本文關(guān)鍵詞：藍(lán)莓菌根真菌解磷特性及定殖特點(diǎn)分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：藍(lán)莓屬杜鵑花科越橘屬植物,為淺根系植物,沒有大的主根,根系纖細(xì)且不發(fā)達(dá)。大部分的杜鵑花科植物根系在自然條件下都能形成一類特殊的內(nèi)生菌根即杜鵑花類菌根,也稱為歐石楠類菌根(Ericoid mycorrhizas, ERM),它對(duì)促進(jìn)植物營(yíng)養(yǎng)吸收、增強(qiáng)植物抗逆性等方面具有重要作用。基于藍(lán)莓菌根的重要性,本研究對(duì)菌根真菌對(duì)藍(lán)莓的侵染狀態(tài)、解磷及促生能力進(jìn)行了分析,并利用變性梯度凝膠電泳技術(shù)分析菌根真菌在藍(lán)莓根際的定殖情況,為進(jìn)一步開發(fā)藍(lán)莓菌根真菌資源奠定基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下：利用錐蟲藍(lán)染色壓片和冰凍切片技術(shù)對(duì)自然條件下的藍(lán)莓菌根的侵染特點(diǎn)和顯微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在表皮、皮層、中柱中都有真菌的侵染,其中中柱真菌的侵染最多,而表皮的侵染較少。藍(lán)莓菌根的侵染部位大多出現(xiàn)在顏色略顯黃棕色的根段上,靠近根尖部位的根段侵染率較低,而在新長(zhǎng)出的幼嫩根段上幾乎沒有菌絲侵染。大興安嶺地區(qū)的野生藍(lán)莓菌根真菌侵染率為54.6%。對(duì)獲得的藍(lán)莓菌根真菌的解磷能力進(jìn)行了分析,結(jié)果顯示7個(gè)屬的真菌都有不同程度的解磷能力。從其中挑選了兩株解磷能力較強(qiáng)的真菌,對(duì)它們的解磷機(jī)理進(jìn)行進(jìn)一步研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：接種解磷真菌的培養(yǎng)基中,無機(jī)磷含量以及菌體中酸性磷酸酶含量增速最快的點(diǎn)都出現(xiàn)在144h,此時(shí)菌體分泌了大量酸性磷酸酶來分解培養(yǎng)基中的無機(jī)磷。從野生藍(lán)莓組織上選取幼嫩的莖,利用組織培養(yǎng)方法繁育出無菌藍(lán)莓植株,再對(duì)藍(lán)莓植株進(jìn)行菌根真菌回接實(shí)驗(yàn)。菌根真菌與藍(lán)莓共培養(yǎng)一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)大部分菌根真菌對(duì)藍(lán)莓幼苗的生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用。顯微結(jié)構(gòu)觀察顯示,隨著時(shí)間的增長(zhǎng),菌根真菌侵染率逐漸增加,共培養(yǎng)三個(gè)月后侵染率可達(dá)70%。接種菌根真菌的植物葉片中氮、磷含量、超氧化物歧化酶活性和過氧化氫酶活性都要高于未接種的對(duì)照組。提取菌根真菌與藍(lán)莓共培養(yǎng)土樣的總DNA,利用含有GC夾的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行變性梯度凝膠電泳(DGGE)分析,結(jié)果顯示菌根真菌已在藍(lán)莓根部定殖；此外,接種的菌根真菌可能已成為土壤中的優(yōu)勢(shì)菌群之一
【關(guān)鍵詞】：藍(lán)莓茵根 菌根真菌 侵染率 接種效應(yīng) 定殖情況
【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S663.9;S182
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 1 緒論10-15
• 1.1 植物與真菌的關(guān)系10-12
• 1.1.1 菌根的分類10-11
• 1.1.2 杜鵑花類菌根的生態(tài)作用11-12
• 1.2 杜鵑花類菌根真菌的物種多樣性12
• 1.2.1 菌根真菌的解磷作用12
• 1.3 藍(lán)莓及其相關(guān)研究進(jìn)展12-14
• 1.3.1 藍(lán)莓在我國(guó)的分布12-13
• 1.3.2 藍(lán)莓的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值13
• 1.3.3 藍(lán)莓引種栽培及繁殖13-14
• 1.4 研究目的與意義14-15
• 2 藍(lán)莓菌根的形態(tài)學(xué)觀察15-20
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料15
• 2.1.1 材料采集15
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑15
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)所用器材15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法15-17
• 2.2.1 菌根侵染率檢測(cè)方法15-16
• 2.2.2 侵染率計(jì)算方法16
• 2.2.3 冰凍切片的制作16-17
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析17-19
• 2.3.1 菌根染色壓片17-18
• 2.3.2 冰凍切片18-19
• 2.3.3 菌根侵染率分析19
• 2.4 本章小結(jié)19-20
• 3 菌根真菌解磷能力的分析20-27
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料20-21
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)樣品20
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)所用試劑20
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)所用儀器20
• 3.1.4 液體培養(yǎng)基的配制20
• 3.1.5 菌株的液體培養(yǎng)方法20-21
• 3.1.6 試劑的配制21
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法21-22
• 3.2.1 可溶性磷含量的測(cè)定21-22
• 3.2.2 pH值的測(cè)定22
• 3.2.3 菌絲體重量的測(cè)定22
• 3.2.4 磷酸酶活性的測(cè)定22
• 3.3 結(jié)果與分析22-26
• 3.3.1 可溶性磷含量測(cè)定22-23
• 3.3.2 2株代表菌株可溶性磷的比較23-26
• 3.4 本章小結(jié)26-27
• 4 藍(lán)莓菌根真菌的回接技術(shù)及其接種效應(yīng)27-36
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料27-28
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)樣品27
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑27
• 4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器27
• 4.1.4 試劑的配制27-28
• 4.1.5 培養(yǎng)基的配制28
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法28-30
• 4.2.1 組培苗的生根培養(yǎng)以及真菌的共培養(yǎng)28-29
• 4.2.2 菌根侵染率檢測(cè)29
• 4.2.3 藍(lán)莓葉片氮、磷含量的測(cè)定29-30
• 4.2.4 藍(lán)莓葉片過氧化氫酶、超氧化物歧化酶的測(cè)定30
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析30-35
• 4.3.1 組培苗的生根培養(yǎng)與真菌的共培養(yǎng)30-31
• 4.3.2 菌根侵染率檢測(cè)31-32
• 4.3.3 藍(lán)莓葉片氮、磷含量的比較32-34
• 4.3.4 藍(lán)莓葉片過氧化氫酶、超氧化物歧化酶的比較34-35
• 4.4 本章小結(jié)35-36
• 5 菌根真菌的定殖特點(diǎn)分析36-45
• 5.1 實(shí)驗(yàn)材料36-38
• 5.1.1 樣品的處理36
• 5.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑36
• 5.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器36
• 5.1.4 試劑的配制36-38
• 5.2 實(shí)驗(yàn)方法38-41
• 5.2.1 土壤DNA的提取38
• 5.2.2 土壤DNA的純化38-39
• 5.2.3 土壤DNA的PCR擴(kuò)增39-40
• 5.2.4 PCR產(chǎn)物的變性梯度凝膠電泳(DGGE)40-41
• 5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析41-44
• 5.3.1 土壤DNA的提取41-42
• 5.3.2 土壤DNA的純化42
• 5.3.3 土壤DNA的PCR擴(kuò)增42-43
• 5.3.4 PCR產(chǎn)物的變性梯度凝膠電泳(DGGE)43-44
• 5.4 本章小結(jié)44-45
• 參考文獻(xiàn)45-48
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文48-49
• 致謝49-50

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 張春英;尹麗娟;王胤;柯新;戴思蘭;;一種簡(jiǎn)捷的分離杜鵑花類菌根真菌的方法[J];生物技術(shù);2007年06期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 高博;龍池地區(qū)杜鵑花屬6種杜鵑花菌根真菌多樣性的研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2009年

2 楊兵;毛鵑菌根真菌多樣性初步研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：藍(lán)莓菌根真菌解磷特性及定殖特點(diǎn)分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：488547