目的探討脂肪源性干細胞（ADSCs）向成纖維細胞分化的可能,為解決皮膚組織工程種子細胞提供有效途徑。方法取健康成年SD大鼠10只,體重280～320 g,雌雄不限,麻醉、脫毛、消毒,于腹股溝處獲取脂肪后進行ADSCs的體外分離、培養(yǎng)和傳代,觀察原代細胞的生長特點;取第3代細胞,成骨誘導后第16天行堿性磷酸酶（ALP）檢測,成骨誘導后第23天行茜素紅染色,成脂誘導后第12天行油紅O染色;流式細胞術檢測細胞表面標志;加入條件培養(yǎng)基向成纖維細胞誘導分化,于誘導后第2天、第4天、第6天、第8天攝片記錄細胞形態(tài)變化過程,MTT檢測各時相點的細胞活性;誘導后第6天和第8天行掃描電子顯微鏡檢測;誘導后第8天行免疫細胞化學染色,檢測成纖維細胞主要標志物波形蛋白（vimentin）的表達。結果原代ADSCs呈長梭形貼壁生長,成骨誘導后可見ALP強陽性表達,茜素紅染色可見紅色礦化結節(jié);成脂誘導后可見胞內紅染脂滴聚集;流式細胞術檢測顯示,間充質干細胞相關標志物CD90陽性表達,造血干細胞標記物CD45呈陰性表達; ADSCs向成纖維細胞誘導后第2天可見形態(tài)開始改變,部分細胞漂浮;誘導后第4天細胞呈水滴形或短... 

【文章來源】：解剖學報. 2020,51(04)北大核心CSCD

【文章頁數】：7 頁

【部分圖文】：

原代脂肪源性干細胞標尺示25μm

縱向比較顯示，誘導組和對照組吸光度均隨時間的延長而逐漸增大(P<0.05);橫向比較顯示，第2天誘導組吸光度明顯低于對照組(P<0.05);第4天、第6天、第8天誘導組與對照組吸光度差異均無顯著性(P>0.05，圖4)。5．掃描電子顯微鏡觀察誘導細胞形態(tài)

免疫細胞化學染色可見誘導分化8 d后絕大多數細胞vimentin呈陽性表達，胞質內可見棕黃色顆粒(圖6A);對照組ADSCs不表達vimentin(圖6B)。圖5 誘導后成纖維標尺示0.5μm

【參考文獻】：
期刊論文
[1]大鼠脂肪源性干細胞與三維打印明膠支架的相容性[J]. 田曉紅,張彬,房艷,柏樹令,敖強,佟浩.  解剖學報. 2017(02)



本文編號：3419704