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基于補(bǔ)瀉理論探討調(diào)節(jié)脾氣對(duì)肺纖維化大鼠肺功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-12-30 09:58

  本文關(guān)鍵詞:基于補(bǔ)瀉理論探討調(diào)節(jié)脾氣對(duì)肺纖維化大鼠肺功能的影響 出處:《北京中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


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【摘要】:研究目的肺纖維化是一種病因不明,發(fā)病機(jī)制復(fù)雜的間質(zhì)性肺疾病,目前尚無(wú)特異而有效的治療手段;"脾為肺使、培土生金、母子相生"的肺脾關(guān)系論治肺纖維化是中醫(yī)臨床治療肺纖維化的常見(jiàn)思路,而關(guān)于這一理論的藥理作用和確切機(jī)制的研究尚處于探索階段。本課題擬建立脾虛肺纖維化復(fù)合大鼠模型,以及灌胃四君子湯干預(yù)肺纖維大鼠,從脾虛和補(bǔ)脾兩個(gè)角度初步探討從脾干預(yù)肺纖維化對(duì)肺功能的影響及組織病理學(xué)變化,并通過(guò)細(xì)胞外基質(zhì)、TGF-β1、α-SMA、SP-D等肺纖維化相關(guān)分子的改變來(lái)進(jìn)一步研究?jī)煞N干預(yù)手段對(duì)肺功能變化的可能作用機(jī)制,為臨床診療肺纖維化探索依據(jù)支持及思路。研究方法大黃致脾虛對(duì)肺纖維化大鼠肺功能影響的實(shí)驗(yàn)觀察:采用大黃瀉下加隔日饑飽失常的復(fù)合因素建立大鼠脾虛模型,連續(xù)30d,在停止灌胃2d后,一組恢復(fù)正常飼養(yǎng)(即脾虛組),一組氣管內(nèi)注射博萊霉素(5mg/kg),制備脾虛復(fù)合肺纖維化模型(即復(fù)合組);同時(shí)另一組正常大鼠只進(jìn)行氣管內(nèi)注射博萊霉素,不疊加復(fù)合因素,建立單純肺纖維化模型(即模型組)。28d天后取材,以動(dòng)物行為學(xué)變化、體重變化、肺臟大體觀察、臟器系數(shù)、肺功能相關(guān)指標(biāo)、HE染色、Masson染色、天狼猩紅染色等為主要依據(jù),評(píng)價(jià)脾虛對(duì)肺纖維化大鼠肺功能的影響。四君子湯補(bǔ)脾對(duì)肺纖維化大鼠影響的實(shí)驗(yàn)觀察:SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、四君子低劑組、中劑組、高劑組。從造模第14d起,正常對(duì)照組和模型組給等體積生理鹽水灌胃、其他各中藥劑量組分別給予相應(yīng)濃度藥物灌胃。全部實(shí)驗(yàn)組均于注射博萊霉素后第28天取材,進(jìn)行肺臟形態(tài)的大體觀察、稱量臟器質(zhì)量、計(jì)算臟器系數(shù),利用肺功能檢測(cè)儀記錄各組大鼠肺功能相關(guān)指標(biāo),左肺行HE、Masson、天狼猩紅染色染色;腹主動(dòng)脈取血測(cè)定大鼠動(dòng)脈血酸堿度(PH)、氧分壓(PaO2)、氧飽和度(SaO2)、二氧化碳分壓(PaC02)。通過(guò)免疫組化染色觀察肺組織中TGF-β1、α-SMA、SP-D蛋白的表達(dá)量及組織學(xué)分布。研究結(jié)果大黃致脾虛會(huì)引起動(dòng)物體重的降低。模型組與正常組比較,肺臟質(zhì)量、肺系數(shù)升高(P0.05),肺動(dòng)態(tài)順應(yīng)性(Cydn)、用力肺活量(FVC)、質(zhì)量FVC下降(P0.05),第0.4秒用力呼氣容積占用力肺活量的百分比(0.4秒率,FEVO.4/FVC%)增加(P0.05),用力最大呼氣流速(PEF)、最大呼氣中期流速(MMF)下降(P0.05),病理顯示氣管內(nèi)注射博萊霉素所致肺纖維化為氣道中心性分布,小氣道內(nèi)可見(jiàn)上皮細(xì)胞脫落及黏液栓。單純脾虛動(dòng)物停止脾虛造模后各項(xiàng)肺功能指標(biāo)正常。脾虛復(fù)合組與模型組比較,0.4秒率顯著升高(P0.05),病理顯示肺組織纖維化區(qū)域占比增加。四君子補(bǔ)脾可以明顯降低模型大鼠肺系數(shù)(P0.05),增加動(dòng)物體重(P0.05),體征狀態(tài)向愈明顯。各劑量組相對(duì)于模型組能夠顯著改善Ri、Re、Cdyn值(P0.05),增加FVC,降低FEVO.4/FVC%(P0.05);動(dòng)脈血?dú)鈾z測(cè)中各組指標(biāo)間差異不明顯;Masson染色和天狼猩紅染色結(jié)果顯示各中藥劑量組膠原分布均不同程度少于模型組。進(jìn)一步觀察發(fā)現(xiàn)四君子可降低動(dòng)物肺組織中TGF-β 1、α-SMA蛋白表達(dá),促進(jìn)SP-D蛋白的分泌,減少膠原沉積及分布,改善肺纖維化大鼠肺功能。結(jié)論1.脾虛后復(fù)合博萊霉素造模是肺纖維化大鼠限制性肺功能加重的潛在不利因素。2.通過(guò)四君子湯補(bǔ)脾能夠起到改善肺纖維化大鼠肺功能的作用,增加動(dòng)物體重,復(fù)合中醫(yī)藥理作用。3.四君子湯對(duì)于肺功能的改善,可能與降低肺組織實(shí)變區(qū)TGF-β 1、α-SMA蛋白表達(dá)有關(guān),并促進(jìn)非實(shí)變區(qū)肺泡內(nèi)SP-D蛋白的分泌功能,緩解肺纖維化進(jìn)程。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R259

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1354374

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