醛酮還原酶（AKR）超家族是煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）依賴(lài)的氧化還原酶,研究發(fā)現(xiàn),其中AKR1C的四種亞型在人體大多數(shù)器官中均有表達(dá),并且與癌癥的發(fā)生、轉(zhuǎn)移以及耐藥息息相關(guān),目前關(guān)于AKR1C在同一組織癌細(xì)胞、不同組織癌細(xì)胞差異性表達(dá)與腫瘤發(fā)生及腫瘤耐藥關(guān)系研究,尤其是否可以通過(guò)抑制AKR1C的表達(dá)量來(lái)逆轉(zhuǎn)耐藥性研究成為了近些年的研究熱點(diǎn)。本研究選取了肝細(xì)胞HL-7702、肝癌細(xì)胞HepG2、耐順鉑的肝癌細(xì)胞HepG2/DDP、肺細(xì)胞MRC-5、肺癌細(xì)胞A549、耐順鉑的肺癌細(xì)胞A549/DDP、乳腺細(xì)胞MCF-10A、乳腺癌細(xì)胞MCF-7以及耐順鉑的乳腺癌細(xì)胞MCF-7/DDP這九種細(xì)胞系進(jìn)行試驗(yàn),通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在mRNA水平研究AKR1C四種酶在這三類(lèi)九種不同細(xì)胞系中的表達(dá)情況;運(yùn)用Western Blot技術(shù)在蛋白水平研究AKR1C這四種酶在蛋白水平上的表達(dá)情況;對(duì)肝、肺、乳腺癌細(xì)胞以及對(duì)應(yīng)的耐藥癌細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析,進(jìn)而研究耐藥癌細(xì)胞的耐藥性機(jī)制與途徑;利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染對(duì)耐藥肝癌細(xì)胞、耐藥肺癌細(xì)胞、耐藥乳腺癌細(xì)胞中的AKR1C四種酶進(jìn)行敲低,并對(duì)敲低細(xì)胞進(jìn)... 

【文章來(lái)源】：長(zhǎng)春理工大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】：101 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

人源AKR

第一章緒論2KDa左右，這些酶具有84%-98%的同源性，特別是AKR1C1和AKR1C2，僅有7個(gè)氨基酸的差異。醛酮還原酶AKR1C1-AKR1C4是在甾體激素的活性與非活性形式之間相互轉(zhuǎn)化的酶，通過(guò)這種方式，他們可以調(diào)節(jié)各種激素的生產(chǎn)、失活以及異生物素的代謝，因此他們代表了重要的新興藥物的標(biāo)靶，可以用于開(kāi)發(fā)治療激素依賴(lài)性癌癥的藥物，如乳腺癌、前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌等等[5-8]。1.2.1AKR1C的結(jié)構(gòu)AKR1C酶具有相似的結(jié)構(gòu)，包括（α/β）8的8桶結(jié)構(gòu)和三個(gè)相關(guān)的大環(huán)[9]�！巴啊庇珊诵膮^(qū)域的β鏈（β1-β8）和外圍的α螺旋（α1-α8）組成，伴隨的三個(gè)環(huán)（A，B，C）部分覆蓋C環(huán)，在N端的部分有兩個(gè)附加的螺旋（B1，B2）用來(lái)封閉槍管，在C端的部分有兩個(gè)附加的螺旋（H1，H2）用來(lái)包裝槍管的側(cè)面[5,9]，如圖1.2所示。圖1.2AKR1C酶的空間結(jié)構(gòu)圖AKR1C酶具有高度的相似性，同源性達(dá)到80%以上，如表1.1所示。他們的晶體結(jié)構(gòu)即PDB經(jīng)疊加顯示出了高度的結(jié)構(gòu)相似性，碳骨架的方根偏差（RMSD）低于1.29，如表1.2所示[10-12]。表1.1AKR1C酶的成對(duì)序列同一性（%）PdbcodeAKR1C1AKR1C2AKR1C3AKR1C4AKR1C11MRQ10097.888.382.7AKR1C21IHI97.810087.381.6AKR1C31XF088.387.310083.9AKR1C42FVL82.781.683.9100

第一章緒論3表1.2AKR1C酶的成對(duì)碳骨架均方根偏差PdbcodeAKR1C1AKR1C2AKR1C3AKR1C4AKR1C11MRQ00.8231.2830.980AKR1C21IHI0.82301.2391.004AKR1C31XF01.2831.23901.156AKR1C42FVL0.9801.0041.1560所有的AKR1C酶都保留了關(guān)鍵的催化位點(diǎn)的氨基酸殘基，并且都使用煙酰胺作為輔因子[9]，如圖1.3所示，氨基酸形成了參與質(zhì)子傳遞的所謂的催化四聯(lián)體：Tyr充當(dāng)一般的酸堿催化劑，His和Lys影響pKa，Asp和Lys與2-羥基相互作用于煙酰胺核糖[13]。因此，底物與其各自催化的四聯(lián)體之間的正確的相互作用，對(duì)AKR1C酶的催化作用至關(guān)重要。圖1.3AKR1C酶的催化位點(diǎn)1.2.2AKR1C的功能1）催化性人源的AKR1C酶參與性激素的合成與失活，他們具有羥基類(lèi)固醇脫氫酶（HSD）的活性，可以催化甾體底物的3-，17-，20-位的羰基的還原，形成各自的3-，17-，20-羥基[14]。由于NADPH可以有效抑制NAD＋的依賴(lài)性氧化，因此AKR1C酶在細(xì)胞中起到還原性的作用[15,16]。AKR1C酶催化性激素、雌激素和孕激素的合成，他們就像

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]醛酮還原酶超家族與肺癌[J]. 張麗娜,岳文濤.  國(guó)際腫瘤學(xué)雜志. 2013 (01)



本文編號(hào)：3412080