不同增塑劑對短凱倫藻的生長抑制作用及其機(jī)理研究
本文關(guān)鍵詞:不同增塑劑對短凱倫藻的生長抑制作用及其機(jī)理研究
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【摘要】:增塑劑在我國被大量生產(chǎn)和使用,其中鄰苯二甲酸酯類(PAEs)占增塑劑使用量的80%以上。我國各大水體中均檢出了鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)和鄰苯二甲酸(2-乙基)己酯(DEHP)等PAEs,包括黑龍江、黃河、長江和珠江等水域。海洋藻類作為海洋生態(tài)系統(tǒng)的初級生產(chǎn)力,為維持整個海洋生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定起重要作用。已有研究表明PAEs是一種環(huán)境荷爾蒙,對人體、動物的生殖系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)等有很大的危害作用。而進(jìn)入水體中的PAEs由于其較小的飽和蒸汽壓(VP),只能在水體環(huán)境中遷移轉(zhuǎn)化。因此,進(jìn)入海洋中的PAEs對海洋藻類產(chǎn)生毒性效應(yīng),會影響整個海洋生態(tài)系統(tǒng)的平衡。因此本文以在海洋中有廣泛分布的短凱倫藻(Karenia brevis)為研究對象,研究了11種PAEs包括鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二烯丙酯(DAP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二異丁酯(DIBP)、鄰苯二甲酸丁芐酯(BBP)、鄰苯二甲酸二庚酯(DHP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DOP)、鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)、鄰苯二甲酸二異癸酯(DIDP),對短凱倫藻生長的抑制作用,并從氧化脅迫作用出發(fā),對PAEs抑制短凱倫藻生長的機(jī)制進(jìn)行了進(jìn)一步的探究,闡述了不同烷基鏈長度PAEs對短凱倫藻生長的抑制作用規(guī)律,為評估PAEs對海洋生態(tài)系統(tǒng)的平衡的威脅提供理論基礎(chǔ)。結(jié)果表明,不同烷基鏈長度的PAEs對短凱倫藻的毒性效應(yīng)不同。烷基鏈長度較短的的PAEs(側(cè)鏈C個數(shù)6)對短凱倫藻的EC50,96h值隨著烷基鏈長度的增加而減小,說明其毒性逐漸增大。短凱倫藻的生長受到DEP, DAP, DBP, DIBP, BBP的抑制,不受其他6種PAEs的影響。藻細(xì)胞個數(shù)顯著少于對照組,且隨著時(shí)間的推移差異越大,濃度越高的PAEs作用下,藻細(xì)胞數(shù)越少,不同濃度組間差異較大。而其他6種PAEs作用下,實(shí)驗(yàn)組與對照組的藻細(xì)胞數(shù)沒有明顯差異。DBP、DIBP、BBP作用下,藻細(xì)胞內(nèi)的葉綠素a含量有顯著下降。其他幾種PAEs作用下,與對照組相比,處理組葉綠素a含量不隨著濃度的變化而有顯著變化。DEP, DAP, DBP, BBP4種PAEs作用下,短凱倫藻細(xì)胞內(nèi)的MDA含量較對照組均有顯著的促進(jìn)作用。MDA含量在PAEs作用下,隨著時(shí)間的推移和濃度的增加逐漸升高,在96h達(dá)到最高值或趨于平穩(wěn)。SOD和CAT的活性先升高后降低。表明DEP, DAP, DBP, BBP作用下,短凱倫藻細(xì)胞的抗氧化酶活性誘導(dǎo)升高來清除產(chǎn)生的多余的ROS;钚匝踝杂苫暮肯壬吆蠼档陀稚,這與SOD和CAT的活性變化相吻合。直接證明了DEP, DAP, DBP, BBP作用下,短凱倫藻細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生了較多的ROS。通過電子傳遞鏈抑制劑魚藤酮、敵草隆和雙香豆素對DEP, DAP, DBP, BBP誘導(dǎo)短凱倫藻細(xì)胞產(chǎn)生ROS的研究,發(fā)現(xiàn)DEP主要作用于短凱倫藻的線粒體電子傳遞鏈上,DAP和DBP都作用于短凱倫藻葉綠體和線粒體電子傳遞鏈上,BBP主要作用于短凱倫藻的葉綠體電子傳遞鏈上。離體葉綠體中,與對照組相比,加入DAP, DBP, BBP對離體葉綠體產(chǎn)生OH·的量顯著性升高。離體線粒體中,與對照組相比,加入DEP, DAP, DBP對離體線粒體產(chǎn)生OH·的量顯著性升高。驗(yàn)證了ROS產(chǎn)生的位點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】:短凱倫藻 鄰苯二甲酸酯類 氧化脅迫
【學(xué)位授予單位】:中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:Q949.2;TQ414
【目錄】:
- 摘要5-7
- Abstract7-11
- 0 前言11-13
- 1 緒論13-24
- 1.1 研究背景和意義13-15
- 1.2 烷基鏈長度對PAEs的影響15
- 1.3 PAEs的毒性效應(yīng)15-17
- 1.3.1 PAEs對人體和動物的毒性效應(yīng)15-16
- 1.3.2 PAEs對水生生物的毒性效應(yīng)16-17
- 1.4 短凱倫藻的簡介17-18
- 1.5 氧化脅迫的危害18-20
- 1.5.1 對生物大分子物質(zhì)的影響18-19
- 1.5.2 對生理生化過程的影響19-20
- 1.6 本研究的內(nèi)容和技術(shù)路線20-24
- 1.6.1 本研究的內(nèi)容20-22
- 1.6.2 技術(shù)路線22-24
- 2 不同烷基鏈長度的PAEs對短凱倫藻生長抑制作用24-35
- 2.1 引言24-25
- 2.2 材料與方法25-28
- 2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料25-26
- 2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法26-27
- 2.2.3 分析測試方法27-28
- 2.2.4 數(shù)據(jù)分析28
- 2.3 結(jié)果與討論28-34
- 2.3.1 丙酮對短凱倫藻的NOEC值28-29
- 2.3.2 不同烷基鏈長度PAEs對短凱倫藻藻細(xì)胞數(shù)目的影響29-32
- 2.3.3 不同烷基鏈長度的PAEs對短凱倫藻葉綠素a含量的影響32-34
- 2.4 小結(jié)34-35
- 3 典型增塑劑對短凱倫藻的氧化脅迫作用35-45
- 3.1 引言35-36
- 3.2 材料與方法36-39
- 3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料36-37
- 3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法37
- 3.2.3 檢測方法37-39
- 3.2.4 數(shù)據(jù)分析39
- 3.3 結(jié)果與討論39-44
- 3.3.1 典型增塑劑對短凱倫藻丙二醛(MDA)含量的影響39-40
- 3.3.2 典型增塑劑對短凱倫藻抗氧化體系酶(SOD、CAT)活性的影響40-42
- 3.3.3 典型增塑劑對短凱倫藻主要活性氧自由基(O2~(·-)、H_2O_2和~·OH)含量的影響42-44
- 3.4 小結(jié)44-45
- 4 短凱倫藻在典型增塑劑作用下產(chǎn)生并累積ROS的位點(diǎn)的探究45-54
- 4.1 引言45
- 4.2 材料與方法45-48
- 4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料45-46
- 4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法46-47
- 4.2.3 檢測方法47-48
- 4.2.4 數(shù)據(jù)分析48
- 4.3 結(jié)果與討論48-53
- 4.3.1 電子傳遞鏈抑制劑對典型增塑劑誘導(dǎo)藻細(xì)胞產(chǎn)生ROS的影響48-50
- 4.3.2 藻細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生及累積位點(diǎn)的驗(yàn)證50-53
- 4.4 小結(jié)53-54
- 5 結(jié)論與展望54-56
- 5.1 結(jié)論54
- 5.2 創(chuàng)新之處54-55
- 5.3 展望55-56
- 參考文獻(xiàn)56-60
- 致謝60-61
- 個人簡歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果61
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,本文編號:1102225
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