本文關鍵詞：海參中呋喃唑酮藥殘的膠體金免疫層析現(xiàn)場快速檢測技術，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：近年來,食品安全問題頻繁發(fā)生,獸藥殘留尤其是海產(chǎn)品獸藥殘留問題更是引起了國內外的廣泛關注。硝基呋喃類藥物是一類人工合成的廣譜類抗菌藥物,因其具有殺菌效果好、價格便宜等優(yōu)點,被廣泛應用于動物養(yǎng)殖業(yè)中,但是硝基呋喃類抗生素的代謝物會在動物體內蓄積,進而對人體造成傷害,所以我國及世界大多數(shù)國家都已經(jīng)將硝基呋喃類藥物列為禁用藥物。目前,膠體金免疫檢測技術在獸藥殘留的檢測中已經(jīng)形成了自己獨特的優(yōu)勢,這就使得與大型儀器分析方法相比,不同海產(chǎn)品的藥殘分析過程變得簡單快速,這一檢測方法已經(jīng)被大范圍推廣使用。經(jīng)過多年研究,目前市場上已經(jīng)推出了對應藥殘的膠體金免疫檢測試劑卡,然而關于這些試劑卡的效能以及如何優(yōu)化膠體金免疫檢測的前處理,做到在實際檢測過程中避免有機試劑萃取、多次離心等復雜操作尚無明確的研究和報道。本研究以仿刺參為實驗對象,采用高溫加熱和鹽酸酸處理相結合的方法消除海參中蛋白和海參多糖的基質效應,從而省略藥物衍生后用有機試劑萃取來消除基質效應這一繁瑣的步驟,實現(xiàn)了衍生后直接檢測,建立新的前處理方法,使整個檢測過程減少對大型儀器的利用率,檢測時間縮短到60min以內,并且使膠體金免疫檢測的靈敏度達到國家相關標準的要求,從而進一步改善了現(xiàn)有商品化試劑卡普遍存在的前處理不合理的缺陷。主要的研究內容如下：1.探索實驗前期的各種因素,包括檢測卡的檢測性能及在藥物衍生后不經(jīng)提取直接檢測的情況下,海參基質對檢測結果產(chǎn)生的影響。實驗得出結論,當呋喃唑酮代謝物(AOZ)標準液的濃度≥0.25μg/L時,即可出現(xiàn)陽性的檢測結果,且穩(wěn)定性和特異性都良好；海參多糖及其與蛋白質的共同作用為干擾檢測的最大基質。2.摸索消除海參基質干擾的最佳條件和方法,確定最佳的前處理方法是將海參樣品在衍生前用80℃水浴加熱5 min并結合終濃度為0.1 mol/L鹽酸處理,可有效消除基質干擾；衍生化條件優(yōu)化結果為60℃水浴衍生45min時,可以達到理想的檢測效果,并使檢測時間進一步縮短。最終建立的檢測方法對海參中AOZ的檢出限為0.5μg/kg,檢測方法的重復性及特異性良好。3.把最終建立的前處理過程在實際海參樣本中進行驗證。同時采用本實驗建立的方法和LC-MS/MS檢測方法對同一實際海參樣本進行檢測。結果顯示,建立的方法與LC-MS/MS的符合性良好,都呈現(xiàn)強陽性的結果；優(yōu)化后的的樣品前處理方法可以實現(xiàn)實際樣本中AOZ的快速檢測。
【關鍵詞】：呋喃唑酮 高溫加熱 酸處理 膠體金免疫層析 前處理 快速檢測
【學位授予單位】：中國海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：TS254.7
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-12
• 0 前言12-25
• 0.1 硝基呋喃類抗生素的簡介及其分析檢測的研究現(xiàn)狀12-17
• 0.1.1 硝基呋喃類藥物的簡介12
• 0.1.2 硝基呋喃類藥物的藥用性質及其使用情況12
• 0.1.3 硝基呋喃類藥物的代謝作用及分布情況12-13
• 0.1.4 硝基呋喃類藥物的殘留狀況及其危害13-14
• 0.1.5 硝基呋喃類藥物的檢測技術研究進展14-17
• 0.2 膠體金免疫分析技術的概況及開發(fā)研究進展17-21
• 0.2.1 膠體金免疫檢測的機理及其開發(fā)歷程18
• 0.2.2 膠體金免疫分析方法在快檢方而的應用進展18-21
• 0.3 膠體金免疫層析分析技術檢測AOZ殘留的研究進展21-23
• 0.4 研究的目的及意義23
• 0.5 研究內容及技術路線23-25
• 0.5.1 研究內容23-24
• 0.5.2 研究的技術路線24-25
• 1 檢測卡性能探究及海參基質對膠體金免疫檢測的影響25-38
• 1.1 引言25
• 1.2 實驗材料與儀器25-28
• 1.2.1 主要實驗儀器25-26
• 1.2.2 材料與試劑26-27
• 1.2.3 溶液的配置27-28
• 1.3 實驗方法28-31
• 1.3.1 AOZ檢測卡性能的測定28-29
• 1.3.2 現(xiàn)有前處理方法對海參樣本的適用性29
• 1.3.3 海參基質對膠體金免疫檢測的影響29-31
• 1.4 實驗結果與討論31-37
• 1.4.1 AOZ檢測卡性能的測定31-33
• 1.4.2 現(xiàn)有前處理方法對海參樣本的適用性測定結果33-34
• 1.4.3 海參基質對膠體金免疫檢測的影響34-37
• 1.5 本章小結37-38
• 2. 膠體金免疫層析檢測前處理過程的優(yōu)化38-51
• 2.1 引言38-39
• 2.2 實驗材料與儀器39-41
• 2.2.1 主要實驗儀器39-40
• 2.2.2 材料與試劑40
• 2.2.3 溶液的配置40-41
• 2.3 實驗方法41-43
• 2.3.1 海參基質干擾的消除過程41-42
• 2.3.2 衍生化條件的優(yōu)化42-43
• 2.3.3 pH的調節(jié)方法與樣品終體積的確定43
• 2.4 實驗結果與討論43-50
• 2.4.1 海參基質干擾的消除過程43-48
• 2.4.2 衍生化條件的優(yōu)化結果48-49
• 2.4.3 pH的調節(jié)方法49-50
• 2.5 本章小結50-51
• 3 該方法在實際海參樣品中的驗證51-59
• 3.1 前言51
• 3.2 實驗材料與儀器51-53
• 3.2.1 主要的實驗儀器51-52
• 3.2.2 材料與試劑52
• 3.2.3 溶液的配置52-53
• 3.3 實驗方法53-54
• 3.3.1 最終建立的檢測方法的靈敏度與穩(wěn)定性53
• 3.3.2 檢測方法的特異性53
• 3.3.3 最終建立的檢測方法在實際海參樣品中的驗證53-54
• 3.4 實驗結果與討論54-58
• 3.4.1 最終建立的檢測方法的靈敏度與穩(wěn)定性54-55
• 3.4.2 檢測方法的特異性55-56
• 3.4.3 最終建立的方法在實際樣本中的驗證56
• 3.4.4 便攜式可視化檢測裝置的形成56-58
• 3.5 本章小結58-59
• 4 結論及本研究的創(chuàng)新點59-61
• 4.1 結論59-60
• 4.2 創(chuàng)新點60
• 4.3 論文不足之處及工作展望60-61
• 參考文獻61-66
• 致謝66-67
• 個人簡歷67
• 在學期間發(fā)表的學術論文67

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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  本文關鍵詞：海參中呋喃唑酮藥殘的膠體金免疫層析現(xiàn)場快速檢測技術，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：275611