本文關(guān)鍵詞：球蘭種質(zhì)資源遺傳多樣性的ISSR分析及組培技術(shù)初步研究

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【摘要】：球蘭(Hoya carnosa R. Br),蘿摩科球蘭屬植物,起源于東南亞及澳洲地區(qū)。已有研究表明,球蘭對不同環(huán)境具有優(yōu)良的適應(yīng)性,同時具有較高的觀賞價值和藥用價值。然而,目前關(guān)于球蘭種質(zhì)資源遺傳背景及組織培養(yǎng)技術(shù)的研究較少,嚴重制約了球蘭新品種選育及大規(guī)模工廠化生產(chǎn)。鑒于此,本試驗采用ISSR分子標記技術(shù)結(jié)合NTSYS等軟件對福建本地及東南亞引進的多份球蘭種質(zhì)資源進行了遺傳多樣性分析,同時對球蘭組織培養(yǎng)技術(shù)進行了研究,以期為球蘭種質(zhì)資源的進一步開發(fā)利用、藥用成分研究及大規(guī)模生產(chǎn)提供科學依據(jù)和技術(shù)支撐。試驗結(jié)果如下：1球蘭種質(zhì)資源遺傳多態(tài)性分析利用ISSR分子標記技術(shù)從42條ISSR隨機引物中篩選出12條擴增條帶清晰、多態(tài)性好的引物對43份球蘭種質(zhì)資源進行ISSR-PCR分析。獲得的球蘭DNA指紋圖譜中,12條引物共擴增69個條帶,擴增片段大小介于200-2500 bp,且均為多態(tài)性條帶,多態(tài)性比率達到100%,可見這些球蘭種質(zhì)資源之間的遺傳多態(tài)性極為豐富。2球蘭種質(zhì)資源遺傳相似系數(shù)分析采用NTSYS2.10e對43份球蘭樣品的遺傳相似系數(shù)進行統(tǒng)計,結(jié)果發(fā)現(xiàn),該球蘭種質(zhì)資源個體之間的遺傳相似系數(shù)介于0.464-0.797,進一步說明不同球蘭種質(zhì)資源之間的遺傳多樣性豐富。其中彩葉球蘭(Hoya carnosa)與刺球蘭(Hoya acicularis)之間的遺傳相似系數(shù)最小,為0.464,即二者之間的遺傳距離最大。而來自同一個種的貝拉內(nèi)錦(Hoya bella)和貝拉外錦(Hoya bella)之間的遺傳相似系數(shù)最大,達到0.797,兩份種質(zhì)資源之間的親緣關(guān)系最近。3基于遺傳距離的球蘭種質(zhì)資源遺傳聚類分析基于遺傳距離采用NTSYS2.10e對43份球蘭種質(zhì)資源進行遺傳聚類分析。根據(jù)獲得的聚類樹狀圖,設(shè)定閾值(GS)為0.527時,球蘭種質(zhì)資源可分為兩個大組,其中來源于福建本地的彩葉球蘭(Hoya carnosa)和形態(tài)學差異較大的刺球蘭(Hoya acicularis)歸為一組(A組),而其他品種歸為一組(B組)。當閾值(GS)取0.545時,A大組中的兩份不同球蘭進一步分開；而當閾值(GS)為0.574時,B大組分為B-a與B-b兩個亞組,其中卷葉類型的卷葉內(nèi)錦(Hoya compacta var in)和卷葉外錦(Hoya compacta var out)獨立為一個亞組,而其他品種聚為另一亞組。遺傳聚類分析結(jié)果與不同球蘭種質(zhì)資源的地理分布或形態(tài)學差異一致,也進一步證明了該聚類結(jié)果具有較高的準確性。4球蘭愈傷組織的誘導(dǎo)與增殖以心狀球蘭葉片為試驗材料,研究不同培養(yǎng)基對球蘭愈傷組織誘導(dǎo)、增殖及分化的影響。研究結(jié)果表明,MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L +GA1.0 mg/L+蔗糖3%的培養(yǎng)基中愈傷組織的誘導(dǎo)效果最好,誘導(dǎo)率為70.8%；而誘導(dǎo)獲得的球蘭愈傷組織在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+GA 1.5 mg/L+蔗糖3%的培養(yǎng)基中增殖效率最高,達到8.80,且球蘭愈傷組織色澤鮮艷,生長狀態(tài)良好；在球蘭愈傷組織分化的研究中,MS+NAA 0.5 mg/L+GA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+白糖3%的培養(yǎng)基培養(yǎng)的球蘭愈傷組織根分化率為0.37,根分化效果最好。
【學位授予單位】：福建農(nóng)林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S68

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本文編號：1183946