提高家蠶的產(chǎn)絲量是蠶絲業(yè)幾千年來(lái)一直追求的目標(biāo)。家蠶的絲腺是合成和分泌蠶絲蛋白的器官,是整個(gè)蠶絲業(yè)的生物學(xué)基礎(chǔ)。因此,探明家蠶絲腺形成和發(fā)育的分子調(diào)控機(jī)制具有重要的理論意義和實(shí)踐意義。Slit是一類在進(jìn)化上高度保守的分泌型糖蛋白,它與受體Roundabout（Robo）在神經(jīng)軸突導(dǎo)向、神經(jīng)元的遷移、血管生成、癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移、白細(xì)胞趨化等多種生理病理過(guò)程中具有調(diào)節(jié)作用。家蠶絲腺被認(rèn)為是果蠅唾液腺的進(jìn)化同源器官�，F(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn),Slit及其受體Robo在果蠅唾液腺發(fā)育中發(fā)揮著重要作用,但是在家蠶絲腺中的功能研究還未有相關(guān)報(bào)道。Tbx20是一種進(jìn)化上高度保守的轉(zhuǎn)錄因子,是T-box轉(zhuǎn)錄因子家族成員之一,在調(diào)控心臟發(fā)生、控制細(xì)胞遷移、促進(jìn)細(xì)胞增殖等過(guò)程中扮演著重要角色。在果蠅胚胎發(fā)育過(guò)程中,Tbx20的同源基因midline能夠調(diào)控唾液腺的導(dǎo)向遷移,也可以同時(shí)調(diào)控神經(jīng)系統(tǒng)中slit和robo基因的表達(dá),但對(duì)于Tbx20在家蠶中的功能目前還不清楚。本研究基于前期在家蠶中已鑒定并克隆的Bmslit和Bmrobo（Bmrobo1a、Bmrobo1b、Bmrobo2/3）以及Bmtbx20基因,通過(guò)qPCR... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

家蠶幼蟲絲腺組織示意圖

?確種Γ??魷赴?是?蚣負(fù)醣幌赴?瞬悸?Ｕ獠喚齟俳?慫肯儐赴?諍酥手?淶?物質(zhì)交流，也為絲蛋白的合成、分泌和運(yùn)輸提供了有利的條件。家蠶絲腺的這種特殊的細(xì)胞分裂方式與果蠅唾液腺細(xì)胞相同，都是功能高度特異化的結(jié)果。另外，家蠶絲腺與果蠅唾液腺都起源于下唇節(jié)并且在功能上存在很多相似性，因此被認(rèn)為是果蠅唾液腺的進(jìn)化同源器官。在發(fā)育至17-18期的家蠶胚胎中，下唇節(jié)出現(xiàn)絲腺基板，然后內(nèi)陷并向背部和后部遷移，到胚胎26-27期絲腺完全形成；同樣，果蠅唾液腺的形成也包括形態(tài)發(fā)生、內(nèi)嵌、管腔延伸以及遷移4個(gè)階段（圖1-2）。研究表明，大量基因的表達(dá)在家蠶絲腺和果蠅唾液腺之間是保守的，因此對(duì)于兩者的研究可以相互借鑒和參考。圖1-2果蠅唾液腺和家蠶絲腺形態(tài)發(fā)生示意圖（Dhawanetal.,2003a;Pirragliaetal.,2010）A：家蠶絲腺胚胎期的形成模式圖，Md：下顎節(jié)，Mx：上顎節(jié)，Lb：下唇節(jié)，T：胸節(jié)，A：腹節(jié)；B：從腹面觀察的果蠅胚胎不同時(shí)期唾液腺。Fig.1-2SchematicdiagramofthemorphogenesisofsilkglandofsilkwormandDrosophilasalivaryglandA:Thepatternoftheformationofsilkglandintheembryonicstageofsilkworm,Md:mandibularnode,Mx:maxillarynode,Lb:lowerlipnode,T:thoracicnode,A:abdominalnode;B:salivaryglandindifferentstagesofDrosophilaembryoobservedfromtheabdomen.1.1.3家蠶絲腺發(fā)育的調(diào)控機(jī)理家蠶絲腺的生長(zhǎng)和發(fā)育受胰島素、營(yíng)養(yǎng)信號(hào)通路和激素的調(diào)控（崔為正等,1991;Maetal.,2011）。胰島素和營(yíng)養(yǎng)信號(hào)通路能夠調(diào)控家蠶幼蟲末期絲腺的迅速生長(zhǎng)，使絲蛋白在短時(shí)間內(nèi)大量合成。添食（或注射）保幼激素或蛻皮激素對(duì)5齡家蠶絲腺的生長(zhǎng)速率以及蛋白質(zhì)含量都有著顯著的影響。目前，許多在絲腺中表達(dá)的基因也已被鑒定出來(lái)并?

家蠶幼蟲前部絲腺中的表達(dá)變化為了研究Bmslit和Bmrobo1a、Bmrobo1b、Bmrobo2/3在家蠶前部絲腺發(fā)育中的作用，分別取3齡起蠶、3齡盛食期、3齡眠蠶、5齡起蠶、5齡3天及5齡末期的前部絲腺，采用qPCR測(cè)定了Bmslit、Bmrobo1a、Bmrobo1b以及Bmrobo2/3的表達(dá)變化。結(jié)果顯示，Bmslit、Bmrobo1a、Bmrobo1b和Bmrobo2/3這4個(gè)基因在以上6個(gè)發(fā)育時(shí)期的前部絲腺中均有表達(dá)。其中，Bmslit在家蠶3齡起蠶、3齡眠蠶和5齡末期的表達(dá)量較高，其他發(fā)育時(shí)期的表達(dá)量較低（圖3-1A）。Bmrobo1a在3齡眠期和5齡末期高表達(dá)，其次是3齡盛食期表達(dá)量較高（圖3-1B）。Bmrobo1b和Bmrobo2/3在前部絲腺中的表達(dá)模式極為相似，除在家蠶3齡眠蠶特異性高表達(dá)外，其他發(fā)育時(shí)期表達(dá)量較低，以家蠶5齡3天為參照，Bmrobo1b和Bmrobo2/3在家蠶3齡眠蠶的相對(duì)表達(dá)量為27.82和27.29倍（圖3-1C、D）。該試驗(yàn)結(jié)果表明，4個(gè)基因在3齡眠期均呈現(xiàn)高表達(dá)。圖3-1Bmslit和Bmrobo基因在家蠶幼蟲前部絲腺中的表達(dá)變化A：Bmslit在家蠶幼蟲前部絲腺中的表達(dá)；B：Bmrobo1a在家蠶幼蟲前部絲腺中的表達(dá)；C：Bmrobo1b在家蠶幼蟲前部絲腺中的表達(dá)；D：Bmrobo2/3在家蠶幼蟲前部絲腺中的表達(dá)；1：3齡起蠶；2：3齡盛食期；3：3齡眠蠶；4：5齡起蠶；5：5齡3天；6：5齡末期；小寫字母不同表示差異顯著（P<0.05）；大寫字母不同表示差異極顯著（P<0.01）；圖3-2、圖3-3、圖3-18同。Fig.3-1ExpressionchangesofBmslitandBmrobogenesintheanteriorsilkglandofthesilkwormlarvaA:TheexpressionofBmslitintheanteriorsilkglandofthesilkwormlarva;B:TheexpressionofBmrobo1aintheanteriorsilkglandofthesilkwormlarva;C:TheexpressionofBmrobo1bintheanteriorsilkglandofthesilkwormlarva;D:The

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]昆蟲保幼激素和蛻皮激素對(duì)家蠶絲腺生長(zhǎng)的影響[J]. 崔為正,吳載德,徐俊良.  江蘇蠶業(yè). 1991(02)

碩士論文
[1]家蠶神經(jīng)軸突導(dǎo)向因子Robo的功能研究[D]. 李曉童.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]黑腹果蠅midline基因在胚胎時(shí)期唾液腺遷移過(guò)程中的功能分析[D]. 程乾.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]家蠶T-box基因Bmtbx20與Bmtbx1的功能研究[D]. 梁曉.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015



本文編號(hào)：2961363