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毛白楊線粒體抗壞血酸過氧化物酶(PtomitAPX)的功能分析

發(fā)布時(shí)間:2024-02-15 04:39
  植物的線粒體對新陳代謝和多種生物合成途徑都發(fā)揮重要作用,其中氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OXPHOS)途徑能夠滿足植物細(xì)胞生長發(fā)育的需求。在這過程中,電子依托分布于線粒體內(nèi)膜中的一系列呼吸復(fù)合物(Ⅰ-Ⅳ)參與氧化還原反應(yīng)完成電子傳遞,并釋放能量驅(qū)動(dòng)ATP合成。但是由于呼吸復(fù)合物Ⅰ-Ⅲ存在的電子泄漏現(xiàn)象,電子傳遞所消耗的氧的0.2%-2%并沒有形成H20而是形成了活性氧(reactive oxygen species,ROS),例如超氧化物陰離子和過氧化氫(H2O2)等?箟难徇^氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)就是植物細(xì)胞中清除H2O2的主要酶之一。擬南芥的研究表明線粒體和葉綠體的ROS水平是通過雙定位于這兩個(gè)細(xì)胞器的葉綠體基質(zhì)型抗壞血酸過氧化物酶(sAPX)共同調(diào)控的,此外還有細(xì)胞質(zhì)抗壞血酸過氧化物酶(cAPX)通過交叉保護(hù)機(jī)制予以輔助。然而,木本植物中線粒體的ROS水平調(diào)控機(jī)制還不夠清晰。本研究通過討論毛白楊PtomitAPX亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)定位的特異性;qRT-PCR分析了PtomitAPX的表達(dá)模式;觀察轉(zhuǎn)基因植株和細(xì)胞...

【文章頁數(shù)】:118 頁

【部分圖文】:

圖2.1多物種APX信號肽蛋白二級結(jié)構(gòu)分析的比對分析??Figure?2.1?Secondary?structure?analysis?of?multi-spe?

圖2.1多物種APX信號肽蛋白二級結(jié)構(gòu)分析的比對分析??Figure?2.1?Secondary?structure?analysis?of?multi-spe?

體信號肽則含有二者特征但并不顯著(Bhushan?e/o/.,2006;?Ge?e/fl/.,2014)。??在本研究的結(jié)果中,chlAPX(sAPX和tAPX)信號肽N端前19個(gè)氨基酸富含絲??氨酸和脯氨酸,而P/〇/w以則富含正電荷氨基酸(圖2.1)。此外,Pto/n/W/l....


圖2.2多物種APX進(jìn)化樹分析??進(jìn)化樹分析使用到的植物包括擬南芥、水稻、玉米、卷柏、衣藻、團(tuán)藻、膠球藻、綠色鞭毛藻、??微胞藻、蕪青、大豆、毛果楊、毛白楊

圖2.2多物種APX進(jìn)化樹分析??進(jìn)化樹分析使用到的植物包括擬南芥、水稻、玉米、卷柏、衣藻、團(tuán)藻、膠球藻、綠色鞭毛藻、??微胞藻、蕪青、大豆、毛果楊、毛白楊

P/ow/M/W和P/oMPX在植物受到H202、NaCl、高溫、干旱、低溫以及強(qiáng)光脅??迫時(shí)的表達(dá)模式通過qRT-PCR進(jìn)行了分析。H202、NaCl以及高溫脅迫使??的表達(dá)量顯著上升(圖2.3A),而P/fwdPX和P/oMPX則顯著下降(圖2.3B,C)。此??夕卜,高強(qiáng)度....


圖2.3?和/表達(dá)模式的分析??A,非生物脅迫下的表達(dá)模式;B,非生物脅迫下/VoMPJT的表達(dá)模式;C,非生物脅??迫下P/o以PZ的表達(dá)模式

圖2.3?和/表達(dá)模式的分析??A,非生物脅迫下的表達(dá)模式;B,非生物脅迫下/VoMPJT的表達(dá)模式;C,非生物脅??迫下P/o以PZ的表達(dá)模式

ght?Cold?High?light??、翁??圖2.3?和/表達(dá)模式的分析??A,非生物脅迫下的表達(dá)模式;B,非生物脅迫下/VoMPJT的表達(dá)模式;C,非生物脅??迫下P/o以PZ的表達(dá)模式。**表示P<0.01的極顯著差異;*表示P<0.05的顯著差異。??Figure?2....


圖2.4密度梯度離心法分離高純度線粒體??A,第一步密度梯度離心:順序滴加40%?MTE溶液(27-30層)、23%?MTE溶液(10-26層)和??

圖2.4密度梯度離心法分離高純度線粒體??A,第一步密度梯度離心:順序滴加40%?MTE溶液(27-30層)、23%?MTE溶液(10-26層)和??

結(jié)構(gòu)的污染問題。第一步密度梯度離心后,線粒體樣品出現(xiàn)在23%和40%蔗糖溶液??的交界處,隨后本研究將整個(gè)離心柱以lmL為單位進(jìn)行分層的標(biāo)志酶活性檢測,結(jié)??果如圖2.4?A所示,線粒體聚集在18-30層,但在這之中存在過氧化物酶體的污染(檢??測到過氧化氫酶活性),此外,堿性焦....



本文編號:3899220

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