目的:本課題應用阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的5xFAD小鼠模型,給予圣草酚（Eriodictyol）干預。觀察給藥后動物的行為學表現(xiàn)、Aβ斑塊變化、小膠質(zhì)細胞的改變并促進小膠質(zhì)細胞增殖活化的細胞和分子機制。闡明圣草酚治療阿爾茨海默病5xFAD模型小鼠的作用及其可能的機制。為今后應用圣草酚治療AD提供科學的理論依據(jù)。方法:本研究采用原代小膠質(zhì)細胞,在經(jīng)過不同濃度的圣草酚藥物處理后,通過ATP實驗檢測小膠質(zhì)細胞的能量代謝以及熒光定量PCR檢測細胞炎癥水平本實驗采用26周齡5xFAD雌性小鼠,建立AD認知功能障礙模型。小鼠分為野生組、AD組、AD給藥組,每組7-10只小鼠,給藥方式通過藥物灌胃給予,每組小鼠均進行隔日灌胃給藥,每周三次,持續(xù)8周。AD給藥組以圣草酚4 mg/kg為藥物終濃度,與藥物助溶劑（200μl DMSO+5 ml聚乙二醇+45 ml生理鹽水）按每只小鼠10μl/g的量給予灌胃,野生型組和AD組給予等量藥物助溶劑灌胃。在給藥期間進行行為學檢測,并記錄動物給藥開始及給藥結(jié)束后的體重。在小鼠8月齡時處死動物,取小鼠腦組織,腦組織分別用來提取蛋... 

【文章來源】：山西中醫(yī)藥大學山西省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

原代小膠質(zhì)細胞不同濃度的藥物處理后ATP產(chǎn)生檢測結(jié)果

圣草酚通過促進小膠質(zhì)細胞增殖改善阿爾茨海默病認知功能17圖2.圣草酚處理后的原代小膠質(zhì)細胞在LPS刺激下炎癥水平檢測結(jié)果（A-D）原代小膠質(zhì)細胞在10μM圣草酚處理后經(jīng)過24h的LPS刺激，iNOS，IL-6，IL-4，IL-10的mRNA水平（n=3）數(shù)據(jù)為平均值±SEM。**P<0.01單因素方差分析。2.3圣草酚對5xFAD模型小鼠學習記憶能力的影響在體實驗使用的是5xFAD基因突變小鼠，為了進一步探究圣草酚在AD中的相關作用及機制，我們采用了的5xFAD基因突變小鼠模型，小鼠的基因型通過瓊脂糖凝膠電泳進行鑒定。為了獲得足量的5xFAD基因突變小鼠，實驗中將5xFAD與WT小鼠雜交，使其產(chǎn)生雜合型的5xFAD基因突變小鼠，并在小鼠出生30天內(nèi)進行基因型檢測。在給藥前和藥物治療結(jié)束后，我們對小鼠體重進行稱量，結(jié)果顯示小鼠在給藥治療前后體重無明顯差異（N.S）（圖3A），糞便也無形態(tài)差異，提示圣草酚在本實驗所使用的的濃度范圍內(nèi)無明顯的毒副作用。在小鼠給藥2個月后，即小鼠8月齡時進行新物體識別及Morris水迷宮測試。新物體識別結(jié)果顯示，在三天適應期期間，野生型組（WT）與AD給藥組在第二、第三天較第一天五分鐘內(nèi)移動距離明顯減少，而AD組小鼠在第二、第三天較第一天五分鐘內(nèi)移動總距離無明顯差異（圖3B），表明AD小鼠給藥后對空間環(huán)境適應能力明顯改善。而在新物體識別測試中，野生型組和AD給藥組小鼠對新物體有明顯的偏好，而AD組小鼠對新物體無明顯偏好（圖3C），表明給藥后的AD小鼠認知能力得到明顯改善。

圖3.8月齡5xFAD小鼠體重及新物體識別測試（）小鼠給藥前后小鼠的體重（）適應期小鼠活動總距離（）測試期小

【參考文獻】：
期刊論文
[1]黃酮類化合物的心血管保護作用機制研究進展[J]. 李旭光,方蓮花,杜冠華.  中國藥理學通報. 2018(06)
[2]黃酮類化合物的免疫調(diào)節(jié)作用及機制[J]. 楊杰,沙金丹,高翔,林思彤,孫婷婷,田春蓮,劉明春.  動物營養(yǎng)學報. 2017(12)
[3]抗神經(jīng)炎癥天然產(chǎn)物的研究進展[J]. 張蓉,蘇兆亮,趙文娟,湯建,歐陽臻.  中草藥. 2014(05)
[4]tau蛋白過磷酸化與阿爾茨海默病[J]. 宋明潔,戴雪伶,姜招峰.  生命科學. 2013(03)
[5]黃酮類化合物抗氧化作用機制研究進展[J]. 魯曉翔.  食品研究與開發(fā). 2012(03)
[6]神經(jīng)炎癥與神經(jīng)退行性疾病的關系[J]. 邱奧望,劉展,郭軍,彭聿平.  生理科學進展. 2011(05)
[7]Tau蛋白介導阿爾茲海默病的機理及相關藥物[J]. 劉鵬,趙玉芬,李艷梅.  中國科學:化學. 2010(07)
[8]植物類黃酮改善認知功能方面的動物實驗研究進展[J]. 步文磊,王茵,蔭士安,趙顯峰.  中華預防醫(yī)學雜志. 2009 (09)
[9]黃酮類化合物抗氧化及其作用機制的研究進展[J]. 曹志超,顧翔,蘇佩清.  實用臨床醫(yī)藥雜志. 2009(13)
[10]中藥單體及有效部位的神經(jīng)保護作用機制研究進展[J]. 嚴鈺,丁啟龍.  藥學進展. 2007(04)

碩士論文
[1]白果毒/效成分及白果對阿爾茲海默病的干預作用研究[D]. 余圓圓.江蘇大學 2017



本文編號：3329544