發(fā)布時間：2024-03-09 13:21

　　豬流行性腹瀉病毒(PEDV)和豬偽狂犬病病毒(PRV)是嚴重危害養(yǎng)豬業(yè)的兩種典型病毒,給我國乃至全世界養(yǎng)豬業(yè)造成重大經(jīng)濟損失。建立病毒新的檢測方法、發(fā)展新型抗病毒手段,對于控制病毒的流行具有重要的意義。本論文采用細胞-指數(shù)富集的配體系統(tǒng)進化技術(Cell-SELEX)成功篩選出針對PEDV感染細胞的核酸適配體候選物;研究了二氧化錳(Mn O₂)納米片對PEDV及PRV的抑制效果,具體內(nèi)容如下:利用Cell-SELEX技術,成功篩選出針對豬流行性腹瀉病毒感染非洲綠猴腎細胞(VERO)的核酸適配體候選物。在合成寡核苷酸文庫、上游引物及下游引物的基礎上,通過瓊脂糖凝膠電泳表征方法對初始ss DNA序列進行了鑒定,并利用間接免疫熒光方法探究了PEDV病毒感染VERO合適的時間和劑量。以PEDV感染的VERO細胞為正篩細胞,以正常的VERO細胞為反篩細胞,經(jīng)過13輪篩選獲得了核酸適配體富集文庫,借助NUPACK軟件對第11輪文庫高通量測序結果中的優(yōu)選序列進行分析和結構預測,最終得到3條核酸適配體候選物。研究結果對PEDV感染VERO細胞表面標志物的發(fā)現(xiàn)、PEDV的早期診斷及...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1PEDV基因組及結構示意圖（王興葉2018）

針對豬流行性腹瀉病毒感染細胞的核酸適配體的篩選及二氧化錳納米片抗病毒研究3圖1.1PEDV基因組及結構示意圖（王興葉2018）Fig.1.1GenomeandschematicrepresentationofPEDV2.1.3PEDV的基本性質PEDV能夠對人的紅細胞或者鼠、牛、....

圖1.2PRV結構示意圖（Pomeranzetal2005）

華中農(nóng)業(yè)大學2020屆碩士研究生學位（畢業(yè)）論文82.2.2PRV的病毒學分類及分子結構PRV歸屬于皰疹病毒目（Herpesvirales），皰疹病毒科（Herpesviridae），水痘病毒屬（Varicellovirus）成員，是宿主為脊椎動物的線性雙股DNA病毒（張瑩等20....

圖1.3核酸適配體特異性識別靶標示意圖（Stoltenburgetal2007）

華中農(nóng)業(yè)大學2020屆碩士研究生學位（畢業(yè)）論文123核酸適配體3.1核酸適配體及SELEX技術簡單介紹1990年，Ellington等（EllingtonandSzostak1990）通過對有機染料的初始文庫進行體外篩選獲得了能特異性識別小分子的核酸適配體（aptamer）。同....

圖1.4Cell-SELEX技術篩選核酸適配體的流程圖（Sefahetal2010）

華中農(nóng)業(yè)大學2020屆碩士研究生學位（畢業(yè)）論文14圖1.4Cell-SELEX技術篩選核酸適配體的流程圖（Sefahetal2010）Fig.1.4RoadmapofaptamerselectionbyCell-SELEXtechnology3.2.2Cell-SELEX技術的....

本文編號：3923478