發(fā)布時(shí)間：2021-07-31 09:24

　　隨著生活水平的提高,人們對(duì)膳食結(jié)構(gòu)的要求越來越高,畜產(chǎn)品的營養(yǎng)價(jià)值、風(fēng)味品質(zhì)及衛(wèi)生安全備受關(guān)注,對(duì)優(yōu)質(zhì)羊肉需求不斷加大。肉用動(dòng)物脂肪分布和甘油三酯的沉積是影響肉質(zhì)風(fēng)味和胴體品質(zhì)的重要因素。動(dòng)物體脂沉積受前體脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響,前體脂肪細(xì)胞的增殖和分化受多種因素調(diào)控。本文采用Ι型膠原酶消化分離小尾寒羊尾部和皮下體脂肪細(xì)胞,進(jìn)行原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng),添加不同長鏈脂肪酸誘導(dǎo)分化,觀察細(xì)胞形態(tài),通過油紅O染色,實(shí)時(shí)熒光定量PCR法,研究長鏈脂肪酸對(duì)綿羊前體脂肪細(xì)胞增殖活性和成脂分化的影響及其對(duì)相關(guān)基因表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.小尾寒羊尾部前體脂肪細(xì)胞接種后4h開始有少量細(xì)胞貼壁,腹部皮下前體脂肪細(xì)胞接種后6h后開始有少量細(xì)胞貼壁;開始貼壁的細(xì)胞形態(tài)多為三角形和不規(guī)則形狀,細(xì)胞生長至鋪滿瓶底時(shí),細(xì)胞形態(tài)多呈長梭形。細(xì)胞生長曲線呈“S”形,尾部前體脂肪細(xì)胞倍增時(shí)間為22.04 h,顯著短于皮下前體脂肪細(xì)胞29.56h（P<0.01）;尾部前體脂肪細(xì)胞最大增殖密度為58.9×10⁴個(gè)/mL,顯著大于皮下前體脂肪細(xì)胞29.7×10⁴個(gè)/mL（P... 

【文章來源】：西北民族大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

尾部和皮下前體脂肪細(xì)胞分離培養(yǎng)及傳代A：尾部前體脂肪細(xì)胞培養(yǎng)6d(第一代)；B：尾部前體脂肪細(xì)胞培養(yǎng)12d(第一代)；C：尾部前體脂肪細(xì)胞培養(yǎng)7d(第二代)；D：皮下前體脂肪細(xì)胞培養(yǎng)8d(第一代)；E：皮下前體脂肪細(xì)胞培養(yǎng)15d(第一代)；F：皮下前體脂肪細(xì)胞培養(yǎng)8d(第二代)

西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院2017級(jí)碩士研究生畢業(yè)論文17性（圖3-C）；添加分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)3d后，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞形態(tài)由長梭形變成橢圓形，再換維持分化液培養(yǎng)2d后，細(xì)胞體積變大，而且細(xì)胞質(zhì)中開始出現(xiàn)可辨的小脂滴，此時(shí)，細(xì)胞分化已經(jīng)開始接近分化終末階段，細(xì)胞再無無分裂增殖的能力（圖3-D），將維持分化培養(yǎng)基換為完全培養(yǎng)基，每隔2d換液1次，培養(yǎng)10d后，脂滴體積變大，數(shù)量變多，且大部分脂滴融合，使細(xì)胞呈戒指狀（圖3-E），培養(yǎng)至第12d，油紅O染色，脂滴染成紅色（圖3-F）。圖3尾部前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化及油紅O染色A：對(duì)照組誘導(dǎo)5d；B：對(duì)照組誘導(dǎo)10d；C：對(duì)照組誘導(dǎo)12d后油紅O染色；D：實(shí)驗(yàn)組誘導(dǎo)5d；E：實(shí)驗(yàn)組誘導(dǎo)10d；F：實(shí)驗(yàn)組誘導(dǎo)12d后油紅O染色。Figure3DifferentiationoftailpreadipocytesandoilredOstainingA:controlgroupinduced5d;B:controlgroupinduced10d;C:controlgroupinduced12doilredOstaining;D:experimentalgroupinduced5d;E:experimentalgroupinduced10d;F:experimentalgroupinduced12doilredOstaining.2.3.3.2皮下前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化及油紅O染色皮下前體脂肪細(xì)胞添加完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3d后，空白對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)為長梭形，再換維持分化培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)2d后，細(xì)胞形態(tài)仍為長梭形（圖4-A），將維持分化培養(yǎng)基換為完全培養(yǎng)基且每隔2d換液，繼續(xù)培養(yǎng)10d后，細(xì)胞形態(tài)仍為長梭形，無可辨脂滴（圖4-B），培養(yǎng)至第12d，油紅O染色，呈陰性（圖4-C）；添加分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)3d后，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞形態(tài)由長梭形變成橢圓形，換維持分化培養(yǎng)基培養(yǎng)2d后，細(xì)胞體積變大，而且細(xì)胞質(zhì)中開始出現(xiàn)可辨的小脂滴，此時(shí)，細(xì)胞分化已經(jīng)開始接近分化終末階段，細(xì)胞再無無分裂增殖的能力ABCDEF

西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院2017級(jí)碩士研究生畢業(yè)論文17性（圖3-C）；添加分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)3d后，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞形態(tài)由長梭形變成橢圓形，再換維持分化液培養(yǎng)2d后，細(xì)胞體積變大，而且細(xì)胞質(zhì)中開始出現(xiàn)可辨的小脂滴，此時(shí)，細(xì)胞分化已經(jīng)開始接近分化終末階段，細(xì)胞再無無分裂增殖的能力（圖3-D），將維持分化培養(yǎng)基換為完全培養(yǎng)基，每隔2d換液1次，培養(yǎng)10d后，脂滴體積變大，數(shù)量變多，且大部分脂滴融合，使細(xì)胞呈戒指狀（圖3-E），培養(yǎng)至第12d，油紅O染色，脂滴染成紅色（圖3-F）。圖3尾部前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化及油紅O染色A：對(duì)照組誘導(dǎo)5d；B：對(duì)照組誘導(dǎo)10d；C：對(duì)照組誘導(dǎo)12d后油紅O染色；D：實(shí)驗(yàn)組誘導(dǎo)5d；E：實(shí)驗(yàn)組誘導(dǎo)10d；F：實(shí)驗(yàn)組誘導(dǎo)12d后油紅O染色。Figure3DifferentiationoftailpreadipocytesandoilredOstainingA:controlgroupinduced5d;B:controlgroupinduced10d;C:controlgroupinduced12doilredOstaining;D:experimentalgroupinduced5d;E:experimentalgroupinduced10d;F:experimentalgroupinduced12doilredOstaining.2.3.3.2皮下前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化及油紅O染色皮下前體脂肪細(xì)胞添加完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3d后，空白對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)為長梭形，再換維持分化培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)2d后，細(xì)胞形態(tài)仍為長梭形（圖4-A），將維持分化培養(yǎng)基換為完全培養(yǎng)基且每隔2d換液，繼續(xù)培養(yǎng)10d后，細(xì)胞形態(tài)仍為長梭形，無可辨脂滴（圖4-B），培養(yǎng)至第12d，油紅O染色，呈陰性（圖4-C）；添加分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)3d后，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞形態(tài)由長梭形變成橢圓形，換維持分化培養(yǎng)基培養(yǎng)2d后，細(xì)胞體積變大，而且細(xì)胞質(zhì)中開始出現(xiàn)可辨的小脂滴，此時(shí)，細(xì)胞分化已經(jīng)開始接近分化終末階段，細(xì)胞再無無分裂增殖的能力ABCDEF

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3313201