性氧簇(ROS)及活性氮簇(RNS)氧化反應,形成失去攜氧功能的Fe3+Hb,同時誘導活性氧自由基的產(chǎn)生,在過氧化氫(H2O2)和超氧亞硝酸根離子(ONOO-)等氧化物質(zhì)的作用下Hb不斷氧化從而使Fe3+Hb和Fe4+Hb形成循環(huán)從使缺血再灌注持續(xù)損傷,大量氧自由基和Fe4+Hb積累,而Fe4+Hb是一種強氧化劑,導致脂質(zhì)過氧化,形成脂質(zhì)自由基,蛋白質(zhì)修飾及DNA斷裂等一系列級聯(lián)反應,從而加重了缺血再灌注損傷,因此這個問題需要得以解決。 本文發(fā)現(xiàn)亞鐵血紅蛋白蛋白具有特殊的過氧化物酶活性,能催化過氧化氫氧化酪氨酸的反應,本文對血紅蛋白的酶特性的相關(guān)驗證,其研究的目的是血紅蛋白具有酶催化活性,在HBOC中加入酪氨酸來解決H202氧化血紅蛋白,清除H202,保護血紅蛋白氧載體,從而減輕缺血再灌注損傷。 實驗結(jié)果:以酪氨酸為氫供體底物,通過熒光法檢測Hb或者PolyHb在Tyr+H2O2反應體系的反應產(chǎn)物熒光,發(fā)現(xiàn)在0.02mol/L pH7.4的PB緩沖液中,Hb或PolyHb對該反應產(chǎn)物的熒光強度有增強的作用,而血紅蛋白結(jié)合CO發(fā)現(xiàn)反應產(chǎn)物的熒光沒有增強,說明血紅蛋白的酶催化活性在鐵卟啉環(huán)上,從而證明了血紅蛋白具有酶的催化作用;在此基礎(chǔ)上通過紫外法檢測在酪氨酸存在下,Hb或PolyHb的光譜吸收峰的變化及Fe4+Hb的生成。結(jié)果發(fā)現(xiàn)酪氨酸存在下,Hb或PolyHb的兩個特征吸收峰沒有發(fā)生變化及620nm處Fe4+Hb明顯受到抑制作用。 由以上的實驗結(jié)果得出的結(jié)論是Hb或者HBOC具有過氧化物模擬酶的催化作用,主要是血紅蛋白中血紅素/Fe2+起催化作用,同時在血紅蛋白中加入酪氨酸后,有效的抑制血紅蛋白的氧化,因此酪氨酸對血紅蛋白氧載體在缺血再灌注損傷方面具有潛在的應用,有待于進一步研究其具體的保護機制。
[Abstract]:Hemoglobin based oxygen carrier used in ischemia reperfusion, ischemia reperfusion due to ROS production cluster (ROS) and reactive nitrogen species (RNS) damage to the body itself, while Hb more susceptible to reactive oxygen species (ROS) and reactive nitrogen species (RNS) oxidation reaction, the formation of loss of oxygen function of Fe3+ Hb. At the same time induced by active oxygen free radicals and hydrogen peroxide (H2O2) and superoxide in the nitrite ion (ONOO-) oxidation substance Hb to oxidation so that Fe3+Hb and Fe4+Hb formed from the cycle of ischemia reperfusion injury sustained, large amount of oxygen free radicals and Fe4+Hb accumulation, while Fe4+Hb is a strong oxidant. That leads to lipid peroxidation, lipid free radical formation, a series of cascade reactions of protein modification and DNA fracture, which will aggravate the ischemia reperfusion injury, so this problem needs to be solved.
【學位授予單位】:西北大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2012
【分類號】:R363
【參考文獻】
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,本文編號:1341667
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