高等植物的種子儲(chǔ)存大量的儲(chǔ)藏蛋白質(zhì),為種子發(fā)芽提供氮源,以滿足幼苗初期生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)需求。種子成熟過程中,種子儲(chǔ)藏蛋白質(zhì)在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)以前體的形式大量合成,然后通過囊泡運(yùn)輸轉(zhuǎn)運(yùn)到蛋白質(zhì)儲(chǔ)藏型液泡,再加工成成熟形式并儲(chǔ)存。在前期研究中,我們發(fā)現(xiàn)擬南芥MAG2復(fù)合體參與調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體之間的囊泡運(yùn)輸過程。當(dāng)MAG2復(fù)合體的亞基缺失時(shí),儲(chǔ)藏蛋白質(zhì)前體運(yùn)離內(nèi)質(zhì)網(wǎng)步驟受阻,造成12S球蛋白和2S白蛋白前體異常積累。運(yùn)輸囊泡形成后沿著細(xì)胞骨架運(yùn)輸接近靶位膜,然后通過拴留、錨定和膜融合過程完成囊泡運(yùn)輸過程。運(yùn)輸囊泡和靶位膜的最初接觸是通過拴留因子來完成的,拴留因子捕捉運(yùn)輸囊泡,并進(jìn)行識(shí)別,然后將其拉近靶位膜,這個(gè)過程稱為拴留。在拴留完成之后,運(yùn)輸囊泡在靶位膜完成錨定和膜融合過程。MAG2復(fù)合體是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位的拴留復(fù)合體,調(diào)控高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)之間的囊泡運(yùn)輸。MAL(MAG2-like)是MAG2的擬南芥同源蛋白。本研究以mag2-1、mal-1單突變體和mag2-1 mal-1雙突變體以及MAG2和MAL過表達(dá)植株為實(shí)驗(yàn)材料,初步探討了 MAG2和MAL缺失對(duì)生長(zhǎng)素運(yùn)輸、植物生長(zhǎng)發(fā)育以及脅迫應(yīng)答的影響。1...

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞說明
1 緒論
    1.1 囊泡運(yùn)輸
        1.1.1 拴留復(fù)合體
    1.2 植物種子儲(chǔ)藏蛋白質(zhì)
        1.2.1 種子儲(chǔ)藏蛋白質(zhì)的運(yùn)輸途徑
    1.3 生長(zhǎng)素
        1.3.1 PIN蛋白的鑒定和分子結(jié)構(gòu)
        1.3.2 PIN蛋白的功能
        1.3.3 囊泡運(yùn)輸調(diào)控生長(zhǎng)素極性運(yùn)輸
    1.4 研究目的和意義
2 MAG2和MAL缺失對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育的影響
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.4 表型觀察方法
        2.4.1 初期生長(zhǎng)表型觀察
        2.4.2 土培生長(zhǎng)發(fā)育表型觀察
        2.4.3 種子表型觀察
        2.4.4 Western Blot
    2.5 結(jié)果與分析
        2.5.1 MAG2和MAL缺失對(duì)擬南芥植物生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        2.5.2 MAG2和MAL缺失對(duì)擬南芥種子發(fā)育的影響
        2.5.3 MAG2和MAL缺失影響囊泡運(yùn)輸并引起ER stress
    2.6 本章小結(jié)
3 MAG2和MAL缺失對(duì)生長(zhǎng)素運(yùn)輸?shù)挠绊?br>    3.1 實(shí)驗(yàn)試劑和方法
        3.1.1 擬南芥雜交
        3.1.2 純合突變體篩選
        3.1.3 葉片基因組DNA的提取
        3.1.4 PCR擴(kuò)增檢測(cè)
        3.1.5 GUS染色
        3.1.6 熒光觀察
        3.1.7 外源生長(zhǎng)素和抑制劑處理
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 對(duì)生長(zhǎng)素響應(yīng)報(bào)告基因DR5::GUS分布的影響
        3.2.2 對(duì)生長(zhǎng)素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的影響
        3.2.3 對(duì)外源生長(zhǎng)素應(yīng)答的影響
    3.3 本章小結(jié)
4 MAG2和MAL缺失對(duì)脅迫應(yīng)答的影響
    4.1 實(shí)驗(yàn)試劑和方法
        4.1.1 脅迫處理
        4.1.2 酵母雙雜交分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 對(duì)脅迫應(yīng)答的影響
        4.2.2 MAG2和MAL與ABA信號(hào)途徑的相關(guān)性
    4.3 本章小結(jié)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號(hào)：3887488