【摘要】：目的:通過電刺激定量跳躍裝置使兔完成相應的跳躍訓練時長,探索髕骨髕腱結合部和髕腱纖維化進程機制,并探究冷水浴干預對髕骨髕腱結合部纖維化的影響。方法:將18周齡雌性新西蘭兔隨機分為對照組、跳躍組、運動后冷水浴組和單純冷水浴組,各組又分為2、4、6、8周4個時長。跳躍組完成每天150次,每周5天的跳躍訓練;運動后冷水浴組每天跳躍訓練完成后進行3次,每次5min的間歇冷水浴;單純冷水浴組完成相同的冷水浴任務。在對應時長取下髕骨髕腱結合部(PPTJ)和髕腱(PT)進行檢測。采用HE、番紅、馬松、免疫組織化學和免疫組織熒光染色及Real Time PCR技術,描述評價跳躍和跳躍后冷水浴干預對PPTJ和PT組織學變化及纖維化和抗纖維化相關因子表達的影響。結果:(1)與對照組同時間點相比,跳躍組PPTJ所有時間點的FZT、GA、CA、TGF-β1、Smad3、CTGF、COLI、COLIII顯著升高(p0.01);跳躍4周組PT的TGF-β1、CTGF、COLI、COLIII mRNA及蛋白顯著增高(p0.05)。跳躍組內各時間點相比,PPTJ的6周組FZT、GA、CA、TGF-β1、Smad3、CTGF、COLI最高(P0.05);PT的4周組TGF-β1、COLI、COLIII mRNA及蛋白最高(p0.01)。(2)與跳躍組同時間點相比,運動后冷水浴組PPTJ的FZT、GA、CA、TGF-β1、Smad3、CTGF、TIMP-1、COLI、COLIII 4周、6周組顯著下降(P0.05);HGF、MMP-1、MMP-9 4周組顯著增加(P0.01)。(3)與對照組和單純冷水浴組相比,運動后冷水浴組PPTJ纖維化因子表達顯著升高(P0.01),抗纖維化因子表達顯著降低(P0.01),單純冷水浴組與對照組無差異(P0.05)。結論:(1)跳躍負荷導致PT纖維化峰值期早于PPTJ出現,PT出現于4周,PPTJ在6周。(2)跳躍負荷致PPTJ和PT纖維化機制為增加TGF-β1和Smad3分泌,上調CTGF表達,促使COLI、COLIII合成增加,膠原纖維面積增大,致使發(fā)生纖維化改變。(3)單純冷水浴對PPTJ組織無影響,運動后冷水浴可以改善PPTJ纖維化,且在4周效果顯著。(4)運動后冷水浴可能通過兩條途徑抑制PPTJ纖維化進程,一是下調TGF-β1和Smad3表達,抑制后續(xù)信號通路;二是促進HGF分泌,促使TIMP-1與MMP-1、MMP-9恢復平衡,降低COLI、COLIII合成,減少膠原纖維面積,抑制纖維化進程。
[Abstract]:AIM: To explore the mechanism of fibrosis of patellar tendon junction and patellar tendon, and to explore the effect of cold water bath on fibrosis of patellar tendon junction. Methods: Female New Zealand rabbits aged 18 weeks were randomly divided into control group, jumping group, cold water bath group and post-exercise cold water bath group. Each group was divided into 2,4,6,and 8 weeks with 4 time lengths.The jumping group completed 150 times a day and 5 days a week jumping training.The cold water bath group was given intermittent cold water bath 3 times a day and 5 minutes each time after exercise.The cold water bath group completed the same cold water bath task.The patellar patellar tendon junction (PPTJ) and patellar tendon junction (PPTJ) were removed in corresponding time. Patellar tendon (PT) was examined. HE, saffron, masson, immunohistochemistry, immunohistochemistry, immunohistofluorescence staining and Real Time PCR were used to describe and evaluate the effect of cold water bath intervention after jumping and jumping on the histological changes of PPTJ and PT, and the expression of fibrosis and anti-fibrosis related factors. FZT, GA, CA, TGF-beta 1, Smad3, CTGF, COLI, COLIII were significantly increased at time points (p0.01); TGF-beta 1, CTGF, COLI II mRNA and protein were significantly increased in the four-week skipping group (p0.05). Compared with each time point in the skipping group, FZT, GA, CA, TGF-beta 1, Smad3, CTGF and COLI were the highest in the six-week group of PPTJ (p0.05); TGF-beta 1, COLI 2, COLI, COLI II and protein were the highest in the four-week skipping group of PT (p0.05). (2) Compared with the jumping group, FZT, GA, CA, TGF-beta 1, Smad3, CTGF, TIMP-1, COLI, COLIII 4 weeks, 6 weeks group decreased significantly (P 0.05); HGF, MMP-1, MMP-9 4 weeks group increased significantly (P 0.01). (3) Compared with the control group and the simple cold water bath group, the expression of PPTJ fibrosis factor in the cold water bath group increased significantly (P 0.01). Conclusion: (1) The peak of PT fibrosis appeared earlier than PPTJ, PT appeared in 4 weeks and PPTJ appeared in 6 weeks. (2) The mechanism of PPTJ and PT fibrosis was to increase the secretion of TGF-beta 1 and Smad3, up-regulate the expression of CTGF and promote the synthesis of COLI and COLIII. (3) Cold water bath alone has no effect on PPTJ tissue, and cold water bath after exercise can improve PPTJ fibrosis, and the effect is significant in 4 weeks. (4) Cold water bath after exercise may inhibit PPTJ fibrosis process through two ways, one is to down-regulate the expression of TGF-beta 1 and Smad3, inhibit the subsequent signaling pathway; Secondly, it can promote the secretion of HGF, restore the balance between TIMP-1 and MMP-1, MMP-9, reduce the synthesis of COLI and COLIII, reduce the area of collagen fibers and inhibit the fibrosis process.
【學位授予單位】：北京體育大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：G804.2

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本文編號：2213906