【摘要】：重金屬離子和氯霉素對(duì)人類(lèi)和動(dòng)植物都具有很大的毒害作用,并且可能會(huì)在水產(chǎn)品中有一定的殘留,因而檢測(cè)水產(chǎn)品中重金屬離子和氯霉素對(duì)人類(lèi)健康和生態(tài)環(huán)境有很重要的意義,本文分別建立了基于谷胱甘肽的膠體金比色法和基于核酸適配體的免疫分析法檢測(cè)水產(chǎn)品中重金屬離子和氯霉素含量。(1)基于谷胱甘肽的膠體金比色法檢測(cè)水產(chǎn)品中的重金屬Cd~(2+),Pb~(2+)和Hg~(2+)我們通過(guò)谷胱甘肽的巰基與金納米粒子結(jié)合將谷胱甘肽固定在膠體金表面,應(yīng)用谷胱甘肽能夠螯合金屬離子作為識(shí)別元素進(jìn)行重金屬離子識(shí)別,使膠體金之間的距離接近而改變膠體金表面的等離子共振效應(yīng),從膠體金顏色上表現(xiàn)出膠體金從紅色變?yōu)樗{(lán)色,,又通過(guò)紫外-可見(jiàn)吸收光譜進(jìn)行了定性分析。在最佳的試驗(yàn)條件下,我們得到Cd~(2+),Pb~(2+)和Hg~(2+)的可視檢測(cè)下限分別為0.1μM,0.1μM和1nM,并且經(jīng)過(guò)測(cè)定紫外-可見(jiàn)吸收光譜建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2值分別為0.9865,0.9974和0.9869。而且在其他金屬離子濃度下顯示出極好的特異性。我們還根據(jù)本研究能夠同時(shí)檢測(cè)三種重金屬離子,建立了OR邏輯門(mén),其檢測(cè)結(jié)果與OR邏輯門(mén)的真值表規(guī)律相同。同時(shí)本研究應(yīng)用在水產(chǎn)品斑馬魚(yú)的檢測(cè)中,與OR邏輯門(mén)的規(guī)律相結(jié)合,檢測(cè)的結(jié)果與我們預(yù)期結(jié)果一致。(2)基于核酸適配體的免疫分析法檢測(cè)水產(chǎn)品中氯霉素我們以氯霉素核酸適配體為識(shí)別探針,先與部分DNA雜交,再與氯霉素特異性結(jié)合,破壞DNA的雜交,檢測(cè)氯霉素的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。選擇鏈霉親和素濃度為5μg/m L,1 mg/m L的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素稀釋到4000倍,CAP aptamer濃度為2 nM,檢測(cè)氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為0.001 ppb-1 ppm,檢測(cè)限為0.001 ppb,R2為0.9935,且檢測(cè)特異性高,檢測(cè)結(jié)果不受其他抗生素類(lèi)物質(zhì)影響。同時(shí)本研究還用于魚(yú)糜樣品的檢測(cè)中,回收率良好,檢測(cè)結(jié)果與我們預(yù)期結(jié)果也一致。
[Abstract]:Heavy metal ions and chloramphenicol are toxic to humans, animals and plants, and may have residues in aquatic products. Therefore, the detection of heavy metal ions and chloramphenicol in aquatic products is of great significance to human health and ecological environment. In this paper, glutathione based colloidal gold colorimetry and nucleic acid aptamer based immunoassay were established for the detection of heavy metal ions and chloramphenicol in aquatic products. (1) Glutathione based colloidal gold colorimetry was used to detect aquatic products. The heavy metals Cd~ (2) Pb2 and Hg~ (2) in Glutathione were immobilized on the surface of colloidal gold by the combination of glutathione mercapto and gold nanoparticles. Glutathione can chelate metal ions as recognition elements to make the distance between colloidal gold close and change the surface plasmon resonance effect of colloidal gold. The color of colloidal gold changed from red to blue, and was analyzed qualitatively by UV-Vis absorption spectrum. Under the optimum experimental conditions, the visual detection limits of Cd~ (2) Pb2 and Hg~ (2) were 0.1 渭 M 0.1 渭 M and 1 nm respectively, and the R2 values of the standard curves determined by UV-Vis absorption spectra were 0.9865 ~ 0.9974 and 0.9869, respectively. Moreover, it shows excellent specificity at the concentration of other metal ions. According to this study, we can detect three kinds of heavy metal ions at the same time and establish OR logic gate. The result is the same as the rule of truth table of OR logic gate. At the same time, this study was applied to the detection of zebrafish in aquatic products, and combined with the rule of OR logic gate. The detection results were consistent with our expected results. (2) chloramphenicol in aquatic products was detected by immunosorbent assay based on nucleic acid aptamer. We used chloramphenicol aptamer as the identification probe, first hybridized with some DNA, then specifically combined with chloramphenicol. DNA hybridization was destroyed and chloramphenicol standard solution was detected. When the concentration of Streptomycin was 5 渭 g / mL and the concentration of horseradish peroxidase was 1 mg/m / L, the standard curve linear range of standard curve for detection of chloramphenicol was 0.001 ppb-1 ppm, and the limit of detection was 0.001 ppb,R2, when the concentration of CAP aptamer was 2 nM, and the dilution of Streptomycin was 4000 times. 0.9935, and the detection specificity is high. The results were not affected by other antibiotics. At the same time, this study was also used in the detection of surimi samples, the recovery is good, and the results are in agreement with our expected results.
【學(xué)位授予單位】：合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：TS254.7

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本文編號(hào)：2214931