前言:溶質(zhì)載體（SLC,Solute Carrier）家族是體內(nèi)最大的轉(zhuǎn)運體家族,SLC4是其中負責體內(nèi)碳酸氫鹽轉(zhuǎn)運最重要的亞家族。NBCe1是SLC4家族的重要成員之一,由SLC4A4基因編碼,主要在腎近端小管基底外側(cè)膜表達。NBCe1在腎小管HCO3^-重吸收過程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。NBCe1的功能異常會導致嚴重的HCO3^-重吸收障礙,引起腎小管酸中毒,其特征為血液中的HCO3^-濃度偏低,pH值下降。有報道顯示,NBCe1的突變不僅使患者血液pH值偏低,表現(xiàn)為嚴重的酸中毒,還表現(xiàn)為身材矮小、白內(nèi)障以及偏頭痛、智力障礙等異常;還有研究表明,NBCe1基因敲除鼠同樣表現(xiàn)出非常嚴重的腎小管酸中毒癥狀及其他異常�？梢奛BCe1具有十分重要的生理功能,其異常嚴重影響人類健康。因此研究NBCe1表達調(diào)控具有重要意義,而目前相關(guān)研究報道甚少。泛素化修飾是一種重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾,發(fā)生泛素化修飾的蛋白可被26S蛋白酶體識別并降解,可見泛素化修飾對蛋白表達具有重要的調(diào)控作用。泛素E3連接酶可特異性識別靶蛋白,在泛素化修飾過程中發(fā)揮關(guān)... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

Nedd4-2與NBCe1存在相互作用(A,B)免疫共沉淀驗證Nedd4-2和NBCe1的相互作用：應用NBCe1或Nedd4-2抗體進行IP后，免疫印跡實驗分別檢測Nedd4-2或NBCe1的表達

Nedd4-2可介導NBCe1發(fā)生泛素化修飾(A,B)用帶Flag標簽的NBCe1表達載體轉(zhuǎn)染M1細胞，通過免疫共沉淀實驗，驗證NBCe1與泛素的相互作用

Nedd4-2介導的NBCe1泛素化修飾可導致其降解并改變其亞細胞定位(A)Nedd4-2過表達對NBCe1蛋白水平的影響:Nedd4-2表達載體轉(zhuǎn)染M1細胞，WesternBlot檢測NBCe1的蛋白水平

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Solute carrier transporters: the metabolic gatekeepers of immune cells[J]. Wenxin Song,Danyuan Li,Lei Tao,Qi Luo,Ligong Chen.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2020(01)
[2]Role of E3 ubiquitin ligases in gastric cancer[J]. Ya-Chao Hou,Jing-Yu Deng.  World Journal of Gastroenterology. 2015(03)



本文編號：3304479