本文選題：豬 + 皮質醇��； 參考：《華中農業(yè)大學》2017年碩士論文

【摘要】：應激反應與動物肉質性狀緊密相連。皮質醇是引起動物應激反應的重要激素,通常由下丘腦-垂體-腎上腺皮質(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)軸分泌,目前關于皮質醇是如何影響肉質以及通過何種方式導致肉質發(fā)生變化并不完全清楚。因此,本試驗通過建立應激模型,研究應激后皮質醇對豬肉質以及血液的生化指標的影響,闡述皮質醇影響肉質的內在分子調控機制。本研究不僅發(fā)現了影響肉質劣變的重要基因和調控網絡,而且為選育抗應激和高品質的肉質豬提供了一定的理論依據,主要的研究結果如下:1.皮質醇影響肉質指標和血液指標皮質醇組仔豬飼喂含氫化可的松(天然皮質醇的類似物)的日糧,屠宰后檢測所有受試豬背最長肌和血液相關指標。與對照組相比,皮質醇組仔豬增重率顯著下降大約3.4倍,皮質醇組1 h肉色明顯上升,24 h肉色值略高于對照組,僅增加了7%;24 h滴水損失有大幅度的下降,降低了63%;與肉質性狀相關聯的蛋白如CAST、calpain1、calpain2和ATF4表達水平都有明顯的上升,Desmin、Myo D1和IGF-1的表達水平要顯著下降。血清中皮質醇含量明顯高于對照組,升高了大約4.8倍,而肌酸激酶的含量受到了顯著抑制作用,下降了大約2.6倍。2.皮質醇引起肌肉組織損傷和肌細胞凋亡運用HE和TUNEL方法檢測和驗證了豬肌肉組織受損情況和細胞凋亡情況,分析結果發(fā)現,皮質醇組仔豬背最長肌肌肉組織受損嚴重,肌纖維間隙增大,凋亡細胞數增多,肌束比率和細胞凋亡率極顯著上升,凋亡率升高大約3.7倍。3.皮質醇影響鈣離子通道相關基因和細胞凋亡相關基因的表達定量PCR檢測鈣離子通道和細胞凋亡相關基因的表達水平,結果表明皮質醇可誘導鈣離子通道基因(SERCA1、IP3R1)和細胞凋亡基因(Bcl-2、BAX、Caspase-3)的上調表達,導致骨骼肌細胞凋亡,推測這些基因可能在皮質醇影響肉質的分子機制中扮演重要角色。4.皮質醇誘導差異表達基因的表達轉錄組測序結果表明TLR3和IL-1RAP在皮質醇組中上調表達并且富集得分較高。通過免疫組化和Western blot的試驗證實皮質醇組TLR3和IL-1RAP的蛋白表達水平遠高于對照組。測序結果篩選出223個差異表達基因其中包括80個上調差異表達基因,143個下調差異表達基因。有204個差異基因富集到GO條目,140個差異基因被注釋到KEGG代謝通路。發(fā)現大量差異表達基因如TLR3、IL-1RAP、TGFβ1、CCL2、SPP1、GPX2、CD3ε、CCR5、ATF3和STC1介入炎癥反應、防御反應和損傷應答的過程。這些差異表達基因可能在皮質醇影響肉質下降的機制中發(fā)揮一定的作用。本研究結論是:1.本試驗篩選出大量的差異表達基因,其中有部分差異表達基因如TLR3、IL-1RAP、TGFβ1、CCL2、SPP1、GPX2、CD3ε、CCR5、ATF3和STC1等參與鈣離子通道和細胞凋亡的調控過程,這些基因可能受到皮質醇的調控作用。2.皮質醇可能通過影響TLR3和IL-1RAP的表達活化轉錄因子NF-κB,從而引起骨骼肌細胞的凋亡。并且NF-κB也可以作用于如Caspase-3、Bcl-2和BAX等與鈣離子通道和細胞凋亡相關基因來引起細胞凋亡導致肌肉的理化性質改變,最終導致肉質改變。
[Abstract]:The effects of cortisol on meat quality and blood biochemical indexes were studied by means of HE and TUNEL methods . The results were as follows : 1 . A large number of differentially expressed genes , such as TLR3 , IL - 1RAP , TGF 尾1 , CCL2 , SPP1 , GPX2 , CD3 蔚 , CCR5 , ATF3 and STC1 , were involved in inflammatory reaction , defense response and injury response .
【學位授予單位】：華中農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S828

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1 萬學斌;基于轉錄組測序技術分析皮質醇對豬肉質的影響[D];華中農業(yè)大學;2017年

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本文編號：1984413