本文關(guān)鍵詞：miRNAs對斷奶仔豬大腸桿菌抗性的調(diào)控作用及機制分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：斷奶仔豬腹瀉和水腫病是導致斷奶仔豬死亡的重要傳染性疾病,對養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失,E.coli F18菌株是引起這兩種疾病的主要病原菌。由于中國地方豬種抗E. coliF18分子機制尚不清楚,本研究從microRNA及其靶基因的調(diào)控作用入手,首先基于課題組前期在蘇太豬(具有太湖豬和杜洛克血統(tǒng)的培育品種)F18大腸桿菌抗性型和敏感型個體microRNA測序篩選出的重要的]microRNA-miR-192,利用靶基因預測、qPCR、雙熒光素酶報告檢測、細胞水平的細菌感染刺激、TALEN敲除以及microRNA前體SNP檢測等一系列基因功能驗證技術(shù),系統(tǒng)分析miR-192及其靶基因的作用,以期進一步揭示microRNAs在斷奶仔豬F18大腸桿菌抗性的調(diào)控機制。主要試驗結(jié)果如下：(1)一種高效準確的大腸桿菌對腸上皮細胞黏附水平的檢測方法有助于大腸桿菌抗性相關(guān)miRNA及其靶基因的功能研究,本研究應(yīng)用實時熒光定量PCR方法,以大腸桿菌F18ab、F18ac和K88ac菌毛蛋白基因和豬β-ACTIN基因設(shè)計定量PCR引物,以大腸桿菌和豬腸上皮細胞系(IPEC-J2)總DNA為模板進行相對定量PCR檢測,利用2-△△Ct計算不同細胞培養(yǎng)面積孔板中細菌相對細胞黏附數(shù)量。結(jié)果顯示,6孔板、12孔板和24孔板培養(yǎng)面積的豬腸上皮細胞分別對F18ab、F18ac口K88ac大腸桿菌的相對黏附數(shù)量均差異不顯著,大腸桿菌相對黏附數(shù)量不受細胞培養(yǎng)數(shù)量的影響,結(jié)果表明所建立的方法能夠準確檢測大腸桿菌相對黏附數(shù)量,為本研究中大腸桿菌黏附相關(guān)實驗提供了便捷可靠的檢測方法。(2)miR-192靶基因的生物信息分析結(jié)合前期表達譜芯片結(jié)果,獲得5個重要的靶基因,分別是DLG5、ALCAM、FRMD4B、MIPOL1和ZFHX3,結(jié)合基因生物學功能和文獻挖掘的結(jié)果,將ALCAM和DLG5基因確定為關(guān)鍵靶基因進行相關(guān)功能研究。通過構(gòu)建關(guān)鍵靶基因非編碼區(qū)的熒光素酶報告重組載體,與miRNA模擬物(mimics)共轉(zhuǎn)染293細胞,在細胞水平分析驗證miR-192對于關(guān)鍵靶基因的靶向作用,熒光素酶活性檢測結(jié)果顯示,miR-192 mimics對ALCAM和DLG5基因均表現(xiàn)為抑制作用(P0.05)。(3)關(guān)鍵靶基因ALCAM和DLG5的表達譜分析結(jié)果表明,DLG5基因在蘇太豬35日齡斷奶仔豬抗性型和敏感型個體的空腸、十二指腸、肝臟、肺、腎等組織中高度表達,抗性型個體的相對表達量高于敏感型個體,且在心臟和淋巴組織中達到顯著水平(P0.05),在所有組織中抗性型和敏感型個體表達水平的差異倍數(shù)為1,04%6,464；ALCAM基因在蘇太豬的肝臟、肺、腎組織中高度表達,在胃、淋巴、十二指腸和空腸組織中度表達,在其他組織中表達量相對較低,且抗性型和敏感型個體各組織組間差異均不顯著。在蘇太豬從初生到斷奶不同發(fā)育時期(8日齡、18日齡、28目齡和35日齡)的表達差異分析結(jié)果表明,DLG5基因在肌肉、肺臟及免疫(胸腺、淋巴和脾臟)等組織中隨日齡增加表達降低,十二指腸和空腸組織中在28日齡的表達量降至最低,35日齡時呈上升趨勢。ALCAM基因28日齡腎臟組織中表達量顯著高于8日齡(P0.05)；28日齡和35日齡十二指腸組織的表達量顯著低于18日齡,呈下調(diào)趨勢(P0.05)。(4)在豬小腸上皮細胞系IPEC-J2中分析F18ab、F18ac和K88ac侵襲對miR-192及其關(guān)鍵靶基因表達的影響,細菌刺激未對miR-192的轉(zhuǎn)錄水平產(chǎn)生顯著影響,細菌培養(yǎng)上清刺激也沒有引起miR-192轉(zhuǎn)錄水平的顯著變化,且不隨刺激時間表現(xiàn)出變化趨勢；細菌刺激引起了DLG5和ALCAM基因轉(zhuǎn)錄水平顯著下調(diào)(P0.05),細菌培養(yǎng)上清刺激也能引起DLG5和ALCAM基因轉(zhuǎn)錄水平下調(diào),且隨著刺激時間的延長,DLG5和ALCAM基因的轉(zhuǎn)錄水平表達呈顯著下調(diào)趨勢(P0.05)。(5)利用TALEN載體介導敲除IPEC-J2細胞miR-192成熟體,獲得miR-192成熟體序列缺失的細胞株,對細胞株中重要靶基因表達水平的檢測結(jié)果表明,miR-192敲除細胞和對照組的DLG5、ALCAM, FRMD4B的表達水平差異不顯著,而MIPOL1和ZFHX3在敲除細胞中的表達水平表現(xiàn)為顯著下調(diào)(P0.05),大腸桿菌黏附水平檢測結(jié)果顯示,miR-192敲除細胞對大腸桿菌F18ab、F18ac和K88ac的黏附能力均表現(xiàn)為顯著上升(P0.05)。鑒于蘇太豬同時具有外來品種和中國地方豬品種的遺傳基礎(chǔ),關(guān)于蘇太豬microRNAs的研究并不能完全代表和揭示中國地方豬品種斷奶仔豬F18大腸桿菌抗性的調(diào)控機制。因此,本研究又以中國地方豬品種梅山豬為研究對象,利用E. coli F18菌株對梅山斷奶仔豬進行大腸桿菌感染試驗,并通過細菌數(shù)量檢測、小腸上皮細胞體外黏附及病理檢測等一系列試驗對大腸桿菌感染試驗的表型結(jié)果進行系統(tǒng)的驗證,獲得了確證的E.coli F18抗性型和敏感型個體,然后利用Selex高通量測序,篩選梅山豬斷奶仔豬抗性型和敏感型個體間差異microRNAs,通過靶基因預測、網(wǎng)絡(luò)互作圖構(gòu)建等生物信息學手段,結(jié)合課題組前期轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果,篩選出重要的靶基因及其調(diào)控通路,同時利用RNAi技術(shù)和細菌感染在細胞水平上進一步驗證重要靶基因及其通路基因?qū)Υ竽c桿菌感染的調(diào)控作用,探討中國地方斷奶仔豬F18大腸桿菌抗性相關(guān)的microRNA分子及其關(guān)鍵靶基因的功能及其調(diào)控機制。主要試驗結(jié)果如下：(1)對蘇太豬中發(fā)揮重要調(diào)控作用的miR-192在梅山豬中進行初步的功能分析驗證,組織表達譜結(jié)果顯示,miR-192在十二指腸和空腸組織中均具有較高水平的表達,肝和腎中度表達,在心、脾、肺、胃、肌肉、胸腺和淋巴中表達量較低。結(jié)合前期梅山豬斷奶仔豬大腸桿菌試驗的結(jié)果,大腸桿菌處理沒有造成十二指腸和空腸組織中miR-192表達水平的顯著性變化,miR-192可能并沒有在梅山豬斷奶仔豬大腸桿菌感染過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。(2)利用前期通過大腸桿菌感染試驗和一系列驗證獲得的確證的梅山豬斷奶仔豬大腸桿菌抗性型和敏感型全同胞個體,對其十二指腸組織進行microRNA高通量測序分析,獲得梅山豬抗性型和敏感型全同胞個體差異miRNAs 24個,其中上調(diào)15個,下調(diào)9個；通過qPCR方法檢測驗證miRNAs的差異倍數(shù),發(fā)現(xiàn)其與高通量篩選結(jié)果具有較高的一致性；結(jié)合課題組前期梅山豬斷奶仔豬大腸桿菌抗性型和敏感型全同胞個體的轉(zhuǎn)錄組結(jié)果以及差異miRNAs的實驗驗證結(jié)果,并通過靶基因互作網(wǎng)絡(luò)的分析,將miR-7136-5p及其靶基因MyD88基因確定為關(guān)鍵microRNA和關(guān)鍵靶基因,鑒于MyD88是TLRs/IL-1R信號通路中重要的接頭蛋白,將其所在TLR4信號通路作為本試驗重點研究的關(guān)鍵調(diào)控通路,分析其在大腸桿菌感染中的作用及其機制。(3)F18ac和K88ac菌體刺激后,豬小腸上皮細胞系IPEC-J2的MyD88轉(zhuǎn)錄水平顯著下調(diào),其所在的TLR4通路中TNFa基因轉(zhuǎn)錄水平極顯著上調(diào)(P0.01)。細菌培養(yǎng)液上清刺激后,MyD88基因在8小時后急劇下調(diào),：TNFa基因轉(zhuǎn)錄水平顯著上調(diào)(P0.05)。受大腸桿菌F18ac和K88ac刺激后,PK15細胞的MyD88同樣顯著下調(diào)(P0.05); F18ac使TLR4通路中CD14基因的表達極顯著上調(diào)(P0.01),而K88ac的刺激未顯著改變其表達;IFN-a表達變化不顯著,K88ac刺激使TLR4通路中IL-1β和TLR4基因輕度上調(diào),jTNF-a基因水平極顯著上調(diào)(P0.01)。細菌培養(yǎng)上清液同樣使PK15細胞MyD88基因整體表現(xiàn)下調(diào)；CD14基因整體為下調(diào)；IFN-a表現(xiàn)為下調(diào)；IL-1β和TLR4基因整體趨勢為上調(diào)；F18ac上清處理組TNF-a表現(xiàn)為極顯著水平的上調(diào)(P0.01),而K88ac上清處理組TNF-a未表現(xiàn)出上調(diào)趨勢。(4)利用RNAi技術(shù)獲得干擾豬MyD88基因效率最高的shRNA表達載體,將其包裝成慢病毒載體,用于建立MyD88基因穩(wěn)定沉默的細胞系,最終獲得MyD88基因的干擾效率分別為69.3%、61.0%的IPEC-J2和PK15細胞。MyD88基因的下調(diào)造成PK15細胞TLR4和1L-1β基因表達水平顯著下調(diào)(P0.05),而CD14、IFN-a和TNF-a基因表達水平未發(fā)生顯著變化。RNAi MyD88基因未對細胞培養(yǎng)液上清中細胞因子IL-1β和TNF-a的水平造成顯著影響。(5)MyD88基因穩(wěn)定沉默的PK15細胞系受大腸桿菌F18ac和K88ac刺激后,MyD88基因仍表現(xiàn)為下調(diào)表達,并且干擾組PK15細胞的TLR4和IL-1β基因變化趨勢大于對照組；CD14基因變化趨勢小于對照組,TNF-a基因變化趨勢與對照組相似,IFN-a表現(xiàn)出了顯著下調(diào)的變化(P0.05)。受大腸桿菌培養(yǎng)上清刺激后,干擾組PK15細胞的TLR4、CD14、 MyD88、IL-1β、IFN-a變化趨勢與對照組相似,而干擾組PK15的TNF-a變化趨勢小于對照組。對細胞培養(yǎng)液中細胞因子IL-1β和TNF-a檢測結(jié)果顯示,大腸桿菌F18ac和K88ac菌體刺激均使IL-1β水平極顯著增高(P0.01),且干擾組上調(diào)趨勢大于對照組；K88ac培養(yǎng)上清液刺激使IL-1β顯著增高(P0.05),且干擾組和對照組趨勢相似。F18ac和K88ac菌體和培養(yǎng)上清液刺激均未對干擾組細胞培養(yǎng)液中TNF-a水平產(chǎn)生顯著影響。本研究結(jié)果表明,microRNA在蘇太豬和梅山豬斷奶仔豬大腸桿菌感染過程中均發(fā)揮了重要的調(diào)控作用,而且進一步提示梅山豬(中國地方豬品種)和蘇太豬(含有外來豬品種血統(tǒng)的培育品種)在大腸桿菌病抗性的遺傳基礎(chǔ)和調(diào)控機制方面確實存在差異。miR-192靶向作用DLG5和ALCAM基因在蘇太豬斷奶仔豬應(yīng)對大腸桿菌侵襲、維持腸道穩(wěn)定、免疫調(diào)控等方面發(fā)揮了重要的調(diào)控作用, miR-7136-5p靶向作用MyD88基因進而影響TLR4通路在梅山豬斷奶仔豬應(yīng)對大腸桿菌侵襲和免疫應(yīng)答等方面發(fā)揮了重要的調(diào)控作用。
【關(guān)鍵詞】：豬 miRNAs 靶基因 調(diào)控機制 大腸桿菌
【學位授予單位】：揚州大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S858.28
【目錄】：

• 摘要7-11
• ABSTRACT11-16
• 符號說明16-18
• 主要儀器設(shè)備18-19
• 主要數(shù)據(jù)庫及網(wǎng)址19-20
• 第一章 綜述20-27
• 1 仔豬腹瀉與E.coli F18致病機理20-21
• 2 E.coli F18抗性相關(guān)的分子研究21-22
• 3 microRNA及其調(diào)控作用22-24
• 4 基因修飾技術(shù)24-25
• 5 本研究的目的和意義25-27
• 第二章 miRNA192及其靶基因?qū)μK太斷奶仔豬大腸桿菌抗性的作用分析27-70
• 第一節(jié) 基于定量PCR技術(shù)檢測大腸桿菌黏附水平方法的建立27-34
• 1 材料方法27-29
• 1.1 材料27-28
• 1.2 引物設(shè)計及PCR擴增28
• 1.3 實時熒光定量標準曲線的制定28
• 1.4 大腸桿菌黏附腸上皮細胞及DNA提取28-29
• 1.5 數(shù)據(jù)分析29
• 2 結(jié)果與分析29-32
• 2.1 PCR擴增產(chǎn)物鑒定29-30
• 2.2 標準曲線30
• 2.3 定量檢測細菌相對黏附及數(shù)據(jù)分析30-32
• 3 討論32-34
• 第二節(jié) miRNA192靶基因預測及其關(guān)鍵靶基因的靶向驗證34-45
• 1 材料與方法34-36
• 1.1 試驗材料34
• 1.2 miR-192在不同物種中的保守性分析34
• 1.3 miR-192靶基因預測及功能分析34-35
• 1.4 E.coli F18大腸桿菌抗性相關(guān)的靶基因篩選及功能分析35
• 1.5 靶基因3'-UTR靶點區(qū)域的oligos序列合成35
• 1.6 雙熒光素酶報告載體的構(gòu)建35-36
• 1.7 細胞轉(zhuǎn)染36
• 1.8 雙熒光素酶活性檢測36
• 2 結(jié)果與分析36-42
• 2.1 miR-192保守性36-37
• 2.2 豬miR-192靶基因預測及功能37-40
• 2.3 E.coli F18大腸桿菌感染相關(guān)的靶基因篩選40
• 2.4 ALCAM和DLG5基因3'-UTR雙熒光素酶報告載體40-41
• 2.5 熒光素酶報告基因活性檢測41-42
• 3 討論42-45
• 第三節(jié) 關(guān)鍵靶基因(DLG5、ALCAM)的差異表達分析45-52
• 1 材料與方法45-47
• 1.1 試驗動物45-46
• 1.2 試劑46
• 1.3 熒光定量引物設(shè)計與合成46
• 1.4 總RNA抽提及Real-time PCR反應(yīng)46
• 1.5 數(shù)據(jù)分析46-47
• 2 結(jié)果47-49
• 2.1 熒光定量引物PCR驗證情況47
• 2.2 DLG5和ALCAM基因在蘇太豬大腸桿菌抗性敏感群體間的表達47-48
• 2.3 DLG5和ALCAM基因在蘇太豬不同日齡個體中的表達48-49
• 3 討論49-52
• 第四節(jié) 大腸桿菌侵染對miR-192及其關(guān)鍵靶基因轉(zhuǎn)錄水平的影響52-56
• 1 材料與方法52-53
• 1.1 試驗材料52
• 1.2 大腸桿菌及培養(yǎng)上清液侵染IPEC-J2細胞52-53
• 1.3 miR-192反轉(zhuǎn)錄和定量檢測53
• 1.4 靶基因轉(zhuǎn)錄水平的檢測53
• 2 結(jié)果與分析53-54
• 2.1 大腸桿菌侵染對IPEC-J2細胞中miR-192的影響53-54
• 2.2 關(guān)鍵靶基因表達54
• 3 討論54-56
• 第五節(jié) miRNA192敲除及其功能驗證56-70
• 1 材料和方法56-60
• 1.1 材料56
• 1.2 TALEN識別序列設(shè)計56-57
• 1.3 TALEN左右臂載體組裝連接及鑒定57-58
• 1.4 嘌呤霉素最小致死濃度58
• 1.5 TALEN左右臂質(zhì)粒載體共轉(zhuǎn)染IPEC-J2細胞58
• 1.6 嘌呤霉素篩選及鑒定58
• 1.7 單克隆細胞株挑選及鑒定58
• 1.8 陽性單克隆細胞miR-192的表達鑒定58-59
• 1.9 miR-192宿主基因及靶基因轉(zhuǎn)錄水平檢測59-60
• 1.10 大腸桿菌黏附水平驗證60
• 2 結(jié)果與分析60-68
• 2.1 酶切鑒定結(jié)果60
• 2.2 測序比對結(jié)果60-63
• 2.3 轉(zhuǎn)染IPEC-J2細胞及靶點區(qū)域片段擴增及測序63-64
• 2.4 單克隆細胞株miR-192打靶情況的鑒定及分析64-66
• 2.5 miR-192表達水平的檢測66-67
• 2.6 miR-192宿主基因擴增和轉(zhuǎn)錄水平67
• 2.7 miR-192靶基因在敲除細胞中表達水平67-68
• 2.8 miR-192敲除對IPEC-J2細胞黏附大腸桿菌能力的影響68
• 3 討論68-70
• 第三章 梅山斷奶仔豬大腸桿菌抗性相關(guān)microRNAs篩選及其功能分析70-109
• 第一節(jié) miRNA192在梅山豬中表達分析70-73
• 1 材料與方法70-71
• 1.1 材料70
• 1.2 miR-192探針合成70
• 1.3 總RNA抽提及反轉(zhuǎn)錄70-71
• 1.4 組織表達譜分析71
• 2 結(jié)果與分析71-72
• 2.1 miR-192的組織表達譜檢測71-72
• 2.2 攻毒組與對照組個體十二指腸和空腸中miR-192的表達72
• 3 討論72-73
• 第二節(jié) 梅山豬斷奶仔豬大腸桿菌抗性型和敏感型全同胞個體差異microRNAs的篩選73-87
• 1 材料與方法73-76
• 1.1 實驗動物及樣本采集73
• 1.2 試劑材料73
• 1.3 小RNA文庫建立及高通量測序73-74
• 1.4 測序數(shù)據(jù)的質(zhì)量控制和預處理分析74
• 1.5 序列比對及分類注釋74
• 1.6 比對統(tǒng)計74-75
• 1.7 堿基偏好性統(tǒng)計分析75
• 1.8 Novel miRNAs預測75
• 1.9 miRNA差異表達分析75
• 1.10 差異miRNA功能分析75
• 1.11 靶基因GO功能分析75-76
• 1.12 靶基因KEGG pathway分析76
• 1.13 差異miRNAs的QPCR驗證76
• 2 結(jié)果與分析76-85
• 2.1 總RNA質(zhì)量檢測76-77
• 2.2 染色體分布77-78
• 2.3 small RNA序列分類統(tǒng)計78-79
• 2.4 堿基偏好性統(tǒng)計79-80
• 2.5 小RNA在抗性敏感型個體中分布80
• 2.6 差異miRNA篩選80-82
• 2.7 差異miRNA靶基因功能富集分析82-84
• 2.8 差異miRNAs定量PCR驗證84
• 2.9 關(guān)鍵靶基因分析和確定84-85
• 3 討論85-87
• 第三節(jié) 大腸桿菌侵染對細胞中TLR4通路相關(guān)基因的影響87-92
• 1 材料方法87-88
• 2 結(jié)果與分析88-90
• 3 討論90-92
• 第四節(jié) MyD88基因沉默及其對所在TLR4通路基因表達水平的影響92-102
• 1 材料與方法92-95
• 1.1 材料92
• 1.2 引物設(shè)計及序列合成92-93
• 1.3 干擾載體構(gòu)建93
• 1.4 表達載體構(gòu)建93-94
• 1.5 細胞轉(zhuǎn)染及干擾效率驗證94
• 1.6 慢病毒載體包裝及滴度測定94-95
• 1.7 病毒液感染豬IPEC-J2和PK15細胞95
• 1.8 定量檢測MyD88基因沉默PK15細胞中TLR4通路相關(guān)基因表達95
• 1.9 細胞培養(yǎng)上清炎性因子檢測95
• 2 結(jié)果分析95-100
• 2.1 載體構(gòu)建95-96
• 2.2 干擾效率驗證96-97
• 2.3 慢病毒液滴度測定97
• 2.4 干擾病毒顆粒對IPEC-J2和PK15細胞MyD88的干擾效率97-99
• 2.5 MyD88基因沉默對TLR4通路相關(guān)基因表達的影響99
• 2.6 MyD88基因沉默對細胞培養(yǎng)液中免疫因子水平影響99-100
• 3 討論100-102
• 第五節(jié) 大腸桿菌侵襲對MyD88基因沉默PK15細胞的效應(yīng)分析102-109
• 1 材料與方法102
• 2 結(jié)果與分析102-107
• 3 討論107-109
• 全文結(jié)論109-110
• 創(chuàng)新之處110-111
• 參考文獻111-121
• 致謝121-123
• 攻讀學位期間發(fā)表學術(shù)論文123-124

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5 張繼紅;梁力建;黃潔夫;;Fas基因表達變化在Genistein抑制肝癌增長中的作用[A];第十二屆全國肝癌學術(shù)會議論文匯編[C];2009年

6 李玲;鄔利婭-伊明;趙蕾;于永生;李冬潔;蘇定馮;;RAS各組份的基因在SHR心、腎、主動脈中的表達及其意義[A];第九屆全國心血管藥理學術(shù)會議論文集[C];2007年

7 朱瑩瑩;倪道鳳;許彩民;;AD模型大鼠嗅球組織基因表達變化的篩選及目的基因的驗證[A];中華醫(yī)學會第十次全國耳鼻咽喉-頭頸外科學術(shù)會議論文匯編（下）[C];2007年

8 黃文芳;楊永長;劉華;曾婭莉;周定安;胥國強;劉文;;基因芯片技術(shù)篩選辛伐他汀作用K562細胞的差異表達基因[A];中華醫(yī)學會第七次全國檢驗醫(yī)學學術(shù)會議資料匯編[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 衣曉峰;哈醫(yī)大一院系列研究阿爾茨海默病關(guān)聯(lián)基因[N];中國醫(yī)藥報;2007年

2 楊駿;肥胖可能與炎癥基因有關(guān)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2004年

3 通訊員 蔡心軼 記者 程守勤;哪些人體基因易受PM2.5影響[N];健康報;2014年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳紅艷;刺槐中參與共生固氮的結(jié)瘤相關(guān)基因的分離鑒定和功能分析[D];西北農(nóng)林科技大學;2015年

2 董燕妮;擬南芥和油菜磷脂酶基因pPLAIIIδ的功能分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

3 任艷萍;轉(zhuǎn)PRL基因小鼠模型的構(gòu)建與Stat5a的乳腺發(fā)育調(diào)控機理研究[D];廣西大學;2014年

4 施堯;枯草桿菌蛋白酶基因6在須癬毛癬菌致病性中的功能研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2015年

5 吳幼容;觀音竹鹽脅迫的生理響應(yīng)與基因表達分析[D];福建農(nóng)林大學;2012年

6 張靜思;基于基因芯片和生物學分析技術(shù)對血管緊張素Ⅱ誘導的高血壓急性腎臟損傷相關(guān)基因的研究[D];大連醫(yī)科大學;2015年

7 訾臣;miRNAs對斷奶仔豬大腸桿菌抗性的調(diào)控作用及機制分析[D];揚州大學;2015年

8 齊幫若;小鼠乳腺組織鐘基因的篩選與鑒定[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2012年

9 朱國志;大鼠血糖調(diào)節(jié)相關(guān)基因的克隆和功能研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2000年

10 霍曉芳;紅系分化相關(guān)基因的鑒別與功能分析[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2005年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李紫薇;蒺藜苜蓿E2F/DP基因鑒定及鹽脅迫表達分析[D];東北林業(yè)大學;2015年

2 栗振義;紫花苜蓿熱激蛋白基因MsHSP70的克隆及功能分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2015年

3 陳凱麗;綿羊SPLUNC1基因的克隆、表達及活性檢測[D];石河子大學;2015年

4 翟曼君;雞與鵪鶉屬間雜交種胚胎早期死亡相關(guān)基因的功能研究[D];石河子大學;2015年

5 任曉宇;飛蝗CYP4和CYP303A1基因的分子特性和功能研究[D];山西大學;2014年

6 劉恒生;豬LMNA基因?qū)τ诩∪夂椭景l(fā)育及分化的調(diào)控研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

7 謝向;小麥組蛋白去乙�；富騎aHD2C功能研究[D];山東大學;2015年

8 劉明麗;斑馬魚低溫響應(yīng)基因順式調(diào)控元件的鑒定及鱗頭犬牙南極魚ATP6V0C基因在HeLa細胞中抗寒研究[D];上海海洋大學;2015年

9 張偉;轉(zhuǎn)錄組篩選調(diào)控脂肪儲存基因[D];中國科學技術(shù)大學;2015年

10 孔曄;馬鈴薯甲蟲4個細胞色素P450氧化酶基因的分子克隆及功能驗證[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2014年

  本文關(guān)鍵詞：miRNAs對斷奶仔豬大腸桿菌抗性的調(diào)控作用及機制分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：316919