目的:評(píng)價(jià)吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol,I3C)對(duì)處于發(fā)育早期斑馬魚(yú)胚胎的毒性效應(yīng)。方法:篩選受精后4h(4hpf)健康斑馬魚(yú)胚胎,加入不同濃度I3C為試驗(yàn)組,以Holt buffer溶液為陰性對(duì)照組,將二甲基亞砜(DMSO)作為溶質(zhì)對(duì)照組,保持DMSO終濃度為0.1%(v/v%),以已知發(fā)育早期毒性藥物雷帕霉素及辛伐他汀為陽(yáng)性藥物對(duì)照。計(jì)數(shù)120hpf胚胎死亡率,同時(shí)用bliss法計(jì)算半數(shù)致死濃度(LC₅₀)。選取1/4 LC₅₀和/或1/2LC₅₀藥物濃度作用至72hpf或96hpf,對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育早期藥物毒性進(jìn)行評(píng)估,觀(guān)察指標(biāo)包括4個(gè)方面。(1)一般毒性:體視顯微鏡下活體觀(guān)察及計(jì)數(shù)斑馬魚(yú)胚胎孵化率,脊柱畸形,卵黃囊異常、出血、眼部水腫及游泳浮囊未充盈情況,Image J軟件測(cè)量孵化幼魚(yú)體長(zhǎng)。(2)心臟毒性:在體視顯微鏡下計(jì)數(shù)活體心率,使用Image J軟件測(cè)量靜脈竇-動(dòng)脈球(SV-BA)間距。(3)神經(jīng)毒性:在體視顯微鏡下觀(guān)察活體胚胎的自發(fā)活動(dòng),并進(jìn)行觸覺(jué)敏感性實(shí)驗(yàn)。(4)細(xì)胞凋亡:吖啶橙染...

【文章頁(yè)數(shù)】：116 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1不同濃度I3C，雷帕霉素，辛伐他汀對(duì)120hpf斑馬魚(yú)胚胎死亡率的影響及LC50a)I3C對(duì)120hpf斑馬魚(yú)胚胎死亡率的影響及LC50

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文24死濃度LC50=0.0050683μmol/l，F(xiàn)eiller法校正LC5095%的可信限：0.0048576-0.0052761，LC5：0.003725，LC95：0.006896，見(jiàn)圖1。圖1不同濃度I3C，雷帕霉素，辛伐他汀對(duì)120hpf....

圖2I3C對(duì)72hpf斑馬魚(yú)胚胎孵化率的影響

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文26圖2I3C對(duì)72hpf斑馬魚(yú)胚胎孵化率的影響。**P<0.01，與對(duì)照組比較。Figure2HatchingrateofI3Cinzebrafishembyrosat72hpf.Comparedwiththecontrolgroup**P<0.0....

圖5心包形態(tài)學(xué)改變，雷帕霉素及辛伐他汀誘導(dǎo)心包水腫

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文30圖4I3C對(duì)96hpf斑馬魚(yú)幼魚(yú)的心臟毒性a)I3C對(duì)心率的影響b)I3C對(duì)SV-BA間距的影響。與對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01Figure4CardiotoxicityofI3Cinzebrafishlarvaeat96hpf.a....

圖4I3C對(duì)96hpf斑馬魚(yú)幼魚(yú)的心臟毒性a)I3C對(duì)心率的影響b)I3C對(duì)SV-BA間距的影響

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文30圖4I3C對(duì)96hpf斑馬魚(yú)幼魚(yú)的心臟毒性a)I3C對(duì)心率的影響b)I3C對(duì)SV-BA間距的影響。與對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01Figure4CardiotoxicityofI3Cinzebrafishlarvaeat96hpf.a....

本文編號(hào)：3947235