豬δ冠狀病毒（PDCo V）是近些年來新發(fā)現(xiàn)的一種豬腸道冠狀病毒,屬于套式病毒目、冠狀病毒科、δ冠狀病毒屬成員。2012年,PDCo V于香港首次被發(fā)現(xiàn)。2014年,PDCo V在美國大規(guī)模爆發(fā)和流行。隨后,多個國家也報道了該病的發(fā)生與流行。PDCo V主要感染新生仔豬,引起腹瀉、嘔吐、脫水甚至死亡,給養(yǎng)豬業(yè)造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失。最近的研究證實(shí),牛、雞、小鼠也對PDCo V易感染。而且PDCo V還具有感染人的潛能,對人類與動物健康構(gòu)成了重大威脅。干擾素（IFN）是宿主抵抗外界病原入侵的重要細(xì)胞因子。先前的研究表明,PDCo V感染拮抗I型干擾素產(chǎn)生,從而逃避宿主的抗病毒免疫。然而,PDCo V作為一種腸道病毒,主要感染腸道粘膜組織。有研究表明,在腸道粘膜組織中,Ⅲ型干擾素（IFN-λs）比I型干擾素發(fā)揮更重要的抗病毒作用。腸道粘膜上皮細(xì)胞能通過上調(diào)Ⅲ型干擾素受體的表達(dá)和過氧化物酶體的生成,誘導(dǎo)Ⅲ型干擾素應(yīng)答。然而,為了建立有效的感染,許多病毒采取各種策略來拮抗Ⅲ型干擾素產(chǎn)生。目前,關(guān)于PDCo V是否拮抗Ⅲ型干擾素產(chǎn)生尚不清楚。本研究證實(shí)PDCo V感染可以拮抗IFN-λ1產(chǎn)生,并進(jìn)... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

冠狀病毒分類圖(Cuietal.2019)

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆碩士研究生學(xué)位論文10I型干擾素類似，III型干擾素主要誘導(dǎo)STAT1與STAT2的磷酸化，很少誘導(dǎo)STAT3和STAT4的磷酸化。圖1-3I型和III型干擾素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑（Lazearetal，2019）Fig.1-3TypeIandtypeIIIIFNsignaltransductionpathways.1.3.2冠狀病毒拮抗干擾素產(chǎn)生的研究進(jìn)展為了便于宿主體內(nèi)復(fù)制增殖，RNA病毒在長期的自然壓力選擇下演化出多種策略來抑制宿主的干擾素產(chǎn)生，從而逃避宿主天然免疫應(yīng)答。目前，已經(jīng)有研究證實(shí)，MERS-CoV、SARS-CoV、HCoV-229E、MHV、PEDV、PDCoV等多種冠狀病毒通過不同的途徑拮抗I型干擾素產(chǎn)生。例如，MERS-CoV和SARS-CoV通過編碼一些病毒蛋白拮抗RLRs識別病毒RNA，從而逃避干擾素應(yīng)答。SARS-CoVN蛋白能與TRIM25結(jié)合，抑制其介導(dǎo)的RIG-I泛素化，進(jìn)而抑制I型干擾

3.1.2 載體與質(zhì)粒 熒光素酶報告質(zhì)粒 p-55λ1-(-225/-36)-Luc、p-55λ1mut.IRF-Luc、p-55λ1mut.NF-κB-Luc 和 p-55λ1mut.IRF/mut.NF-κB-Luc 均由日本京都大學(xué)藤田隆志博士提供。海腎熒光素酶報告質(zhì)粒 RL-TK 購于 Promega 公司。N 端帶 Flag 標(biāo)簽的 RIG-I、MDA5、MAVS、TBK1、IKKε、IRF1、IRF3、IRF7 真核表達(dá)質(zhì)粒均由本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建并保存。真核表達(dá)載體 pCAGGS-Flag、pCAGGS-HA 由本實(shí)驗(yàn)室王蕩老師將pCAGGS 表達(dá)載體改造而成。pCAGGS-Flag 與 pCAGGS-HA 載體除了帶不同標(biāo)簽（N 端）之外，其他酶切位點(diǎn)均相同。


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