擬南芥RBS1基因RNAi載體構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化子的篩選
發(fā)布時間:2023-01-09 13:09
植物通過多個基因協(xié)同作用響應(yīng)活性氧的氧化脅迫.鳥苷酸解離抑制因子RBS1作為小G蛋白活性調(diào)節(jié)分子,參與了活性氧響應(yīng)的生理過程,但其詳細(xì)機(jī)制尚不清楚.利用RNAi技術(shù),分別構(gòu)建了以RBS1基因的特異區(qū)和保守區(qū)為靶序列的RNAi雙元載體,并進(jìn)行了擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化,通過除草劑抗性篩選分別獲得125株及90株遺傳轉(zhuǎn)化株系,為運用反向遺傳學(xué)的方法深入研究RBS1基因的生物學(xué)功能提供基礎(chǔ).
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
0 引言
1 材料和方法
1.1 實驗材料
1.2 試驗方法
1.2.1 擬南芥的種植
1.2.2 擬南芥總RNA的提取及cDNA的合成
1.2.3 PCR產(chǎn)物的檢測和載體的構(gòu)建
1.2.4 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)基因苗的篩選
2 結(jié)果與分析
2.1 RBS1蛋白質(zhì)氨基酸序列保守性分析
2.2 RBS1基因序列特異區(qū)RNAi載體p FGC5941-RBS1S的構(gòu)建
2.3 RBS1氨基酸序列保守區(qū)RNAi載體p FGC5941-RBS1C的構(gòu)建
2.4 p FGC5941-RBS1-RNAi轉(zhuǎn)基因植株的篩選
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]擬南芥活性氧響應(yīng)基因GDI功能初步分析[J]. 劉凌云,孟颯颯. 河南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2013(06)
本文編號:3729241
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
0 引言
1 材料和方法
1.1 實驗材料
1.2 試驗方法
1.2.1 擬南芥的種植
1.2.2 擬南芥總RNA的提取及cDNA的合成
1.2.3 PCR產(chǎn)物的檢測和載體的構(gòu)建
1.2.4 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)基因苗的篩選
2 結(jié)果與分析
2.1 RBS1蛋白質(zhì)氨基酸序列保守性分析
2.2 RBS1基因序列特異區(qū)RNAi載體p FGC5941-RBS1S的構(gòu)建
2.3 RBS1氨基酸序列保守區(qū)RNAi載體p FGC5941-RBS1C的構(gòu)建
2.4 p FGC5941-RBS1-RNAi轉(zhuǎn)基因植株的篩選
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]擬南芥活性氧響應(yīng)基因GDI功能初步分析[J]. 劉凌云,孟颯颯. 河南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2013(06)
本文編號:3729241
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