蕓薹根腫菌侵染所引起的十字花科根腫病是一種感染性極強(qiáng)的世界級土傳病害,可以造成十字花科作物的大量減產(chǎn)。根腫菌侵染寄主根部后,將從寄主中攝取大量能源物質(zhì)供以自身的生長繁殖最終形成腫塊。糖外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（sugars will eventually be exported transporters,SWEET）是近年新發(fā)現(xiàn)的一類糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,除了參與調(diào)控韌皮部裝載,逆境脅迫,生長發(fā)育等過程,還在寄主-病原菌互作中發(fā)揮重要作用。諸多研究表明,植物病原菌侵染寄主后將誘導(dǎo)寄主中的SWEEET基因的表達(dá)量上調(diào)從而參與病原菌-寄主之間的互作。根據(jù)本課題組的前期研究結(jié)果,我們發(fā)現(xiàn)了一些在根腫菌侵染后表達(dá)量大量上調(diào)的BraSWEET基因,經(jīng)表達(dá)分析后初步認(rèn)定這些基因?yàn)榇蟀撞?根腫菌互作的關(guān)鍵BraSWEET基因。在此研究基礎(chǔ)上,本論文對候選關(guān)鍵BraSWEET基因進(jìn)行了表達(dá)驗(yàn)證并使用己糖突變酵母菌株對大白菜-根腫菌互作的關(guān)鍵BraSWEET蛋白進(jìn)行了異源功能互補(bǔ)驗(yàn)證,明確了這些關(guān)鍵BraSWEET蛋白的糖轉(zhuǎn)運(yùn)能力。大白菜-根腫菌互作中的關(guān)鍵BraSWEET蛋白間的互作分析是通過mbSUS系統(tǒng)酵母雙雜交試驗(yàn)及... 

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 根腫病及其病原菌概論
        1.1.1 根腫病的危害
        1.1.2 根腫菌的生活史
        1.1.3 根腫病的防治
    1.2 SWEET蛋白研究進(jìn)展
        1.2.1 SWEET蛋白結(jié)構(gòu)
        1.2.2 SWEET蛋白的生理功能
    1.3 SWEET蛋白在植物-病原菌互作中的研究
    1.4 本研究的目的及意義
第二章 大白菜-根腫菌互作中關(guān)鍵BraSWEETs蛋白的篩選及其糖轉(zhuǎn)運(yùn)特性驗(yàn)證
    2.1 試驗(yàn)材料
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 大白菜及擬南芥RNA的提取及反轉(zhuǎn)錄
        2.2.2 大白菜-根腫菌互作中關(guān)鍵SWEETs蛋白的篩選
        2.2.3 酵母糖轉(zhuǎn)運(yùn)表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.2.4 酵母己糖缺陷型突變菌株EBY.4000感受態(tài)的制備
        2.2.5 酵母表達(dá)載體的轉(zhuǎn)化
        2.2.6 缺陷型酵母糖轉(zhuǎn)運(yùn)功能互補(bǔ)試驗(yàn)
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 大白菜-根腫菌互作中關(guān)鍵BraSWEETs基因的表達(dá)分析驗(yàn)證
        2.3.2 酵母糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體的構(gòu)建及檢測
        2.3.3 酵母糖轉(zhuǎn)運(yùn)特性驗(yàn)證
    2.4 討論
第三章 大白菜-根腫菌互作關(guān)鍵BraSWEETs蛋白間互作分析
    3.1 試驗(yàn)材料
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 膜蛋白酵母雙雜載體的構(gòu)建
        3.2.2 酵母雙雜菌株感受態(tài)的制備
        3.2.3 酵母雙雜表達(dá)載體的轉(zhuǎn)化
        3.2.4 mbSUS膜蛋白酵母雙雜試驗(yàn)
        3.2.5 雙分子熒光互補(bǔ)載體的構(gòu)建
        3.2.6 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化
        3.2.7 煙草農(nóng)桿菌注射及雙分子熒光互補(bǔ)的顯微觀察
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 酵母雙雜交載體的構(gòu)建
        3.3.2 mbSUS系統(tǒng)酵母雙雜驗(yàn)證關(guān)鍵BraSWEETs蛋白之間互作
        3.3.3 雙分子熒光互補(bǔ)載體構(gòu)建
        3.3.4 雙分子熒光互補(bǔ)驗(yàn)證關(guān)鍵BraSWEETs蛋白之間互作
    3.4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大白菜根腫病病原菌檢測與防治技術(shù)研究[J]. 黃安吉.  農(nóng)技服務(wù). 2015(06)
[2]白菜根腫病菌拮抗微生物的篩選及防治效果評價[J]. 孫良菲,任佐華,彭沙莎,黃小莉,董俊,劉二明.  湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(01)
[3]十字花科根腫病研究進(jìn)展[J]. 王靖,黃云,李小蘭,黎懷忠.  植物保護(hù). 2011(06)
[4]油菜根腫病菌拮抗微生物的篩選及其防治效果測定[J]. 王靖,黃云,張艷,姚佳.  中國油料作物學(xué)報(bào). 2011(02)
[5]防治白菜根腫病的藥劑篩選[J]. 李妍,謝學(xué)文,石延霞,向文勝,李寶聚.  農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào). 2010(01)
[6]油菜根腫病菌的形態(tài)和休眠孢子的生物學(xué)特性[J]. 黃云,馬淑青,李曉琴,王靖,胡曉玲.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007(07)
[7]十字花科蔬菜根腫病菌生理小種及接種方法[J]. 丁云花,簡元才.  中國蔬菜. 2005(08)
[8]十字花科植物根腫病及抗病育種研究進(jìn)展[J]. 孫保亞,沈向群,郭海峰,周永紅.  中國蔬菜. 2005(04)
[9]甘藍(lán)根腫病菌的生物學(xué)特性研究[J]. 肖崇剛,郭向華.  菌物系統(tǒng). 2002(04)
[10]十字花科植物根腫病及抗根腫病育種研究進(jìn)展[J]. 司軍,李成瓊,任雪松,肖崇剛.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2002(02)

碩士論文
[1]大白菜抗根腫病基因CRq的精細(xì)定位及克隆[D]. 賈豪.鄭州大學(xué) 2018
[2]成都市十字花科根腫病調(diào)查及藥劑防治篩選[D]. 張日波.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



本文編號：3646820