發(fā)布時間：2023-05-07 00:35

　　轉化酶抑制子(InvInh)是轉化酶翻譯后水平的一個重要調控因子,通過與轉化酶結合成復合物來抑制轉化酶酶活性。為了探究甘蔗SoInvInh2基因的功能特性,本研究以甘蔗品種GT28葉片總RNA為模板,采用RT-PCR技術擴增甘蔗SoInvInh2基因的編碼區(qū)序列,以中間載體pMD18-T和表達載體pRI101-AN為基礎,采用酶切和連接的方法,構建植物正義表達載體。通過花序軸浸染法轉化擬南芥,獲得轉SoInvInh2基因擬南芥株系。經kan抗性篩選和PCR擴增檢測,共獲得12株陽性植株,轉化效率為9.7%。半定量RT-PCR分析結果表明SoInvInh2基因在轉基因擬南芥葉中相對表達量最高,根中次之,葉柄中最低。這將為后續(xù)解析甘蔗SoInvInh2基因的功能提供理論參考。

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 結果與分析
    1.1 克隆獲得甘蔗SoInvInh2基因且已構建表達載體
    1.2 獲得轉SoInvInh2基因擬南芥
    1.3 轉SoInvInh2基因擬南芥半定量PCR擴增的退火溫度為60.1℃
    1.4 轉SoInvInh2基因擬南芥半定量PCR擴增的循環(huán)數(shù)為30次
    1.5 轉SoInvInh2擬南芥基因表達分析
2 討論
3 材料與方法
    3.1 試驗材料
    3.2 甘蔗轉化酶抑制子SoInvInh2基因的克隆
    3.3 SoInvInh2植物表達載體的構建
    3.4 采用花序軸浸染法進行遺傳轉化
    3.5 轉基因擬南芥植株的篩選和鑒定
    3.6 轉基因擬南芥半定量PCR擴增體系的優(yōu)化
    3.7 轉SoInvInh2擬南苗期SoInvInh2基因的表達特性分析
作者貢獻



本文編號：3809905