【摘要】：本論文以實驗室分離得到的萎縮芽孢桿菌SF1為研究對象,為了探究其拮抗蛋白的功能,對其β-1,3-葡聚糖酶基因進(jìn)行了克隆和表達(dá)。本文的主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1、β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆:從萎縮芽孢桿菌SF1中克隆獲得了 β-1,3-葡聚糖酶基因bgl,基因全長1086bp,G+C含量50.4%,編碼358個氨基酸,理論的分子量為47 kDa。2、β-1,3-葡聚糖酶基因在大腸桿菌中的表達(dá):將克隆得到的β-1,3-葡聚糖酶基因片段與表達(dá)載體PGEX-4T-1連接構(gòu)建重組質(zhì)粒pGEX-4T-1-bgl,轉(zhuǎn)化宿主菌BL21(DE3),并成功獲得工程菌株NDM-1。經(jīng)SDS-PAGE電泳檢測,融合蛋白相對分子量約為73 kDa。3、β-1,3-葡聚糖酶酶活力及抑菌效果的測定:異源表達(dá)的β-1,3-葡聚糖酶,抑菌率最高達(dá)到45%,是菌株SF1抑菌率的61.9%。
[Abstract]:In this paper, SF1 isolated from Bacillus atrophy was used as the research object. In order to study the function of its antagonistic protein, the 尾 -1C 3-glucanase gene was cloned and expressed. The main contents and results of this paper are as follows: 1. Cloning of 尾 -1m3-glucanase gene: the total length of bgl, gene of 尾 -1m3-glucanase gene was obtained from SF1 of Bacillus atrophy. Encoding 358 amino acids with a theoretical molecular weight of 47 kDa.2, Expression of 尾 -1m3-glucanase gene in Escherichia coli: recombinant plasmid pGEX-4T-1-bgl, was transformed into host strain BL21 (DE3) by ligating the cloned 尾 -1m3-glucanase gene fragment with the expression vector PGEX-4T-1. The engineering strain NDM-1. was obtained successfully. SDS-PAGE electrophoresis showed that the relative molecular weight of the fusion protein was about 73 kDa.3, 尾 -1G 3 glucanase activity and its bacteriostatic effect. It is 61.9% of the inhibition rate of SF1.
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S476

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本文編號：2333932