稻曲菌素（Ustiloxins）是稻曲病菌產(chǎn)生的一種環(huán)肽類次生代謝產(chǎn)物,具有抑制細胞有絲分裂的毒理活性,對動植物產(chǎn)生嚴重的毒害作用。迄今為止,從稻曲病菌中分離并鑒定了7種稻曲菌素,分別為稻曲菌素A、B、C、D、E、F、G,其中稻曲菌素A（Ust A）為主要成分。鑒于Ust A污染的普遍性和危害性,針對它的污染風(fēng)險評估、毒理研究以及控制方法開發(fā)等受到業(yè)界的廣泛關(guān)注。至今尚無可行的Ust A的全合成工藝,Ust A的來源嚴重受限,阻礙了對Ust A的深入研究。本研究以染病稻穗上的稻曲球為原料,開發(fā)了基于大孔吸附樹脂聯(lián)用高速逆流色譜大量制備Ust A的工藝;并對提取的Ust A的生物活性進行了測定,主要結(jié)果如下:（1）優(yōu)化了稻曲球中Ust A的提取條件,最佳提取條件為:提取液為5%的甲酸水溶液、25℃、料液比為1:20。（2）優(yōu)化了Ust A的分離方法。本研究首先比較了5種大孔吸附樹脂對Ust A的分離效果,發(fā)現(xiàn)大孔樹脂XAD-4具有較好的吸附效果。在樣品液pH 7.0,吸附7 h,40%甲醇溶液（含0.1%三氟乙酸）洗脫條件下,可使大孔吸附樹脂XAD-4的分離效果最佳,分離量達到296.2... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

稻曲菌素A、B、C、D、G、F的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig.1-1StructuresofUstA,B,C,D,GandF

稻曲菌素素A制備工藝優(yōu)化及其生物活性分析203結(jié)果與分析3.1UstA檢測方法的建立為能精確定量樣品中的UstA，本研究首先建立了UstA的HPLC檢測方法，經(jīng)過對液相色譜條件進行優(yōu)化，最終選擇20%甲醇水溶液等梯度洗脫，流速0.5mL/min，254nm檢測，該色譜條件下UstA保留時間為15.03min。將UstA稀釋為0μg/mL、11.125μg/mL、22.25μg/mL、44.5μg/mL、89μg/mL、178μg/mL共5個濃度梯度，利用HPLC檢測，以保留時間在15.03min的峰面積作為縱坐標，對應(yīng)標樣的濃度作為橫坐標，繪制標準曲線。如圖3-1所示，標準曲線R2為0.9991，線性擬合效果較好，說明該標準曲線準確度較高，該方法可以用于樣品中UstA的檢測。圖3-1UstAHPLC標準曲線線Fig.3-1HPLCStandardcurveofUstA3.2提取方法優(yōu)化結(jié)果3.2.1提取試劑篩選結(jié)果本研究選取了6種實驗室常用提取試劑（圖3-2），分別代表酸性、堿性、中性溶液，以及強極性、弱極性有機試劑，并分別檢測其對稻曲球粉末中UstA的提取能力。提取實驗結(jié)果表明，UstA水溶性較好，在水中加入1%不同性質(zhì)的有機試劑，都可以將UstA提取出來。如圖3-2所示，1%氫氧化鈉的水溶液提取效果最差，進一步驗證了UstA是一種酸性物質(zhì)。同時由圖可見，加入甲酸的水溶液對UstA的提取效率最高，達到了584.76μg/mL（圖3-2），因此綜合成本與提取效率，選用甲酸水作為UstA的提取試劑。

不同試劑提取效果對比圖

【參考文獻】：
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博士論文
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本文編號：2945485