我國目前流感病毒疫苗都是利用雞胚基質生產(chǎn)的。然而,由于雞胚數(shù)量的限制和雞胚工藝擴大生產(chǎn)的可及性差,一旦大流感來臨時,用雞胚基質生產(chǎn)的流感疫苗將遠遠不能夠滿足人們需求。而以細胞基質生產(chǎn)流感疫苗則不受雞胚數(shù)量的限制、質量可控、易于擴大規(guī)模,且能適用于對雞蛋蛋白過敏的人群。MDCK細胞是當前最受關注的流感疫苗生產(chǎn)的細胞基質之一。細胞基質病毒性疫苗的培養(yǎng)常�？煞譃閮蓚�階段,即細胞生長期和產(chǎn)毒期。為了更加高效和經(jīng)濟的研發(fā)可靠的疫苗生產(chǎn)工藝,首先設計在實驗室規(guī)模利用搖床和搖瓶摸索了基本工藝并優(yōu)化工藝參數(shù)。確定細胞傳代的參數(shù),按梯度密度（2×10⁶、1.5×10⁶、1×10⁶、7×10⁵和5×10⁵cells/mL）接種細胞于細胞搖瓶,然后對比不同細胞接種密度的細胞生長曲線,同時,監(jiān)測各實驗組間的細胞活率、細胞代謝和細胞周期情況,結果表明在48h時,各梯度密度接種都處于細胞生長分裂的對數(shù)生長期,細胞增長最高達到了8.3×10⁶ cells/mL;各梯度密度的細胞接種幾乎... 

【文章來源】：武漢生物制品研究所湖北省

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
技術路線
第一章 基于MDCK細胞培養(yǎng)的基本工藝參數(shù)摸索
    1.1 實驗材料
    1.2 實驗方法
    1.3 實驗結果
    1.4 小結與討論
第二章 懸浮MDCK細胞培養(yǎng)工藝的優(yōu)化研究
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗設計
    2.3 實驗結果
    2.4 小結與討論
第三章 懸浮MDCK細胞培養(yǎng)的規(guī)�；糯笱芯�
    3.1 實驗材料
    3.2 實驗方法
    3.3 實驗結果
    3.4 小結與討論
第四章 總結和展望
    4.1 總結
    4.2 創(chuàng)新點
    4.3 展望
參考文獻
綜述
    參考文獻
在讀期間論文發(fā)表情況
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]懸浮MDCK細胞培養(yǎng)H7N9流感病毒時TPCK胰酶添加量的優(yōu)化研究[J]. 孟子延,張家友,劉琛,張哲罡,邱冉,羅丹,施金榮,趙巍,夏志武,楊曉明.  中華微生物學和免疫學雜志. 2019 (11)
[2]TPCK胰酶和普通胰酶對各亞型流感病毒在MDCK細胞分離培養(yǎng)中的影響[J]. 馬萍,李欣玥.  中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2017(18)
[3]犬腎細胞MDCK研究進展[J]. 萬玉林,陶世宇,武發(fā)菊,柴立麗,安芳蘭,楊進才,劉學榮.  安徽農(nóng)業(yè)科學. 2017(23)
[4]A549細胞凍存與復蘇方法的改進[J]. 季曉宇,鞠曉梅,湯賀,姜萌,羅來鵬,劉宇軒,侯毅鞠.  中國科技信息. 2016(13)
[5]規(guī)�；溉榧毎囵B(yǎng)技術生產(chǎn)病毒疫苗——過程工程和生物反應器[J]. 楊艷坤,郭雯雯,隋涌,白仲虎.  生物產(chǎn)業(yè)技術. 2015(01)
[6]反應器細胞懸浮培養(yǎng)和微載體培養(yǎng)技術在動物疫苗生產(chǎn)中的應用[J]. 張韌,王建超,陳文慶,劉華杰,高飛,徐舸辰,林龍飛.  中國獸藥雜志. 2012(11)
[7]BHK21細胞凍存密度與復蘇后活力的關系分析[J]. 郭海平,郭冠萍,郝鵬.  畜牧與飼料科學. 2010(03)
[8]微載體規(guī)�；囵B(yǎng)MDCK細胞增殖H9N2亞型禽流感病毒的研究[J]. 李春艷,肖晶,李曦,劉娣.  中國人獸共患病學報. 2009(12)
[9]Apoptosis and Proinflammatory Cytokine Responses of Primary Mouse Microglia and Astrocytes Induced by Human H1N1 and Avian H5N1 Influenza Viruses[J]. Gefei Wang1,2,Juan Zhang1,2,Weizhong Li1,2,Gang Xin1,2,Yun Su1,2,Yuanli Gao1,2,Heng Zhang1,2,Guimei Lin1,2,Xiaoyang Jiao1,2 and Kangsheng Li1,2,3 1Department of Microbiology and Immunology,Shantou University Medical College,Shantou 515041,China; 2The Key Immunopathology Laboratory of Guangdong Province,Shantou University Medical College,Shantou 515041,China.  Cellular & Molecular Immunology. 2008(02)
[10]動物細胞培養(yǎng)用生物反應器及其力學環(huán)境[J]. 何輝,樊瑜波.  生物醫(yī)學工程學雜志. 2004(03)

博士論文
[1]基于MDCK細胞高密度培養(yǎng)的甲型流感病毒疫苗生產(chǎn)工藝開發(fā)與優(yōu)化[D]. 黃錠.華東理工大學 2016

碩士論文
[1]動物細胞培養(yǎng)用生物反應器內流體混合及氣液傳質特性研究[D]. 鄭兵兵.華東理工大學 2013



本文編號：3515611