鞘氨醇類(lèi)代謝產(chǎn)物,在調(diào)節(jié)細(xì)胞活動(dòng)中發(fā)揮重要作用,維持鞘脂代謝的平衡,對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和發(fā)育具有至關(guān)重要的作用。鞘氨醇激酶（Sphingosine kinase;SK）是保持鞘脂平衡的重要調(diào)節(jié)因子,在細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲以及血管生成中起著重要作用。SK1具有促進(jìn)細(xì)胞生存和增殖的功能。胚胎著床過(guò)程中主要涉及細(xì)胞增殖、遷移和血管生成,因此SK1可能參與胚胎著床過(guò)程。本研究通過(guò)建立小鼠早期正常妊娠模型、假孕模型、人工蛻膜化模型、延遲著床和激活著床模型,采用免疫熒光的方法檢測(cè)SK1在小鼠各模型子宮組織中的定位表達(dá)情況,應(yīng)用Western blot的方法檢測(cè)小鼠正常妊娠模型中SK1的表達(dá)量。在體外誘導(dǎo)小鼠子宮基質(zhì)細(xì)胞發(fā)生蛻膜化,通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR的方法,檢測(cè)SK1 mRNA在體外蛻膜化細(xì)胞中的表達(dá)量,進(jìn)一步確定SK1的表達(dá)與蛻膜化的相關(guān)性。免疫熒光結(jié)果顯示,在小鼠早期妊娠模型中,妊娠1～4天時(shí)SK1主要在基質(zhì)區(qū)域表達(dá),而子宮腔上皮和腺上皮無(wú)表達(dá),妊娠5～8天時(shí)SK1主要表達(dá)在次級(jí)蛻膜區(qū)域。亞細(xì)胞定位顯示SK1在蛻膜細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)。在小鼠假孕妊娠模型中,SK1主要表達(dá)在基質(zhì)區(qū)域,假孕第5天的表達(dá)低... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１正常妊娠模型制?

２．３．２小鼠假孕模型的建立??獲得結(jié)扎公鼠后，與發(fā)情期雌鼠合籠，觀察到陰道栓后第３天，取出子宮組織，以??生理鹽水沖洗輸卵管，無(wú)桑葚胚，而是獲得成熟卵母細(xì)胞（圖２－３，?Ａ），表明公鼠結(jié)扎??成功，同時(shí)成功制取假孕第３天模型。假孕模型第１天與正常妊娠第１天一致，均以見(jiàn)??到陰道栓為妊娠成功標(biāo)志。假孕第５天，子宮組織無(wú)藍(lán)色著床位點(diǎn)（圖２－３，?Ｂ）。假孕??第１、３天子宮組織在形態(tài)學(xué)上與正常妊娠子宮組織無(wú)差別。??Ａ?—?Ｂ?—??圖中Ａ為假孕小鼠輸卵管中檢測(cè)到的成熟卵母細(xì)胞；Ｂ為假孕第５天的子宮組織，無(wú)藍(lán)色著床??位點(diǎn)，標(biāo)尺為１?ｃｍ??圖２－３假孕妊娠模型制備結(jié)果??２．３．３小鼠人工蛻膜化模型的建立??將發(fā)情期小鼠與結(jié)扎公鼠合籠，以見(jiàn)到陰道栓為妊娠第１天。待妊娠第４天，對(duì)妊??娠小鼠單側(cè)子宮角注射芝麻油，飼養(yǎng)至妊娠第８天，取出子宮組織，在注射過(guò)芝麻油的??一側(cè)子宮有明顯突起（圖２－４），表明人工蛻膜化模型誘導(dǎo)成功，未注射芝麻油一側(cè)子宮??角為對(duì)照組。此模型重復(fù)３組。??＇＇丨

圖３－５定性表達(dá)共定位表達(dá)數(shù)據(jù)分析??３．３．１．２小鼠假孕模型中ＳＫ１的表達(dá)??ＳＫ１在小鼠假孕妊娠子宮組織中的檢測(cè)結(jié)果如圖３－６所示，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表３－７，與??正常妊娠第１、３、５天表達(dá)量的熒光分析見(jiàn)圖３－８。與正常妊娠模型不同，假孕妊娠小??鼠無(wú)胚胎，且妊娠第５天無(wú)著床現(xiàn)象。由圖３－６可知，在假孕妊娠模型中，ＳＫ１主要在??基質(zhì)區(qū)域表達(dá)。ＳＫ１的表達(dá)量在假孕妊娠第５天明顯低于正常妊娠第５天，結(jié)果具有統(tǒng)??計(jì)學(xué)意義（＊Ｐ＜ａ〇５）（圖３－８），結(jié)果顯示ＳＫ１的表達(dá)與活化胚胎可能相關(guān)。??－２４－??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]發(fā)芽蠶豆左旋多巴超聲強(qiáng)化提取及其動(dòng)力學(xué)過(guò)程[J]. 宋江峰,李大婧,劉春泉.  農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào). 2012(19)
[2]胚胎著床的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[J]. 雷偉,楊增明.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2010(06)



本文編號(hào)：3623259