隨著工業(yè)和社會的進(jìn)步,越來越多的內(nèi)分泌干擾物進(jìn)入我們的生活環(huán)境。它們會引起內(nèi)分泌干擾效應(yīng),對生物體生長、發(fā)育、繁殖、代謝等多個方面具有危害。而目前對內(nèi)分泌干擾物的毒性評價往往只關(guān)注一種或少數(shù)幾種干擾效應(yīng),并只進(jìn)行比較片面的單一評價。為全面了解和評估內(nèi)分泌干擾物的內(nèi)分泌干擾作用,亟需建立新的研究模型用于綜合評價內(nèi)分泌干擾物的多種干擾效應(yīng)。本研究以斑馬魚為模式生物,選擇代表腎上腺素、性激素、甲狀腺素、垂體激素等不同內(nèi)分泌系統(tǒng)的23種激素為生物標(biāo)志物,利用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）可以同時檢測多種物質(zhì)的優(yōu)勢,建立基于激素生物標(biāo)志物的斑馬魚內(nèi)分泌干擾效應(yīng)綜合評價模型。該方法可有效去除基質(zhì)干擾,相對回收率好,準(zhǔn)確度和精密度高。方法基質(zhì)效應(yīng)基本處于67.3%-132.1%之間,相對回收率基本處于73.4%-110.2%之間,方法誤差≤13.8%,方法相對標(biāo)準(zhǔn)偏差介于0.3%-20.0%之間。以建立的模型為基礎(chǔ),研究丙環(huán)唑、戊唑醇、腈菌唑三種廣泛使用的三唑類殺菌劑的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)。三種殺菌劑對不同類型的激素生物標(biāo)志物表現(xiàn)出不同程度的干擾作用,干擾趨勢也存在差異性。它們普遍對肽類... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

本研究的技術(shù)路線

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文3.丙環(huán)唑等三種殺菌劑單獨(dú)暴露的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)23之后采用QuEChERS方法對斑馬魚樣品進(jìn)行前處理，具體前處理方法參照2.2.2。3.2.3儀器分析條件參照2.2.3。3.3結(jié)果與討論3.3.1對氨基酸衍生物類激素的干擾效應(yīng)丙環(huán)唑?qū)Π唏R魚成魚氨基酸衍生物類激素的干擾效應(yīng)如圖3.1所示。隨著丙環(huán)唑暴露濃度的增加，NE、E和MT的含量變化均無顯著性差異，說明這幾種氨基酸衍生物類激素對丙環(huán)唑的干擾并不敏感。丙環(huán)唑暴露對斑馬魚T3和T4的影響也不明顯，僅在高濃度暴露即100μg·L-1條件下，雌魚體內(nèi)的T3才呈現(xiàn)顯著性增加，而T4的含量無顯著變化，表明T3相較于T4對丙環(huán)唑的干擾效應(yīng)可能更敏感。雄魚體內(nèi)T3和T4含量均無明顯變化。戊唑醇對氨基酸衍生物類激素的干擾效應(yīng)如圖3.2所示。NE在各個濃度暴露組均呈現(xiàn)不同程度的顯著性降低但高濃度組其含量又有所回升，其中雄魚經(jīng)10ng·L-1暴露后NE降低了約55%，表明NE對戊唑醇的干擾較敏感。此外。E圖3.1丙環(huán)唑暴露組斑馬魚氨基酸衍生物類激素含量Figure3.1Levelsofaminoacidderivativehormonesinzebrafishexposedtopropiconazole*、**、***分別表示p<0.05、p<0.01、p<0.001水平，無符號表示無顯著性差異。*、**、***respectivelyrepresentp<0.05、p<0.01、p<0.001.Notextmeansnosignificantdifference.

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文3.丙環(huán)唑等三種殺菌劑單獨(dú)暴露的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)24是NE經(jīng)苯乙胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶作用甲基化而形成的代謝產(chǎn)物，NE含量變化影響了E的生成，導(dǎo)致其含量也有所降低。MT的含量在雌雄魚暴露實(shí)驗(yàn)中均無明顯變化，表明戊唑醇對其干擾較校甲狀腺激素在雄魚實(shí)驗(yàn)中只有T3當(dāng)暴露濃度為100ng·L-1時顯著增加；雌魚暴露實(shí)驗(yàn)中，T3在10ng·L-1時增加到6ng·g-1，T4在1μg·L-1時增加到5ng·g-1，與對照組相比顯著增加。腈菌唑?qū)Π唏R魚成魚的氨基酸衍生物類激素的干擾效應(yīng)如圖3.3所示。NE和E的變化趨勢與戊唑醇暴露組相同。而與戊唑醇暴露組不同的是，MT的含量在暴露組也明顯減少。相比于腎上腺素和褪黑素，甲狀腺類激素對腈菌唑的干擾響應(yīng)敏感度低。在雄魚各個濃度的腈菌唑暴露組中，甲狀腺類激素的含量與對照組相比均無顯著性差異。雌魚體內(nèi)T3、T4的含量只在最高濃度100μg·L-1顯著增加。目前對三唑類殺菌劑的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)研究較少，但已知多種內(nèi)分泌干擾物都具有腎上腺激素干擾效應(yīng)，如有機(jī)磷農(nóng)藥毒死蜱等[114]。戊唑醇和腈菌唑暴露會引起NE和E的顯著降低，說明它們可能也具有腎上腺素干擾效應(yīng)。MT作為圖3.2戊唑醇暴露組斑馬魚氨基酸衍生物類激素含量Figure3.2Levelsofaminoacidderivativehormonesinzebrafishexposedtotebuconazole*、**、***分別表示p<0.05、p<0.01、p<0.001水平，無符號表示無顯著性差異。*、**、***respectivelyrepresentp<0.05、p<0.01、p<0.001.Notextmeansnosignificantdifference.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]Ⅱ-型擬除蟲菊酯對雄性小鼠腦內(nèi)褪黑素含量的影響[J]. 柴曉靜,劉大勇,陸莉.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2011(20)
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本文編號：3293311