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山東省部分地區(qū)肉雞養(yǎng)殖場大腸桿菌的分離鑒定及耐藥性分析

發(fā)布時間:2021-07-02 10:17
  山東省肉雞年出欄量達16.48億只,雞肉產(chǎn)量達232.8萬噸,居全國首位,是我國的肉雞產(chǎn)業(yè)大省。肉雞養(yǎng)殖業(yè)大發(fā)展同時,動物疾病、畜禽廢棄物污染、畜禽產(chǎn)品食品安全與品質(zhì)等養(yǎng)殖業(yè)的難題也伴隨產(chǎn)生。大腸桿菌(Escherichia coli)廣泛存在于整個飼養(yǎng)環(huán)節(jié),乃至于食品鏈中。致病性大腸桿菌引起的禽類感染,是養(yǎng)殖業(yè)的難題之一,耐藥性的增加使該菌的防控變得更困難。不同來源的E.coli之間,甚至E.coli和其它細菌之間也存在廣泛的耐藥基因的轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致E.coli的耐藥性問題,不僅造成嚴重的經(jīng)濟損失,還會引發(fā)食品安全問題和公共衛(wèi)生問題,危害人類健康。在世界各國一致認為細菌耐藥性的問題會深遠影響世界經(jīng)濟的背景下,E.coli的耐藥性問題成為了研究的熱點。經(jīng)國內(nèi)外研究人員對E.coli耐藥性不斷監(jiān)測和研究發(fā)現(xiàn),E.coli的耐藥性逐年趨向復(fù)雜化和嚴重化。但是對山東地區(qū)肉雞源E.coli在一個養(yǎng)殖周期內(nèi)的變化及耐藥特征研究尚未有報道。本次研究在山東省的泰安(Farm 1)、臨沂(Farm 2)、聊城(Farm 3)、濰坊(Farm4)、濱州(Farm 5)和菏澤(Farm 6)六個地區(qū)各選一個肉... 

【文章來源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

山東省部分地區(qū)肉雞養(yǎng)殖場大腸桿菌的分離鑒定及耐藥性分析


大腸桿菌造成的肝周炎、心包炎Fig.1PerihepatitisandpericarditiscausedbyE.coli

分布情況,山東省,采樣點,分布情況


山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文152材料與方法2.1材料2.1.1樣本采集山東省位于中國東部沿海、黃河下游,總面積15.7萬平方公里,轄16個地級市。本次研究選擇了泰安(Farm1),臨沂(Farm2),聊城(Farm3),濰坊(Farm4),濱州(Farm5)菏澤(Farm6)六個常規(guī)肉雞養(yǎng)殖場(見圖2)進行E.coli流行情況調(diào)查。所有被調(diào)查的的雞群的養(yǎng)殖周期約為40天。Farm1至Farm6從每個養(yǎng)雞場中隨機選擇兩個雞舍,在養(yǎng)殖周期的三個時間點(雛雞孵化后的1至2天,17至20日齡和35至40日齡)進行采樣(采樣點背景資料見附表1)。從2019年5月至7月,在Farm1、Farm2、Farm3、Farm4、Farm5和Farm6六個養(yǎng)雞場共采集了近700多份樣本。在每次采樣過程中,每棟雞舍隨機選取20只雞,用棉簽采集肛門拭子樣本;從4處不同的地點采集4份糞便樣本(約0.5g),分別置于2ml無菌離心管中;隨機選取兩處投水器,用2ml無菌離心管收集2個飲用水樣本;用棉簽拭子采取2處墻表面樣本;雞舍內(nèi)外各兩處放置LB平板,敞口放置15min左右采集空氣中細菌樣本。所有棉簽提前用液體LB浸濕滅菌,離心管滅菌。各種棉簽拭子樣本置于2ml離心管中存放。所有采樣后的樣品在到達實驗室處理之前放置于4℃保溫箱內(nèi)。圖2山東省內(nèi)采樣點的分布情況Fig.2distributionofsamplingpointsinShandongProvince

培養(yǎng)基,菌落,質(zhì)譜儀,微生物


山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文213結(jié)果與分析3.1E.coli的初步篩選如圖3所示,是某一疑似E.coli的菌落,經(jīng)反復(fù)劃線純化后的結(jié)果。在麥康凱培養(yǎng)基上培養(yǎng)12h左右,呈現(xiàn)粉紅色的,圓形隆起、光滑濕潤、邊緣整齊的菌落。選擇單菌落挑起進行下一步的微生物質(zhì)譜儀鑒定。圖3E.coli在麥康凱培養(yǎng)基上的生長表現(xiàn)Fig.3GrowthcharacteristicsofE.colionMacconkeymedium3.2E.coli的鑒定采取微生物質(zhì)譜儀的自動檢定系統(tǒng)(布魯克IVDMALDIBiotyper)對疑似菌落進行鑒定,結(jié)果是以報告表格的形式輸出。得分大于2.0可以得到可靠的種屬水平鑒定結(jié)果。如圖4所示,是部分的鑒定結(jié)果。圖中顯示的5個被檢樣品得分均大于2.0,結(jié)果可靠。其中A2,A3,A5鑒定結(jié)果是E.coli,A1與A4是非E.coli。圖4微生物質(zhì)譜儀鑒定部分結(jié)果Fig.4TheidentificationresultsverifiedbyIVDMALDIBiotyper

【參考文獻】:
期刊論文
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[3]山東地區(qū)雞源大腸桿菌中超廣譜β-內(nèi)酰胺酶和磷霉素耐藥基因的流行性研究[J]. 王志浩,顏碩,王昱瓔,劉寶濤.  中國獸醫(yī)雜志. 2019(07)
[4]北京地區(qū)健康鴨腸道大腸桿菌血清型鑒定和耐藥性分析[J]. 劉硯涵,張建偉,林嘉寶,宮曉瑋,夏兆飛.  中國家禽. 2019(12)
[5]唐山和秦皇島地區(qū)肉雞源致病性大腸桿菌耐藥性與耐藥基因的檢測[J]. 李蘊玉,葛成,焦賀靜,張香齋,賈青輝,李佩國,張建文,張召興.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2019(12)
[6]重慶地區(qū)雞源大腸桿菌、沙門氏桿菌耐藥性的測定與分析[J]. 陳春林,馮剛,秦楊,付利芝.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2019(12)
[7]山東地區(qū)雞源致病性大腸桿菌的相關(guān)基因檢測及藥敏試驗[J]. 張子越,趙魯,趙巧雅,王雷,齊霖,彭燕,商敏,許薔,路曉,吳靜.  家禽科學(xué). 2019(06)
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[9]畜禽糞污源抗生素及耐藥基因在環(huán)境中的歸趨[J]. 黃榮才,高勝濤,范士杰,馬露,卜登攀.  生物技術(shù)進展. 2019(02)
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博士論文
[1]抗生素及其耐藥性在畜禽糞便-土壤-蔬菜中的傳播和轉(zhuǎn)移[D]. 張昊.河南師范大學(xué) 2018
[2]我國肉雞產(chǎn)業(yè)高致病性禽流感影響與防控的經(jīng)濟研究[D]. 黃澤穎.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[3]牦牛、牧民源大腸桿菌分離鑒定、耐藥基因檢測、PFGE分析及耐藥性傳遞的研究[D]. 羊云飛.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]禽致病性大腸桿菌DE205B黏附及侵襲相關(guān)因子的致病作用[D]. 王少輝.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011

碩士論文
[1]家庭式養(yǎng)殖地區(qū)多環(huán)境介質(zhì)中攜帶mcr-1大腸埃希菌的流行特征[D]. 姬祥.山東大學(xué) 2019
[2]魯西南地區(qū)畜禽大腸桿菌mcr-1耐藥基因攜帶情況調(diào)查[D]. 鄭常委.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[3]多重耐藥肺炎克雷伯菌KP1276的耐藥性與水平轉(zhuǎn)移的機制研究[D]. 祝力騁.浙江大學(xué) 2019
[4]山東商品雞養(yǎng)殖、屠宰、銷售環(huán)節(jié)中細菌耐藥性傳播規(guī)律研究[D]. 張利鋒.中國疾病預(yù)防控制中心 2016
[5]山東部分地區(qū)肉雞大腸桿菌病耐藥性檢測及臨床治療研究[D]. 樊愛麗.吉林大學(xué) 2015
[6]泰安地區(qū)肉雞大腸桿菌病病原血清型鑒定及藥敏試驗[D]. 趙啟會.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[7]泰安地區(qū)雞源大腸桿菌的分離鑒定與耐藥性分析[D]. 宿志民.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015



本文編號:3260279

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