褪黑激素（melatonin, MEL）是一種生物體內(nèi)強(qiáng)有效的天然抗氧化劑,不僅自身可以清除自由基,而且還可以增強(qiáng)體內(nèi)抗氧化酶的作用,減輕活性氧對(duì)機(jī)體的損害。目前對(duì)于MEL抗氧化功能的研究多集中于哺乳動(dòng)物的卵母細(xì)胞,而對(duì)于同樣在卵泡發(fā)育過(guò)程中起著重要作用的顆粒細(xì)胞研究較少,尤其在鳥(niǎo)類上這方面相關(guān)的報(bào)道還未曾見(jiàn)到。本研究以天府肉鵝母系母鵝為試驗(yàn)材料,研究了鵝卵泡卵黃內(nèi)MEL的含量和不同等級(jí)卵泡顆粒層細(xì)胞中抗氧化酶（SOD1、GPx1、CAT）的表達(dá)量,探討MEL在卵泡發(fā)育過(guò)程中的抗氧化作用。同時(shí)以鵝的顆粒細(xì)胞為模型,初步探討了MEL在鵝顆粒細(xì)胞中的抗氧化作用,再用H2O2模擬氧化應(yīng)激對(duì)顆粒細(xì)胞造成損傷,最后對(duì)H202誘導(dǎo)的顆粒細(xì)胞進(jìn)行MEL預(yù)處理,進(jìn)一步研究MEL可以緩解H2O2對(duì)顆粒細(xì)胞造成的凋亡,從而驗(yàn)證MEL在鵝顆粒細(xì)胞中的抗氧化作用。主要研究結(jié)果如下：（1）測(cè)了鵝等級(jí)卵泡卵黃中MEL的含量,發(fā)現(xiàn)隨著卵泡的發(fā)育成熟,MEL的含量呈現(xiàn)遞增的趨勢(shì),在F1卵泡內(nèi)達(dá)到最大值8.865 pg/ml,等級(jí)卵泡內(nèi)的MEL均高于血漿（5.811 pg/ml）,表明MEL在卵泡的發(fā)育過(guò)程中起著重要作... 

【文章來(lái)源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要符號(hào)說(shuō)明
前言
1. 文獻(xiàn)綜述
    1.1 褪黑激素的發(fā)現(xiàn)
    1.2 褪黑激素的生物合成、代謝與分布
        1.2.1 褪黑激素的生物合成
        1.2.2 褪黑激素的代謝
        1.2.3 褪黑激素的分布
    1.3 褪黑激素的受體
    1.4 褪黑激素的抗氧化功能
        1.4.1 褪黑激素清除自由基
        1.4.2 褪黑激素對(duì)抗氧化酶和促氧化酶的作用
        1.4.3 褪黑激素增強(qiáng)線粒體的功能
    1.5 排卵引起氧化應(yīng)激
    1.6 褪黑激素能夠緩解卵泡內(nèi)的氧化應(yīng)激
    1.7 顆粒細(xì)胞在卵泡發(fā)育過(guò)程中的作用
    1.8 本試驗(yàn)?zāi)康募耙饬x
2. 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物的挑選
        2.1.2 組織樣品的采集
        2.1.3 顆粒細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.1.4 主要試劑與試劑盒
        2.1.5 主要試劑配制
        2.1.6 主要試驗(yàn)器材與軟件
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 組織cDNA的準(zhǔn)備
        2.2.2 血漿及卵黃內(nèi)MEL含量的測(cè)定
        2.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量基因表達(dá)檢測(cè)
        2.2.4 鵝原代顆粒細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2.5 MEL、H_2O_2處理鵝顆粒細(xì)胞及最適濃度的篩選
        2.2.6 MEL、H_2O_2共同處理顆粒細(xì)胞
    2.3 數(shù)據(jù)處理與分析
3. 結(jié)果與分析
    3.1 鵝組織RNA的提取
    3.2 鵝等級(jí)前卵泡和等級(jí)卵泡卵黃中MEL含量水平
    3.3 鵝等級(jí)卵泡顆粒層中抗氧化酶的基因表達(dá)
    3.4 MEL對(duì)鵝顆粒細(xì)胞氧化相關(guān)指標(biāo)的影響
        3.4.1 MEL對(duì)細(xì)胞活性的影響
        3.4.2 MEL對(duì)細(xì)胞內(nèi)ROS含量的影響
        3.4.3 MEL對(duì)細(xì)胞內(nèi)抗氧化、凋亡等相關(guān)基因表達(dá)的影響
        3.4.4 MEL對(duì)細(xì)胞內(nèi)抗氧化相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    3.5 氧化應(yīng)激模型的建立
        3.5.1 H_2O_2對(duì)細(xì)胞活性的影響
        3.5.2 H_2O_2對(duì)細(xì)胞內(nèi)抗氧化、凋亡等相關(guān)基因表達(dá)的影響
        3.5.3 H_2O_2對(duì)細(xì)胞內(nèi)抗氧化等相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    3.6 MEL對(duì)氧化應(yīng)激狀態(tài)下鵝顆粒細(xì)胞相關(guān)氧化指標(biāo)的影響
        3.6.1 MEL對(duì)氧化應(yīng)激狀態(tài)下鵝顆粒細(xì)胞活性的影響
        3.6.2 MEL對(duì)氧化應(yīng)激狀態(tài)下鵝顆粒細(xì)胞內(nèi)ROS含量的影響
        3.6.3 MEL對(duì)氧化應(yīng)激狀態(tài)下鵝顆粒細(xì)胞凋亡的影響
        3.6.4 MEL對(duì)氧化應(yīng)激狀態(tài)下鵝顆粒細(xì)胞內(nèi)抗氧化、凋亡等相關(guān)基因表達(dá)的影響
4. 討論
    4.1 褪黑激素及抗氧化酶均表達(dá)于卵泡發(fā)育進(jìn)程
    4.2 褪黑激素促進(jìn)鵝顆粒細(xì)胞的發(fā)育
    4.3 MEL能夠緩解氧化應(yīng)激引起顆粒細(xì)胞的凋亡
5. 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Ghrelin對(duì)雞等級(jí)前卵泡發(fā)育的影響[J]. 林金杏,毛赟杰,米玉玲,張才喬.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(09)
[2]前列腺素對(duì)禽類等級(jí)卵泡發(fā)育的影響[J]. 金艷梅.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2010(04)
[3]褪黑激素對(duì)受損傷腦神經(jīng)元的保護(hù)作用與bcl-2蛋白過(guò)度表達(dá)有關(guān)（英文）[J]. 凌祥,張玲妹,陸世鐸,李學(xué)君,孫鳳艷.  Acta Pharmacologica Sinica. 1999(05)

博士論文
[1]褪黑素對(duì)H2O2誘導(dǎo)的大鼠腦微血管周細(xì)胞損傷的影響[D]. 鹿文葆.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2012



本文編號(hào)：3436468