【摘要】：百合是觀賞上重要的鮮切花之一,在世界范圍內(nèi)的花卉市場上占有重要的份額。但是百合花粉量大,百合花藥碩大,敞開的花型使得百合花粉極易受到污染,同時(shí)也不可避免的污染其他花藥。且人工摘除又費(fèi)時(shí)費(fèi)力,因此,培育出雄性不育百合有較大的現(xiàn)實(shí)經(jīng)濟(jì)價(jià)值及潛在育種價(jià)值。本研究以花藥退化型雄性不育百合新品種'無粉白'及其重組自交系中有花粉百合為研究對(duì)象,利用轉(zhuǎn)錄組和表達(dá)譜對(duì)不用品系不同發(fā)育時(shí)期的花藥進(jìn)行研究,整理組裝拼接得到轉(zhuǎn)錄本和差異基因,并與生物數(shù)據(jù)庫進(jìn)行功能分析。同時(shí)利用百合不同部位做外植體,進(jìn)行愈傷組織和不定芽的誘導(dǎo),以及根系的誘導(dǎo),建立離體快速繁殖體系。本試驗(yàn)的主要研究材料為正常有粉雄蕊按大、中、小及無粉品種'無粉白'雄蕊按大、中、小分六個(gè)樣品,主要結(jié)果如下:1.構(gòu)建了百合花粉不同發(fā)育時(shí)期雄蕊混合樣品文庫,進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序。對(duì)原始數(shù)據(jù)處理,整理得到206942序列重疊群(contig)進(jìn)而得到98551條轉(zhuǎn)錄本(transcript)。從頭拼接得到 37699 條 Unigene,對(duì)得到的 Unigene 與 GO、KEGG、eggNOG、SwissProt經(jīng)過聚類分析完成功能注釋。2.對(duì)有花藥百合和花藥退化型百合不同發(fā)育時(shí)期雄蕊進(jìn)行表達(dá)譜分析,共得到69,436,802條reads,通過整體質(zhì)量評(píng)估,顯示各樣品基因的表達(dá)模式符合mRNA不均一性、冗余性的特征。所有時(shí)期所有樣品差異表達(dá)基因數(shù)量為5597,并且樣品間的表達(dá)差異趨勢(shì)不隨表達(dá)量大小變化而明顯變化。隨機(jī)選出某一個(gè)表達(dá)量有差異的基因,進(jìn)行熒光定量驗(yàn)證,比較表達(dá)譜和熒光定量PCR的結(jié)果反映表達(dá)譜數(shù)據(jù)的有效性,進(jìn)而推測出差異基因的功能,為后續(xù)百合分子生物學(xué)研究提供依據(jù)。3.以珠芽和花器官為外植體誘導(dǎo)愈傷組織、以鱗片為外植體誘導(dǎo)分化不定芽和誘導(dǎo)不定芽生根,建立百合再生體系。明確珠芽誘導(dǎo)添加2,4-D 1.mg·L~(-1) + KT O.1mg·L~(-1);花被愈傷誘導(dǎo)添加2,4-D 3.0 mg L~(-1)和KT0.5mg L~(-1);花絲愈傷組織誘導(dǎo)添加2,4-D3.0mg·L~(-1),和0.5mg·L~(-1)。鱗片不定芽誘導(dǎo)添加 6-BA2.Omg·L~(-1) 和 NAA0.2mg·L~(-1),1/2MS 添加 NAAO.1mg·L~(-1),IBAO.1 mg·L~(-1)生根質(zhì)量好,移栽易成活。
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S682.29
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本文編號(hào)：2548473