植物葉片衰老是一個受到嚴格遺傳調(diào)控的程序性細胞死亡過程,受到各種內(nèi)源信號和環(huán)境刺激的影響。絲裂原活化蛋白激酶(Mitogen Activated Protein Kinase,MAPK)級聯(lián)是真核生物中高度保守的信號通路。在擬南芥中,兩個功能高度冗余的MAPKs(MPK3和MPK6)及其上游兩個功能也高度冗余的MAPKKs(MKK4和MKK5)組成一條信號級聯(lián),在植物生長發(fā)育以及免疫反應等生物學過程中發(fā)揮了重要作用。MPK3/MPK6激活后會導致很多基因差異性表達,在上調(diào)表達基因中,我們發(fā)現(xiàn)一個擬南芥基質(zhì)金屬蛋白酶基因家族(Matrix metalloproteinase,MMP)成員表達被強烈誘導。MMP是一種鋅鈣依賴性的肽鏈內(nèi)切酶,廣泛存在于動植物中。本研究對MPK3/MPK6信號級聯(lián)及MMPs基因家族在植物葉片衰老過程中的功能進行了深入研究,得出以下結(jié)論:1.低水平激活MPK3/MPK6信號導致葉片衰老在系統(tǒng)分析本實驗室構(gòu)建的MPK3/MPK6誘導型功能獲得型轉(zhuǎn)基因體系(GVG:AtMKK4^DD,GVG:AtMKK5^DD,GVG:NtM...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
致謝
縮略詞表
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 衰老簡介
        1.1.1 葉片衰老過程中的分子事件
        1.1.2 葉片衰老的調(diào)控
    1.2 MAPK在細胞中的信號轉(zhuǎn)導
        1.2.1 MAPK信號級聯(lián)簡介
        1.2.2 植物MAPK的功能
    1.3 WRKY轉(zhuǎn)錄因子在葉片衰老中簡介
    1.4 MMP簡介
        1.4.1 MMP的結(jié)構(gòu)
        1.4.2 MMPs的活化
        1.4.3 MMP的底物
        1.4.4 植物MMP的功能
    1.5 問題的提出,研究目的及意義
    1.6 本研究所采用的技術(shù)路線
第二章 材料與方法
    2.1 植物材料
    2.2 載體及菌株
    2.3 工具酶
    2.4 實驗方法
        2.4.1 擬南芥植物固體培養(yǎng)基及土里的生長
        2.4.2 擬南芥植物液體培養(yǎng)基的生長
        2.4.3 灰霉菌(Botrytis cinerea,B.c)處理液體培養(yǎng)基植物
        2.4.4 載體構(gòu)建
        2.4.5 mmp突變體的篩選與鑒定
        2.4.6 RNA水平檢測突變體基因表達
        2.4.7 葉片衰老分析
        2.4.8 葉綠素提取及測定
        2.4.9 葉綠素熒光(Fv/Fm)的測量
        2.4.10 染色質(zhì)免疫共沉淀
        2.4.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 低水平誘導激活MPK3/MPK6 信號級聯(lián)導致葉片衰老
    3.2 mkk4 mkk5 雙突變體延緩葉片衰老
    3.3 激活MPK3/MPK6 信號級聯(lián)誘導擬南芥MMPs基因的表達
    3.4 MMPs基因表達在葉片衰老過程中被上調(diào)
    3.5 組成型和誘導型過表達At3-MMP導致了葉片衰老
    3.6 mmp五突變體不能延緩植物葉片的衰老
    3.7 WRKY33 參與MPK3/MPK6 誘導的At3-MMP基因表達和葉片衰老
第四章 討論與展望
參考文獻



本文編號：3853522