沼肥是農業(yè)科技發(fā)展,大力推廣農村沼氣工程的附產物,是生物有機肥的一種,富含多種養(yǎng)分。施用沼肥會對土壤微生物群落結構造成影響,其中微生物多樣性的改善和促進作用對土壤生態(tài)環(huán)境來說是有利的。本文通過在成都崇州進行野外田間試驗,設計了6個處理：不施肥對照(CK)、單施化肥(NPK)、沼肥和化肥混施(NG)、沼肥低量(G1)、沼肥中量(G2)和沼肥高量(G3)。測定了5種土壤酶活性,土壤微生物量碳(Soil Microbial Biomass Carbon、土壤微生物量氮(Soil Microbial Biomass Nitro gen、可培養(yǎng)微生物數量,并對可培養(yǎng)細菌的進行分離純化后,研究了不同處理土壤可培養(yǎng)細菌的遺傳多樣性。取得了以下研究結果：1.不同處理土壤磷酸酶和幾丁質酶活性隨小麥生育期而顯著變化,拔節(jié)期最高,收獲期最低。不同處理間土壤酶活性差異明顯,收獲期G3處理磷酸酶活性最高,為1003.29±80.03 μmol h-1 g-1;幾丁質酶活性最高的是拔節(jié)期NPK處理,為38.87±3.46 μmol h-1 g-1;土壤過氧化氫酶和多酚氧化酶活性隨沼肥施用量增加(G1、G2、G3處理)而增加,G3處理過氧化氫酶活性在拔節(jié)期和收獲期較高,分別為12.62±0.21 μmol h-1 g-1和15.45±0.26 μmol h-1 g-1。小麥不同生育期,土壤淀粉酶活性最高的是NG處理,其中收獲期NG處理達230.58±10.82 μgh-1 g-1。2.不同處理SMBC和隨小麥生育期而變化,以拔節(jié)期最高,苗期最低,其中,G2處理拔節(jié)期SMBC最高,為1551.09±35.42μg g-1,收獲期最低,為1023.27±65.33μg g-1。不同處理SMBN隨小麥生育期而增長,收獲期最高,苗期最低。其中,收獲期G3處理最高,SMBN為73.74±7.96μg g-1。3. 土壤可培養(yǎng)細菌數量最低值出現(xiàn)在苗期,為16.98×106 cfu g-1,最大值出現(xiàn)在收獲期,為49.80×106 cfu g-1。G1、G2、G3和NG處理可培養(yǎng)細菌數量顯著高于NPK和CK處理。不同處理土壤可培養(yǎng)真菌數量存在差異,沼肥施用處理(G1、G2、G3和NG)以拔節(jié)期最高,苗期最低；NPK和CK處理則以苗期最高,收獲期最低。在苗期,土壤真菌數量最高的是NPK處理,為36.75±1.61×104 cfu g-1;在拔節(jié)期和收獲期土壤真菌數量最高的是G1,分別為56.91±2.67×104 cfu g-1和51.40±1.28×104 cfu g-1。在苗期和拔節(jié)期,土壤放線菌數量最高的是NG處理,分別為213.11±34.17×105 cfu g-1和76.77±4.74×105 cfu g-1;在收獲期,放線菌數量最高的是G3處理,為165.47±22.39×105 cfu g-1。4.采用稀釋分離獲得了184株可培養(yǎng)細菌,應用BOXAIR-PCR和16S rDNA RFLP研究了菌株的遺傳多樣性,結果表明,土壤細菌間遺傳多樣性明顯存在。代表菌株16S rDNA序列系統(tǒng)發(fā)育分析表明,供試菌株形成了4個分支,芽孢桿菌屬(Bacillus)數量為主,但種類差異較大。賴氨酸芽孢桿菌屬(Lysinibacillus)出現(xiàn)在小麥苗期和拔節(jié)期施肥土壤；微桿菌屬(Mircobacterium)僅出現(xiàn)在小麥拔節(jié)期土壤；短小芽孢桿菌(B.pumilus)出現(xiàn)在小麥收獲期土壤。
【學位單位】：四川農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2015
【中圖分類】：S512.1;S154.3
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 文獻綜述
    1.1 沼肥的養(yǎng)分組成及肥效
    1.2 土壤微生物特性是土壤質量的重要指標
    1.3 土壤微生物特性研究現(xiàn)狀
        1.3.1 土壤微生物群落特征研究進展
        1.3.2 土壤微生物量
        1.3.3 土壤酶活性
    1.4 本研究的意義
2 材料與方法
    2.1 研究區(qū)概況
    2.2 實驗設計和樣品采集
        2.2.1 供試材料
        2.2.2 實驗設計
        2.2.3 土樣采集
    2.3 研究方法
        2.3.1 土壤酶活性測定
        2.3.2 土壤微生物生物量碳氮測定
        2.3.3 土壤微生物數量及類群統(tǒng)計
        2.3.4 可培養(yǎng)細菌遺傳多樣性分析
        2.3.5 統(tǒng)計分析
3 結果與分析
    3.1 不同處理土壤酶活性變化
        3.1.1 不同處理土壤磷酸酶活性變化
        3.1.2 土壤幾丁質酶活性
        3.1.3 土壤過氧化氫酶活性
        3.1.4 土壤多酚氧化酶活性
        3.1.5 土壤淀粉酶活性
    3.2 土壤微生物生物量
        3.2.1 土壤微生物生物量碳
        3.2.2 土壤微生物生物量氮
        3.2.3 土壤微生物生物量碳氮比
    3.3 不同處理土壤可培養(yǎng)微生物數量
    3.4 土壤微生物特性間的相關性分析
        3.4.1 苗期土壤微生物特性相關性
        3.4.2 拔節(jié)期土壤微生物特性相關性
        3.4.3 收獲期土壤微生物特性相關性
    3.5 可培養(yǎng)細菌類群
        3.5.1 可培養(yǎng)細菌分離純化和BOXAIR-PCR指紋圖譜
        3.5.2 16類群rDNA-RFLP多態(tài)性結果
        3.5.3 16S rDNA基因序列分析
    3.6 可培養(yǎng)細菌種群與土壤微生物特性關系分析
4 討論
    4.1 土壤酶活性相關性
    4.2 土壤微生物生物量碳氮與土壤微生物數量相關性
    4.3 土壤微生物特性相關性
    4.4 土壤可培養(yǎng)細菌多樣性分析
    4.5 土壤可培養(yǎng)細菌與土壤微生物特性關系
5 展望
參考文獻
致謝

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