發(fā)布時間：2020-07-02 07:54

【摘要】：目前養(yǎng)豬業(yè)不合理飼養(yǎng)方式易導(dǎo)致多種疾病的產(chǎn)生,其中腹瀉性疾病尤為突出。臨床上大量使用抗生素不僅導(dǎo)致了細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生,同時豬肉內(nèi)殘留的抗生素引發(fā)的食品安全問題也一直備受爭議。而益生菌作為抗生素的替代品之一,可以避免這些問題的發(fā)生。其中腸球菌為國家指定飼料添加的益生菌之一,具有良好的耐受胃腸道環(huán)境的能力以及可生產(chǎn)性,所以本試驗篩選益生性腸球菌為今后生態(tài)制劑的研發(fā)奠定基礎(chǔ)。1、本試驗從健康豬的直腸糞便中分離出59株細(xì)菌,通過對產(chǎn)腸毒素大腸桿菌的抑菌篩選,篩選出7株有明顯抑菌活性的腸球菌,經(jīng)過生化生理試驗和16Sr RNA基因序列的擴(kuò)增與測序鑒定結(jié)果顯EFL01、EFL03、EFL05、EFL06、EFL07、EFL08為屎腸球菌,EFL09為糞腸球菌。2、對7株腸球菌進(jìn)行了腸球菌素的篩選,結(jié)果顯示EFL01含有ent.A和ent.P,EFL07含有ent.A,EFL08含有ent.P。3、對7株腸球菌進(jìn)行了毒力基因和抗生素敏感性檢測,毒力基因的檢測結(jié)果顯示EFL01含有efa Afm+;EFL03含有efa Afm+;EFL05含有efa Afm+、agg+;EFL06含有efa Afm+;EFL07含有efa Afm+、agg+;EFL08含有efa Afm+;EFL09含有efa Afs+、ace+、agg+。藥物敏感性試驗結(jié)果顯示EFL01、EFL08對青霉素G、氨芐霉素、氯霉素、萬古霉素、強(qiáng)力霉素、紅霉素敏感;而對慶大霉素、利福平、四環(huán)霉素、環(huán)丙沙星、諾氟沙星表現(xiàn)耐藥。動物急性毒性試驗從體征觀察、細(xì)菌易位和臟器指數(shù)方面來檢測,結(jié)果顯示EFL01為安全菌株,而EFL08有潛在危險。4、本試驗對EFL01進(jìn)行了生物學(xué)特性研究結(jié)果顯示:結(jié)果顯示,EFL01能耐受低p H、高濃度膽鹽、消化蛋白酶,所以能順利通過胃腸道;而且能耐受一定的高溫和高銅。EFL01具有良好的生長特性在4h時屎腸球菌EFL01進(jìn)入對數(shù)增長期,而10h后進(jìn)入穩(wěn)定期。
【學(xué)位授予單位】：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S852.61

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本文編號：2737939