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中間偃麥草類萌芽素蛋白基因TiGLP1的功能分析及小麥TaGLP基因家族分析

發(fā)布時(shí)間:2023-04-11 17:28
  當(dāng)今世界小麥播種總面積、小麥總產(chǎn)量和總庫(kù)存量在谷類作物中均占據(jù)首位,以小麥為主要糧食的人口占世界人口總數(shù)的三分之一以上。同時(shí)小麥也是我國(guó)主要的三大糧食作物之一,小麥產(chǎn)量決定國(guó)家糧食安全。目前各種白粉病等真菌性病害嚴(yán)重影響小麥的產(chǎn)量,因此良好抗病基因的鑒定和利用有助于提高小麥的抗病性。在植物遭受脅迫時(shí),類萌芽素基因GLPs在發(fā)育、防御和應(yīng)激等方面揮重要作用。在本研究中,在前期通過(guò)對(duì)白粉病誘導(dǎo)的小偃麥SN6306轉(zhuǎn)錄組分析的基礎(chǔ)上,從中鑒定到一個(gè)來(lái)自中間偃麥草且受白粉病菌誘導(dǎo)的類萌芽素基因TiGLP1,進(jìn)一步對(duì)TiGLP1基因進(jìn)行了功能分析;同時(shí)對(duì)小麥TaGLP基因家族進(jìn)行分析鑒定。主要結(jié)果如下:(1)TiGLP1基因的克隆將小麥白粉病生理小種E09誘導(dǎo)后的小偃麥SN6306進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,對(duì)其中明顯上調(diào)表達(dá)的差異基因TiGLP1基因進(jìn)行克隆。利用在線軟件對(duì)基因序列分析表明,TiGLP1基因cDNA全長(zhǎng)為651 bp,ORF編碼216個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。有22個(gè)氨基酸殘基的信號(hào)肽。對(duì)14個(gè)物種GLPs蛋白序列進(jìn)行比對(duì)和進(jìn)化樹(shù)分析,比對(duì)發(fā)現(xiàn)TiGLP1的氨基酸序列與中間偃麥草中擴(kuò)增得到的TiG...

【文章頁(yè)數(shù)】:77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
符號(hào)說(shuō)明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 萌芽素和類萌芽素的研究
        1.1.1 萌芽素和類萌芽素結(jié)構(gòu)
        1.1.2 萌芽素和類萌芽素系統(tǒng)發(fā)育
    1.2 萌芽素和類萌芽素功能
        1.2.1 草酸氧化酶功能
        1.2.2 超氧化物歧化酶功能
        1.2.3 葡萄糖焦磷酸化酶功能
    1.3 植物萌芽素和類萌芽素基因家族研究進(jìn)展
        1.3.1 萌芽素和類萌芽素在擬南芥中的研究
        1.3.2 萌芽素和類萌芽素在大麥中的研究
    1.4 萌芽素和類萌芽素對(duì)逆境脅迫的響應(yīng)
        1.4.1 萌芽素和類萌芽素對(duì)生物脅迫響應(yīng)
        1.4.2 萌芽素和類萌芽素對(duì)非生物脅迫的響應(yīng)
    1.5 研究目的與意義
    1.6 主要研究?jī)?nèi)容
2 材料與方法
    2.1 植物材料
    2.2 菌株與載體
    2.3 數(shù)據(jù)庫(kù)、序列分析所用的軟件及在線分析網(wǎng)站
    2.4 生化試劑
    2.5 主要溶液配方
    2.6 主要儀器
    2.7 引物的設(shè)計(jì)與合成
    2.8 方法
        2.8.1 小麥材料的準(zhǔn)備
        2.8.2 TiGLP1基因克隆
        2.8.3 TiGLP1基因功能分析
        2.8.4 TaGLP全基因鑒定方法
3 結(jié)果與分析
    3.1 TiGLP1基因克隆及序列分析
        3.1.1 TiGLP1基因cDNA的獲得
        3.1.2 TiGLP1基因在小麥YN15、CS、SN6306和中間偃麥草基因組DNA擴(kuò)增比對(duì)
        3.1.3 TiGLP1蛋白多序列比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化分析
    3.2 TiGLP1基因的功能驗(yàn)證
        3.2.1 白粉病菌誘導(dǎo)下TiGLP1基因的表達(dá)上調(diào)
        3.2.2 TiGLP1蛋白亞細(xì)胞定位于胞外
        3.2.3 TiGLP1轉(zhuǎn)基因煙草及鑒定
        3.2.4 轉(zhuǎn)TiGLP1基因煙草響應(yīng)Pst DC3000生理生化變化
    3.3 TaGLP基因家族鑒定和分析
        3.3.1 小麥中TaGLP基因的鑒定
        3.3.2 TaGLP基因的染色體分布
        3.3.3 TaGLP基因的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析
        3.3.4 TaGLP基因的基因結(jié)構(gòu)和保守基序分析
        3.3.5 TaGLP基因在小麥-Bgt互作中的表達(dá)分析
        3.3.6 TaGLP基因的熒光定量分析
4 討論
    4.1 TiGLP1基因參與了白粉病菌的侵染植物的抗病過(guò)程
    4.2 TiGLP1基因能夠增強(qiáng)植物對(duì)Pst DC3000的抗性
    4.3 TaGLP基因家族成員鑒定、染色體位置和系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào):3789465

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