【摘要】：異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)具有生長快、個(gè)體大、抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn),在養(yǎng)殖生產(chǎn)中顯示出良好的經(jīng)濟(jì)性狀。隨著養(yǎng)殖集約化的發(fā)展,導(dǎo)致水環(huán)境惡化,同時(shí),養(yǎng)殖戶對(duì)疾病防控的意識(shí)薄弱,導(dǎo)致水產(chǎn)病害頻發(fā)。2015年,上海濱�；氐漠愑y鯽發(fā)生了出血性敗血病,為探究病原,對(duì)疫區(qū)進(jìn)行疾病調(diào)查,通過病原菌的篩查、分離、鑒定、回感試驗(yàn),確定發(fā)病原因;對(duì)病原菌的16S rRNA基因、管家基因(gyrB和rpoB)的測(cè)序,建立致病菌系統(tǒng)進(jìn)化樹,結(jié)合ATB和Biolog細(xì)菌鑒定系統(tǒng)對(duì)致病菌進(jìn)行生理生化鑒定,綜合判定致病菌的種類及其分類地位;腹腔注射法人工感染異育銀鯽,對(duì)發(fā)病魚的肝胰腺、腎臟、脾臟、鰓和腸道進(jìn)行組織病理觀察,明確致病菌的主要侵染器官;測(cè)定致病菌的脲酶、明膠酶、脂酶、淀粉酶和溶血性等與致病相關(guān)指標(biāo),根據(jù)已報(bào)道的7個(gè)毒力基因序列,設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,研究病原菌毒力基因攜帶情況;最后對(duì)致病菌進(jìn)行藥物敏感性實(shí)驗(yàn)和免疫防治,為生產(chǎn)實(shí)踐提供參考。通過走訪調(diào)查顯示:異育銀鯽的出血性敗血癥發(fā)生在2015年6-9月,發(fā)病時(shí)養(yǎng)殖水體的溫度為25-27℃,現(xiàn)場死亡率為20%-30%。初期癥狀為攝食量減少,伏于池底不動(dòng);隨后病情加重,表現(xiàn)為全身性充血、出血,腹部腫脹,腹部鱗片基部嚴(yán)重出血,鰭條充血以至出血,肛門紅腫出血并伴有膿樣液體流出。腹腔中有黃色渾濁腹水,肝胰腺充血,肌肉充血出血,呈現(xiàn)典型的細(xì)菌性敗血癥癥狀。從瀕死異育銀鯽內(nèi)臟分離到一株致病菌GY 15,腹腔注射感染和浸泡感染都能導(dǎo)致異育銀鯽的發(fā)病和死亡,其中,腹腔注射感染的半數(shù)致死量(LD50)為4.26×105 CFU/mL,且人工感染的發(fā)病癥狀與塘口病魚相似。通過生理生化和分子生物學(xué)方法對(duì)GY 15菌株進(jìn)行鑒定。API-32E鑒定結(jié)果為遲緩愛德華氏菌(Edwardsiella tarda),鑒定率值為99.9%,鑒定評(píng)語為極好的鑒定;Biolog的鑒定結(jié)果與E.tarda的位距為6.381,相似性為0.569,獲得了比較好的鑒定結(jié)果,分子生物學(xué)(16S rRNA基因和多位序列分型)的鑒定結(jié)果與E.tarda聚為一支。綜合以上結(jié)果,確定GY 15菌株為E.tarda。GY 15菌株是導(dǎo)致異育銀鯽出血性敗血癥的新病原,并對(duì)異育銀鯽的養(yǎng)殖造成威脅。人工感染的異育銀鯽在肝胰腺、腎臟和脾臟表現(xiàn)的病理變化最為嚴(yán)重。肝胰腺主要表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹、空泡變性和細(xì)胞壞死;腎臟主要表現(xiàn)為腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞壞死、炎性細(xì)胞浸潤;脾臟主要表現(xiàn)為大量鐵血黃素色素沉著、細(xì)胞壞死和炎性細(xì)胞浸潤;鰓組織主要表現(xiàn)為鰓小片的上皮細(xì)胞、柱細(xì)胞腫脹和外出血癥狀;腸道病理損傷最小。GY 15菌株對(duì)脲酶、明膠酶、脂酶、淀粉酶和溶血性均無活性;而7個(gè)毒力基因在GY 15菌株中均能檢測(cè)到,分別為sodB(490 bp)、katB(377 bp)、esrB(454bp)、gadB(308 bp)、fimA(839 bp)、citC(553 bp)和mukF(303 bp)。GY 15是一株強(qiáng)毒株,綜合國內(nèi)分離的E.tarda的毒力基因攜帶情況,認(rèn)為用fimA和(或)gadB基因可以對(duì)致病性E.tarda進(jìn)行快速鑒定。用免疫防治和藥敏試驗(yàn)來探討對(duì)遲緩愛德華氏菌病的防治方法,注射滅活疫苗和滅活佐劑疫苗能提高血清中超氧歧化酶活性(SOD)和溶菌酶活性(LZM),滅活疫苗和滅活佐劑疫苗對(duì)異育銀鯽的免疫保護(hù)率分別為26.18%和30.42%,未達(dá)到很好的免疫保護(hù)效果;藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示,該菌對(duì)恩諾沙星、氟苯尼考和氧氟沙星等26種藥物敏感,對(duì)新霉素、四環(huán)素和復(fù)方新諾明等18種藥物表現(xiàn)為耐藥。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中,建議用恩諾沙星、氟苯尼考和諾氟沙星進(jìn)行抗生素治療。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S943

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉韜;汪開毓;陳俊杰;劉天強(qiáng);李茂;康岳華;段靖;賀揚(yáng);;江蘇鹽城地區(qū)異育銀鯽大紅鰓疾病病原學(xué)研究及病理學(xué)觀察[J];水生生物學(xué)報(bào);2016年05期

2 管峰;陳吉?jiǎng)?毛芝娟;楊季芳;;寧波-舟山港口航道水域致病性細(xì)菌的毒力基因型鑒定[J];應(yīng)用海洋學(xué)學(xué)報(bào);2016年02期

3 耿昕穎;王家禎;董文龍;單曉楓;馬紅霞;高云航;;異育銀鯽嗜水氣單胞菌的分離鑒定與病理組織學(xué)觀察[J];中國獸醫(yī)雜志;2016年04期

4 李欣悅;李鳳娟;杜鵬程;王瑞白;王多春;;rpoD和gyrA基因?qū)鈫伟b定的比較分析[J];疾病監(jiān)測(cè);2016年03期

5 鄧威;徐峗霞;趙良煒;張麗;;大菱鲆造血器官腫大病的病原分離、鑒定及藥物敏感性[J];天津農(nóng)業(yè)科學(xué);2015年06期

6 王帥兵;寧軍;;一例斑點(diǎn)叉尾洶細(xì)菌性敗血癥治療實(shí)例[J];海洋與漁業(yè);2014年12期

7 朱文進(jìn);陳翠珍;蘇詠梅;葛慕湘;張艷英;靳曉敏;房海;;牙鲆致病性遲鈍愛德華菌毒力基因的檢測(cè)及序列分析[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年11期

8 黃小麗;李成偉;耿毅;汪開毓;杜宗君;陳德芳;;南方鲇洶愛德華氏菌感染的病理損傷特征及病原分布研究[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2014年10期

9 馬幸榮;王桂堂;鄒紅;吳山功;李文祥;;野生與人工養(yǎng)殖鯽鰓部寄生指環(huán)蟲的群落結(jié)構(gòu)[J];水生生物學(xué)報(bào);2014年01期

10 徐進(jìn);曾令兵;楊德國;張輝;馬杰;江南;范玉頂;;鯉皰疹病毒2型武漢株的分離與鑒定[J];中國水產(chǎn)科學(xué);2013年06期

，

本文編號(hào)：2326260