利用過(guò)量表達(dá)ZmANT基因創(chuàng)制大粒玉米新材料
發(fā)布時(shí)間:2020-12-18 21:49
玉米(Zea mays L.)是我國(guó)重要的糧食、飼料和能源作物,其產(chǎn)量的高低直接關(guān)系到我國(guó)的糧食安全及農(nóng)業(yè)發(fā)展。由于我國(guó)玉米產(chǎn)量受到種植密度和面積的條件限制,從而籽粒大小和粒重成為影響玉米產(chǎn)量的主要因素。本研究在調(diào)控玉米籽粒性狀關(guān)鍵基因的挖掘以及功能分析方面開展了一系列的工作,最終通過(guò)過(guò)量表達(dá)調(diào)控籽粒發(fā)育的關(guān)鍵基因ZmANT獲得了大粒玉米的新材料。具體研究結(jié)果如下:玉米ZmANT基因的同源克隆。AINTEGUMENTA(ANT)基因是擬南芥(Arabidopsis)中一個(gè)調(diào)節(jié)種子以及器官大小的關(guān)鍵基因。經(jīng)過(guò)同源序列比對(duì),從玉米中克隆到一個(gè)擬南芥ANT的同源基因ZmANT。過(guò)量表達(dá)ZmANT能夠恢復(fù)擬南芥ant突變體種子變小的表型。本研究構(gòu)建了用于轉(zhuǎn)化擬南芥的ZmANT過(guò)表達(dá)載體,并將該目的基因分別轉(zhuǎn)入到擬南芥野生型(Col)和ant突變體的株系中。結(jié)果表明,該基因的過(guò)表達(dá)能夠顯著提高擬南芥野生型種子的大小及千粒重,并且還可以恢復(fù)擬南芥ANT基因突變所導(dǎo)致的千粒重減輕和種子變小的表型。所以,ZmANT基因在調(diào)控種子大小方面具有和擬南芥ANT同樣的功能。ZmANT在玉米中的表達(dá)模式分析。為...
【文章來(lái)源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:76 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
ZmANT基因的序列比對(duì)及進(jìn)化樹分析
為了探究ZmANT基因在調(diào)控種子大小方面的功能,我們通過(guò)酶切含有目的基因的克隆質(zhì)粒,并以p Cambia1300作為植物表達(dá)載體與目的基因相連接,成功構(gòu)建了35S::ZmANT過(guò)表達(dá)載體(圖3-2)。然后利用農(nóng)桿菌侵染擬南芥花序的方法,將含有目的基因ZmANT的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入到擬南芥的野生型中,并通過(guò)抗性篩選以及基因組DNA的PCR鑒定,確定ZmANT基因已成功整合到擬南芥基因組中。我們從ABRC購(gòu)買了ant突變體(salk_022770),該突變體含有插在3’-UTR上的T-DNA序列,相比野生型來(lái)說(shuō),ant突變體中ANT基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平下降,是弱突變體(圖3-3)。并且該突變體育性正常,其種子具有顯著變小的表型(圖3-4 B)。所以,我們也將35S::ZmANT過(guò)表達(dá)載體轉(zhuǎn)入ant突變體中,觀察其種子的表型恢復(fù)情況。圖3-3擬南芥野生型和ant突變體中ANT基因的表達(dá)水平
擬南芥野生型和ant突變體中ANT基因的表達(dá)水平
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]玉米產(chǎn)量性狀與產(chǎn)量的相關(guān)性及通徑分析[J]. 王楠,王樹星,張樂(lè),任紅麗,黨潤(rùn)海,安綠宇. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(01)
[2]制約玉米單產(chǎn)的因素及主要解決措施[J]. 黃大海. 吉林農(nóng)業(yè). 2015(18)
[3]基于水稻粒長(zhǎng)OsPPKL1基因的玉米同源基因的生物信息學(xué)分析[J]. 田玉煥,張亞玲,范子洋,陶勇生. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(12)
[4]玉米籽粒成熟標(biāo)志一乳線的研究[J]. 王忠孝,杜成貴,王慶成. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 1986(04)
[5]玉米主要農(nóng)藝性狀的通徑分析[J]. 徐占宏,樸淙鶴,郭鳳蘭. 作物雜志. 1986(01)
本文編號(hào):2924663
【文章來(lái)源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:76 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
ZmANT基因的序列比對(duì)及進(jìn)化樹分析
為了探究ZmANT基因在調(diào)控種子大小方面的功能,我們通過(guò)酶切含有目的基因的克隆質(zhì)粒,并以p Cambia1300作為植物表達(dá)載體與目的基因相連接,成功構(gòu)建了35S::ZmANT過(guò)表達(dá)載體(圖3-2)。然后利用農(nóng)桿菌侵染擬南芥花序的方法,將含有目的基因ZmANT的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入到擬南芥的野生型中,并通過(guò)抗性篩選以及基因組DNA的PCR鑒定,確定ZmANT基因已成功整合到擬南芥基因組中。我們從ABRC購(gòu)買了ant突變體(salk_022770),該突變體含有插在3’-UTR上的T-DNA序列,相比野生型來(lái)說(shuō),ant突變體中ANT基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平下降,是弱突變體(圖3-3)。并且該突變體育性正常,其種子具有顯著變小的表型(圖3-4 B)。所以,我們也將35S::ZmANT過(guò)表達(dá)載體轉(zhuǎn)入ant突變體中,觀察其種子的表型恢復(fù)情況。圖3-3擬南芥野生型和ant突變體中ANT基因的表達(dá)水平
擬南芥野生型和ant突變體中ANT基因的表達(dá)水平
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]玉米產(chǎn)量性狀與產(chǎn)量的相關(guān)性及通徑分析[J]. 王楠,王樹星,張樂(lè),任紅麗,黨潤(rùn)海,安綠宇. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(01)
[2]制約玉米單產(chǎn)的因素及主要解決措施[J]. 黃大海. 吉林農(nóng)業(yè). 2015(18)
[3]基于水稻粒長(zhǎng)OsPPKL1基因的玉米同源基因的生物信息學(xué)分析[J]. 田玉煥,張亞玲,范子洋,陶勇生. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(12)
[4]玉米籽粒成熟標(biāo)志一乳線的研究[J]. 王忠孝,杜成貴,王慶成. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 1986(04)
[5]玉米主要農(nóng)藝性狀的通徑分析[J]. 徐占宏,樸淙鶴,郭鳳蘭. 作物雜志. 1986(01)
本文編號(hào):2924663
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