研究目的肺癌是目前世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,發(fā)病率和死亡率也高居世界首位。根據(jù)組織病理學(xué)特點(diǎn)肺癌可分為兩大類(lèi):小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）和非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）,其中85%肺癌的病理類(lèi)型為NSCLC。目前NSCLC最有效的治療方法是手術(shù)治療,但由于早期難以發(fā)現(xiàn)、易發(fā)生轉(zhuǎn)移和耐藥等原因,難以實(shí)現(xiàn)有效根治,NSCLC患者的5年生存率不足20%�；熓侵委烴SCLC的另一重要手段,但最終都不可避免的發(fā)生轉(zhuǎn)移或者耐藥。腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移幾乎是所有癌癥治療失敗的主要原因,腫瘤細(xì)胞耐藥也是徹底清除腫瘤的一大障礙。因此,深入了解NSCLC細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移及耐藥的具體分子機(jī)制,進(jìn)一步探索有效的治療策略,是提高治療效果和患者生存率的關(guān)鍵。腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移和耐藥的發(fā)生除受自身基因的調(diào)控外,還受到腫瘤微環(huán)境多方面的影響。腫瘤細(xì)胞可通過(guò)分泌多種細(xì)胞因子影響腫瘤微環(huán)境細(xì)胞的增殖和分布,同時(shí)后者也可做出應(yīng)答,如為腫瘤組織提供骨架支撐,分泌多種因子促進(jìn)腫瘤組織血管生成,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和耐藥等。存在于腫瘤組織中的... 

【文章頁(yè)數(shù)】：107 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、實(shí)驗(yàn)材料和儀器
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 細(xì)胞系和臨床標(biāo)本
        1.1.2 主要試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材
二、CAFS和 NFS的分離及鑒定
    2.1 方法
        2.1.1 成纖維細(xì)胞分離
        2.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.1.3 PCR
        2.1.4 Western blot
        2.1.5 免疫熒光
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 CAFs和 NFs的形態(tài)觀察
        2.2.2 CAFs和 NFs相關(guān)分子標(biāo)志物檢測(cè)
    2.3 討論
三、CAFS通過(guò)IL-6/STAT3 通路促進(jìn)NSCLC細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移
    3.1 方法
        3.1.1 上清收集
        3.1.2 CCK8 測(cè)細(xì)胞增殖
        3.1.3劃痕實(shí)驗(yàn)
        3.1.4小室實(shí)驗(yàn)
        3.1.5 ELISA
        3.1.6動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        3.1.7 蘇木精-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining,HE)
        3.1.8 免疫組化
        3.1.9 組織RNA、蛋白提取
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 CAF-CM可促進(jìn)NSCLC細(xì)胞增殖并使肺癌細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變
        3.2.2 CAF-CM可提高肺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力
        3.2.3 CAF-CM可誘導(dǎo)NSCLC細(xì)胞發(fā)生EMT并上調(diào)侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的表達(dá)
        3.2.4 CAFs可通過(guò)分泌IL-6 促進(jìn)NSCLC細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移
        3.2.5 IL-6 可通過(guò)激活JAK2/STAT3 通路促進(jìn)NSCLC細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移
        3.2.6 抑制JAK2/STAT3 通路可顯著削弱CAFs對(duì) NSCLC細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的促進(jìn)作用
        3.2.7 CAFs在體內(nèi)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)
        3.2.8 CAFs在體內(nèi)也可激活肺癌細(xì)胞內(nèi)JAK2/STAT3 通路并誘導(dǎo)NSCLC細(xì)胞發(fā)生EMT
    3.3 討論
四、CAFS通過(guò)ANXA3/JNK通路增強(qiáng)肺癌細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥
    4.1 方法
        4.1.1 CCK8 檢測(cè)順鉑對(duì)肺癌細(xì)胞的毒性作用
        4.1.2 ANXA3 過(guò)表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建
        4.1.3 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
        4.1.4 流式測(cè)細(xì)胞凋亡
        4.1.5動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 CAFs可促進(jìn)NSCLC細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥
        4.2.2 CAFs中高表達(dá)ANXA3 且可上調(diào)肺癌細(xì)胞內(nèi)ANXA3 的表達(dá)
        4.2.3 CAFs通過(guò)分泌ANXA3 蛋白上調(diào)肺癌細(xì)胞內(nèi)ANXA3 的表達(dá)
        4.2.4 過(guò)表達(dá)ANXA3 可增強(qiáng)肺癌細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性
        4.2.5 ANXA3 中和抗體可削弱 CAF-CM 對(duì)肺癌細(xì)胞順鉑耐藥的促進(jìn)作用
        4.2.6 ANXA3 可激活肺癌細(xì)胞內(nèi)JNK/Survivin通路從而抑制凋亡
        4.2.7 抑制JNK通路可增強(qiáng)肺癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性
        4.2.8 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探究CAFs在體內(nèi)對(duì)肺癌細(xì)胞順鉑敏感性的影響
    4.3 討論
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞在腫瘤中作用的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]IL-37b suppresses epithelial mesenchymal transition in hepatocellular carcinoma by inhibiting IL-6/STAT3 signaling[J]. Xing-Yu Pu,Dao-Feng Zheng,Ai Shen,Hai-Tao Gu,Xu-Fu Wei,Tong Mou,Jian-Bo Zhang,Rui Liu.  Hepatobiliary ＆ Pancreatic Diseases International. 2018(05)
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[3]The VEGF signaling pathway in cancer: the road ahead[J]. Steven A. Stacker,Marc G. Achen.  Chinese Journal of Cancer. 2013(06)



本文編號(hào)：3708222