研究背景/目的:目前在構(gòu)建骨組織工程中血管形成的作用越來越受到廣泛關(guān)注,但在構(gòu)建骨組織工程中,血管形成和成骨分化之間的分子機制目前尚未闡明。人羊膜間充質(zhì)干細胞（Human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSC）是一種來源于人廢棄胎盤表層的多潛能干細胞具有向成骨細胞,成軟骨細胞和成脂細胞等多系分化的能力,hAMSCs也具有良好的血管生成能力;Schnurri-3（Shn3）也稱為人類免疫缺陷病毒增強結(jié)合蛋白-3（human immunodeficiency virus type I enhancer binding protein 3,HIVEP3）屬于BMP/TGF-?的同源物家族。由于Shn3在成骨細胞中的缺失導(dǎo)致Runx2蛋白水平升高進而增強骨形成;骨形態(tài)發(fā)生蛋白9（Bone morphogenetic protein 9）具有顯著上調(diào)間充質(zhì)干細胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）中的各種成骨分化過程中成骨相關(guān)因子的表達也能夠刺激血管生成相關(guān)因子表達。然而,目前Shn3是否能夠調(diào)節(jié)以及如何調(diào)節(jié)BMP9誘導(dǎo)的hAMSCs在... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：145 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

細胞總RNA提取Fig1-1.TotalRNAisolationofcells.

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文35圖1-1.人羊膜間充質(zhì)干細胞的分離和提取Figure1-1.Isolationanddigestionofhumanamnioticmesenchymalstemcells.Note:(A):Bluntseparationofamniotictissuefromhumanplacenta;(B):thehumanamnioticmesenchymalstemcellswereisolatedbycombinationoftrypsinandcollagenase.圖1-2.原代至第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞形態(tài)學(xué)觀察。Figure1-2.Morphologicalpropertiesofhumanamnioticmesenchymalstemcellsfromprimarytothirdpassage(Magnification40×,scalebar=200μm).3.2免疫熒光染色觀察第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞波形蛋白和CK-19表達對第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞使用免疫熒光檢測觀察波形蛋白（Vimentin）和CK-19蛋白表達，免疫熒光染色結(jié)果顯示：第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞中波形蛋白表達呈陽性，而CK-19表達呈陰性，結(jié)果說明本實驗中第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞高表達波形蛋白而低表達CK-19，提示第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞純度較高，其中內(nèi)皮細胞較少見圖1-3。

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文35圖1-1.人羊膜間充質(zhì)干細胞的分離和提取Figure1-1.Isolationanddigestionofhumanamnioticmesenchymalstemcells.Note:(A):Bluntseparationofamniotictissuefromhumanplacenta;(B):thehumanamnioticmesenchymalstemcellswereisolatedbycombinationoftrypsinandcollagenase.圖1-2.原代至第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞形態(tài)學(xué)觀察。Figure1-2.Morphologicalpropertiesofhumanamnioticmesenchymalstemcellsfromprimarytothirdpassage(Magnification40×,scalebar=200μm).3.2免疫熒光染色觀察第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞波形蛋白和CK-19表達對第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞使用免疫熒光檢測觀察波形蛋白（Vimentin）和CK-19蛋白表達，免疫熒光染色結(jié)果顯示：第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞中波形蛋白表達呈陽性，而CK-19表達呈陰性，結(jié)果說明本實驗中第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞高表達波形蛋白而低表達CK-19，提示第3代人羊膜間充質(zhì)干細胞純度較高，其中內(nèi)皮細胞較少見圖1-3。


本文編號：3073797