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水稻病程相關(guān)蛋白質(zhì)OsPR1A在白葉枯病抗性反應(yīng)中的功能研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-27 03:38
  水稻(Oryzasativa L.)是全球最重要的經(jīng)濟(jì)作物和糧食作物之一,水稻的消費(fèi)量在我國(guó)糧食作物中占主導(dǎo)地位,保證水稻產(chǎn)量的穩(wěn)定和高產(chǎn)對(duì)于保證我國(guó)糧食安全具有非常重要的戰(zhàn)略地位。同時(shí),全球環(huán)境繼續(xù)變暖,極端氣候頻繁出現(xiàn),給作物帶來很多不可預(yù)知的風(fēng)險(xiǎn)。所以,在保證和增加水稻產(chǎn)量的基礎(chǔ)上,不斷提高水稻抵抗非生物脅迫物和生物脅迫的能力,值得深入研究和探討。水稻Xa21于1995年被克隆,屬于免疫系統(tǒng)相關(guān)的類受體激酶,對(duì)水稻白葉枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)具有廣譜抗性。病程相關(guān)蛋白質(zhì)(Pathogenesis-related proteins,PR)是由植物受到外源病原物侵染或非生物脅迫刺激產(chǎn)生的一類低分子量蛋白質(zhì),水稻OsPR1家族屬于類絲氨酸羧肽酶(serine carboxypeptidase-like proteins,SCPLs),在水稻、煙草、番茄等中都有發(fā)現(xiàn),其中OsPR1A是最早被鑒定和克隆的病程相關(guān)蛋白質(zhì)之一,可能參與了水稻Xa21介導(dǎo)抗白吐枯病菌信號(hào)途徑。本研究目的有,第一,研究OsPR1A對(duì)水稻農(nóng)藝性狀的影響并了解在非生物... 

【文章來源】:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】:50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 非生物脅迫對(duì)水稻生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        1.1.1 冷脅迫對(duì)水稻生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        1.1.2 熱脅迫對(duì)水稻生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        1.1.3 旱脅迫對(duì)水稻生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        1.1.4 淹脅迫對(duì)水稻生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        1.1.5 鹽脅迫對(duì)水稻生長(zhǎng)發(fā)育的影響
    1.2 水稻受到生物脅迫的影響
        1.2.1 水稻白葉枯病
        1.2.2 水稻稻瘟病
    1.3 水稻受體激酶XA21的研究進(jìn)展
    1.4 水稻病程相關(guān)蛋白質(zhì)OsPR1A相關(guān)研究
    1.5 PCR和WB在轉(zhuǎn)基因植物的檢測(cè)和蛋白表達(dá)中的應(yīng)用
        1.5.1 PCR在轉(zhuǎn)基因植物的檢測(cè)中的應(yīng)用
        1.5.2 WB在轉(zhuǎn)基因植物的檢測(cè)、蛋白表達(dá)和菌細(xì)胞數(shù)統(tǒng)計(jì)中的應(yīng)用
    1.6 研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 生物材料
        2.1.2 試劑材料
        2.1.3 儀器
    2.2 方法和步驟
        2.2.1 水稻的種植
        2.2.2 水稻全蛋白質(zhì)的提取
        2.2.3 蛋白質(zhì)樣品的WB檢測(cè)
        2.2.4 水稻OsPR1a-RNAi和超表達(dá)載體的構(gòu)建、遺傳轉(zhuǎn)化及PCR鑒定
        2.2.5 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX轉(zhuǎn)基因水稻的陽(yáng)性鑒定
        2.2.6 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX水稻農(nóng)藝性狀的統(tǒng)計(jì)
        2.2.7 水稻非生物脅迫的處理
        2.2.8 水稻白葉枯病菌Xoo的培養(yǎng)及接菌
        2.2.9 Xoo標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        2.2.10 水稻OsPR1a基因的轉(zhuǎn)錄數(shù)據(jù)
3. 結(jié)果
    3.1 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX轉(zhuǎn)化載體的構(gòu)建
        3.1.1 OsPR1a-RNAi轉(zhuǎn)化載體的構(gòu)建
        3.1.2 OsPR1a-OX轉(zhuǎn)化載體的構(gòu)建
    3.2 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX陽(yáng)性純合植株的鑒定
        3.2.1 OsPR1a-RNAi的陽(yáng)性純合植株的鑒定
        3.2.2 OsPR1a-OX的陽(yáng)性純合植株的鑒定
    3.3 OsPR1a-RNAi和OsPR1a-OX轉(zhuǎn)基因水稻的農(nóng)藝性狀
    3.4 OsPR1A蛋白質(zhì)對(duì)非生物脅迫的響應(yīng)
    3.5 OsPR1A蛋白質(zhì)在不同光照條件下的表達(dá)情況
        3.5.1 活體水稻幼苗OsPR1A蛋白質(zhì)在不同光照條件下的表達(dá)情況
        3.5.2 活體水稻幼苗OsPR1A蛋白質(zhì)在遮光條件下的表達(dá)情況
        3.5.3 水稻離體葉片中OsPR1A在不同光照環(huán)境下的表達(dá)情況
    3.6 Xoo細(xì)胞數(shù)和WB信號(hào)強(qiáng)度的對(duì)應(yīng)關(guān)系
    3.7 水稻接種Xoo后葉片內(nèi)Xoo的菌數(shù)及OsPR1A的表達(dá)情況
        3.7.1 分蘗期轉(zhuǎn)基因水稻接種Xoo后葉片病斑長(zhǎng)度分析
        3.7.2 OsPR1a-RNAi苗期水稻接種Xoo后病斑長(zhǎng)度及菌量分析
        3.7.3 OsPR1a-OX苗期水稻接種Xoo后病斑長(zhǎng)度及菌量分析
        3.7.4 水稻不同抗感組合中OsPR1A蛋白質(zhì)表達(dá)的時(shí)間特異性
        3.7.5 接種Xoo OsPR1A在葉片中表達(dá)部位的特異性
        3.7.6 不同水稻材料在病斑處OsPR1A蛋白質(zhì)表達(dá)的時(shí)間特異性
        3.7.7 轉(zhuǎn)基因水稻苗期在不同溫度下對(duì)Xoo的抗性反應(yīng)
    3.8 水稻OsPR1a基因的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
作者簡(jiǎn)歷
致謝



本文編號(hào):3102810

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