本文關(guān)鍵詞：納米金對膠質(zhì)瘤放射增敏作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的金作為高原子序數(shù)的金屬材料其原子具有較高的電子密度,在組織內(nèi)可以增加射線與組織的反應(yīng)截面,增加次級電子的產(chǎn)生;并且金具有較高的光電吸收特性。因此從理論上金可以作為一種放療增敏劑,提高電離輻射對腫瘤組織的殺傷作用,提高腫瘤放射治療的療效。納米金是一種易于制備、穩(wěn)定性好、毒性低的納米材料,作為一種新型放射增敏劑在腫瘤放射治療方面展示出很大的應(yīng)用前景。本課題通過制備兩種類型的納米金,從細(xì)胞克隆形成率、DNA損傷、細(xì)胞凋亡三個(gè)方面在細(xì)胞水平上探討納米金對人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(U87)細(xì)胞株的放射增敏作用;同時(shí),建立人腦膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型,在活體動(dòng)物水平上驗(yàn)證納米金對腫瘤組織的放射增敏治療作用。最終為納米金作為放療增敏劑在臨床應(yīng)用提供可靠的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法通過化學(xué)還原法分別制備兩種尺寸大小的納米金,經(jīng)BSA吸附、高分子脂質(zhì)囊泡包裹后得到BSA-Au NPs和Au-PLVs;利用粒度分析儀、紫外可見近紅外分光光度計(jì)、透射電子顯微鏡對制備的納米金進(jìn)行表征;采用MTT實(shí)驗(yàn)篩選出兩種納米金的安全工作濃度;應(yīng)用透射電子顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡技術(shù)觀察納米金進(jìn)入U(xiǎn)87細(xì)胞的情況;采用克隆形成試驗(yàn)檢測照射后對照組和實(shí)驗(yàn)組在X射線照射后細(xì)胞的克隆存活率;通過免疫熒光標(biāo)記技術(shù)評價(jià)電離輻射后不同時(shí)間點(diǎn)(0.5 h、2 h、4 h)U87細(xì)胞DNA的損傷程度;采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測照射后0 h和48 h細(xì)胞的凋亡率;利用電感耦合等離子體高分辨質(zhì)譜儀分別檢測尾靜脈注射2 h、24 h后納米金在血液和組織中的含量;建立裸鼠膠質(zhì)瘤模型,尾靜脈注射納米金后進(jìn)行放射治療,通過治療期間測量腫瘤組織體積的大小變化情況,以及在治療結(jié)束后剝離腫瘤稱重綜合評價(jià)治療效果;最后依據(jù)病理學(xué)檢查結(jié)合治療期間裸鼠體重變化情況評價(jià)納米金對主要組織器官的毒性影響。結(jié)果1制備出~28 nm的BSA-Au NPs;~90 nm的Au-PLVs的納米金。2體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)MTT試驗(yàn)篩選出BSA-Au NPs的安全工作濃度為36μg/m L,Au-PLVs的安全工作濃度為194μg/m L。(2)透射電子顯微鏡顯示BSA-Au NPs與U87細(xì)胞共同孵育6 h后在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有聚集。激光共聚焦顯微鏡見到Au-PLVs與U87細(xì)胞共同孵育45 min后,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有納米金的分布。(3)克隆形成試驗(yàn)顯示納米金可降低X射線照射后U87細(xì)胞的克隆存活率。(4)免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)納米金可以增加X射線照射后0.5 h和2 h的U87細(xì)胞DNA損傷程度。(5)流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示納米金可以增加X射線照射后48 h的U87細(xì)胞的凋亡率。3體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)電感耦合等離子體高分辨質(zhì)譜儀檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)BSA-Au NPs在裸鼠體內(nèi)半衰期為t1/2=0.328 h,Au-PLVs的半衰期為t1/2=0.245 h;尾靜脈注射2 h、24 h后納米金主要被肝臟和脾臟攝取,腫瘤組織中也有部分納米金的聚集。(2)荷瘤裸鼠的治療結(jié)果發(fā)現(xiàn)納米金聯(lián)合放射治療可以有效地抑制腫瘤組織的生長,病理結(jié)果顯示腫瘤組織內(nèi)出現(xiàn)明顯的細(xì)胞壞死。(3)主要器官的病理學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)納米金對各器官的毒性作用,同時(shí)治療期間裸鼠的體重變化沒有出現(xiàn)差異。結(jié)論本課題研究在體外細(xì)胞水平和在體動(dòng)物水平上都證明了納米金具有放射增敏作用,由于它較強(qiáng)的光電吸收特性和可以增加次級電子的產(chǎn)生,使得納米金可以提高射線對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用,最終達(dá)到治療腫瘤的目的。同時(shí)細(xì)胞水平和動(dòng)物水平上均未發(fā)現(xiàn)毒性作用,說明納米金良好的生物安全性。本課題的研究結(jié)果表明納米金作為一種新型放射增敏劑具有良好的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：納米金 放射增敏 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(U87) 放射治療 毒性
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-12
• 引言12-16
• 一、納米金的理化性質(zhì)12-13
• 二、納米金放射增敏機(jī)制13-14
• 三 EPR效應(yīng)（enhanced permeability and retention effect，EPR）14-16
• 第1部分 納米金合成及其表征16-24
• 1.1 材料與方法16-19
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料16-17
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法17-19
• 1.1.3 表征方法19
• 1.2 結(jié)果19-22
• 1.2.1 BSA-AuNPs的表征19-21
• 1.2.2 Au-PLVs的表征21-22
• 1.3 討論22-24
• 1.3.1 BSA-AuNPs22-23
• 1.3.2 Au-PLVs23-24
• 第2部分 納米金體外放射增敏研究24-50
• 2.1 材料和方法24-31
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料24-26
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法26-31
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-43
• 2.2.1 不同濃度納米金對U87細(xì)胞的生物毒性31-33
• 2.2.2 透射電鏡拍攝BSA-AuNPs在U87細(xì)胞內(nèi)的分布33-34
• 2.2.3 Au-PLVs在U87細(xì)胞內(nèi)的分布情況34
• 2.2.4 克隆形成率34-36
• 2.2.5 DNA雙鏈斷裂特異性蛋白 γH2AX的表達(dá)36-40
• 2.2.6 Annexin V/PI檢測細(xì)胞凋亡率40-43
• 2.3 討論43-50
• 2.3.1 納米金的生物毒性研究44-46
• 2.3.2 納米金在U87細(xì)胞內(nèi)的分布46-47
• 2.3.3 克隆形成實(shí)驗(yàn)47
• 2.3.4 納米金增加射線對DNA的損傷作用47-48
• 2.3.5 納米金對U87細(xì)胞凋亡的影響48-50
• 第3部分 納米金體內(nèi)放射增敏研究50-70
• 3.1 材料和方法50-54
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料50-51
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法51-54
• 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果54-66
• 3.2.1 ICP-AES檢測BSA-AuNPs、Au-PLVs在裸鼠體內(nèi)的代謝情況54-56
• 3.2.2 ICP-AES檢測BSA-AuNPs、Au-PLVs在裸鼠組織臟器的分布情況56-58
• 3.2.3 納米金（BSA-AuNPs、Au-PLVs）聯(lián)合X-ray治療荷瘤裸鼠58-63
• 3.2.4 納米金體內(nèi)毒性影響情況63-66
• 3.3 討論66-70
• 3.3.1 兩種納米金的藥代動(dòng)力學(xué)研究66-67
• 3.3.2 兩種納米金的體內(nèi)分布和毒性67-68
• 3.3.3 兩種納米金的放射增敏體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究68-70
• 結(jié)論70-71
• 參考文獻(xiàn)71-78
• 綜述 納米金在腫瘤診斷與治療中的作用78-86
• 綜述參考文獻(xiàn)82-86
• 中英文對照縮略詞86-88
• 攻讀學(xué)位期間本人出版或公開發(fā)表的論文及獲獎(jiǎng)88-89
• 致謝89-91

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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  本文關(guān)鍵詞：納米金對膠質(zhì)瘤放射增敏作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：428016