目的:1)探討氧化鐵納米粒子（iron oxide nanoparticles,IONPs）促人牙周膜干細(xì)胞（human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs）成骨分化的作用及選擇最佳IONPs成骨濃度,并通過轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析其所發(fā)揮作用的可能分子機(jī)制。2)觀察氧化鐵納米粒子在大鼠牙周骨缺損修復(fù)中的應(yīng)用效果。方法:1)（1）通過改良酶消化法及有限稀釋法克隆化獲得hPDLSCs,并應(yīng)用流式技術(shù)檢測(cè)第三代hPDLSCs表型。（2）體外定向三系分化培養(yǎng)hPDLSCs 21天后,分別探討其成骨、成脂、成軟骨分化的潛能。（3）佩爾藍(lán)染色、透射電鏡（TEM）觀察IONPs在hPDLSCs的分布。（4）免疫熒光法檢測(cè)IONPs處理hPDLSCs后表型;（5）CCK-8法、EdU免疫熒光檢測(cè)不同濃度0μg/ml、10μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、300μg/ml、500μg/mlIONPs處理hPDLSCs后細(xì)胞的增殖。（6）以0μg/ml、10μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、300μg/ml、500... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

人牙周膜干細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察（40×）

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文沈夢(mèng)杰292.2有限稀釋法克隆純化hPDLSCs接種于96孔板24h后挑選標(biāo)記單個(gè)貼壁細(xì)胞（圖2A/B）；3-5天后單個(gè)hPDLSCs克隆成簇的細(xì)胞集落（圖2C）；單個(gè)細(xì)胞長(zhǎng)滿底孔板的2/3時(shí)重懸后貼壁，細(xì)胞大小均勻，胞漿飽滿（圖2D）。有限稀釋法單克隆培養(yǎng)的單個(gè)hPDLSCs呈短梭形或多角形，貼壁、快速生長(zhǎng)。圖2有限稀釋法純化人牙周膜干細(xì)胞（A:100×;B/C/D:40×）注：A：?jiǎn)蝹�(gè)人牙周膜干細(xì)胞（2天）；B：5天后克隆成簇的人牙周膜干細(xì)胞；C/D:一代人牙周膜干細(xì)胞（10天）Fig.2MorphologicalcharacteristicofhAMSCs.（A:100×;B/C/D:40×）Note:A:AsinglehPDLSCs(2days);B:hPDLSCs（5days）C/D:P1generationofhPDLSCs(10days).

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文沈夢(mèng)杰302.3hPDLSCs鑒定及純度分析hPDLSCs進(jìn)行流式技術(shù)檢測(cè)，鑒定細(xì)胞表型，結(jié)果證實(shí)：CD44、CD73、CD90、CD105高表達(dá)，表達(dá)率99%以上，CD34、CD11B、CD19、CD45、HLA-DR陰性表達(dá)，從而提示hPDLSCs屬于MSCs，確定了本實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞的來源及其特征（圖3）。圖3流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)第3代hPDLSCs表型分子及純度注：A:CD19+CD34+CD45+CD11b+HLA-DR;B:CD44;C:CD73;D:CD105;E:CD90Fig.3DetectionofphenotypicmoleculesandpurityofthethirdgenerationofhPDLSCsbyflowcytometry.Note:A:CD19+CD34+CD45+CD11b+HLA-DR;B:CD44;C:CD73;D:CD105;E:CD90

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3330951