研究背景:人牙周膜干細胞（h PDLSCs）是牙周組織再生中最適宜的種子細胞之一。在組織工程中,除適宜的種子細胞以外,生物材料也是必不可少的組成部分。良好的生物材料可以在體外擴增或體內移植種子細胞時與其協(xié)作,發(fā)揮積極作用。來源于間充質干細胞（MSCs）的細胞外基質（ECM）最近被證明是培養(yǎng)MSCs的理想表面材料。人尿源性干細胞（h USCs）具有易收集、采集非侵入性、價格低廉等優(yōu)點,使它成為產生干細胞外基質的合適來源。本研究的目的為探究h USCs來源ECM（UECM）的生物學特點,以及對于h PDLSCs增殖、粘附、鋪展和分化的作用。材料和方法:體外實驗:從健康成年男性（年齡:20-25歲之間）尿液中提取h USCs。從正畸患者（年齡:12-18歲之間）中收集因為正畸治療而拔除的健康前磨牙用于提取h PDLSCs。流式細胞儀檢測兩種干細胞的細胞表面標志物并進行多向分化能力鑒定。第4代h USCs和h PDLSCs接種于空白塑料孔板（TCP）,刺激產生細胞外基質。8天后脫細胞處理,只留下ECM。利用免疫熒光和掃描電鏡檢測人尿源性干細胞外基質（UECM）的蛋白組成和顯微形態(tài)。將h PDL... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

hUSCs和hPDLSCs的形態(tài)學觀察Figure1-1ThemorphologyofhPDLSCsandUSCsA：原代hUSCs呈“米粒狀”或梭形，少許傘狀形態(tài)

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文18圖1-1hUSCs和hPDLSCs的形態(tài)學觀察Figure1-1ThemorphologyofhPDLSCsandUSCsA：原代hUSCs呈“米粒狀”或梭形，少許傘狀形態(tài)。B：傳代后hUSCs形態(tài)均一。C：原代hPDLSCs呈長梭形或多角形，放射狀排列。D：傳代后hPDLSCs呈現(xiàn)長梭形。3.2人牙周膜干細胞和人尿源性干細胞表面標志物鑒定流式細胞儀檢測顯示，P3代hPDLSCs和hUSCsCD90和CD146表達呈陽性，CD31，CD43和CD45表達呈陰性（圖1-2、1-3）。圖1-2hPDLSCs的表面標志物檢測Figure1-2FlowcytometricanalysisofhPDLSCs

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文19圖1-3hUSCs的表面標志物檢測Figure1-3FlowcytometricanalysisofhUSCs3.3人牙周膜干細胞和人尿源性干細胞多向分化能力鑒定P3代hPDLSCs和hUSCs在成骨誘導培養(yǎng)基誘導21天，茜素紅染色后倒置顯微鏡下可見紅色鈣結節(jié)（圖1-4A，C）。P3代hPDLSCs和hUSCs在成脂誘導培養(yǎng)基誘導21天，油紅O然后色倒置顯微鏡下可見紅色脂滴（圖1-4B，D）。圖1-4hPDLSCs和hUSCs的茜素紅染色和油紅O染色Figure1-4AlizarinredSstainingandOilRedOstainingofhPDLSCsandhUSCsA：hPDLSCs茜素紅染色可見紅色鈣結節(jié)。B：hPDLSCs油紅O染色可見紅色脂滴。C：hUSCs茜素紅染色可見紅色鈣結節(jié)。D：hUSCs油紅O染色可見紅色脂滴。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]酶解組織塊法原代培養(yǎng)人牙周膜干細胞和牙髓干細胞[J]. 李穎,谷子芽,呂秋峰,尤金彪,劉芳菲.  中國組織工程研究. 2012(32)



本文編號：3052633