發(fā)布時間：2021-04-18 05:23

　　目的研究miR-485-5p和脫氫酶/還原酶3（DHRS3）在骨髓間充質干細胞（BMSCs）增殖和分化中的表達和作用。方法將細胞分為第1轉染組、第2轉染組、第3轉染組和第4轉染組,分別用anti-miR-con、anti-miR-485-5p、si-con和si-DHRS3分別轉染/共轉染BMSCs細胞。轉染9 d后,用四甲基偶氮唑鹽（MTT）法檢測細胞存活率,實時熒光定量-聚合酶鏈式反應檢測各組細胞中miR-485-5p和DHRS3 mRNA的表達,Western blot檢測DHRS3、成骨分化蛋白標志物核心結合蛋白因子2（RUNX2）、骨鈣蛋白（OCN）和骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（BMP2）,增殖蛋白周期蛋白依賴性激酶4（CDK4）和細胞周期蛋白D1（Cyclin D1）,Notch受體1（Notch 1）、Notch配體（Jagged1）和Split多毛增強子1（Hes1）蛋白的表達。結果第1轉染組、第2轉染組、第3轉染組和第4轉染組的細胞存活率分別為（100.58±10.09）%,（132.50±11.45）%,（135.62±12.66）%和（110.96±9.58）%;DHR3蛋... 

【文章來源】：中國臨床藥理學雜志. 2020,36(13)北大核心CSCD

【文章頁數】：4 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實驗方法
        2.1 細胞培養(yǎng)和成骨定向分化
        2.2 細胞轉染前分組與給藥方法
        2.3 細胞轉染[4]
    3 檢測指標
        3.1 qRT- PCR檢測RNA的表達
        3.2 MTT法測定細胞存活率
        3.3 Western blot檢測蛋白表達
        3.4 雙熒光素酶報告系統實驗
    4 統計學處理
結 果
    1 BMSCs定向分化培養(yǎng)后細胞中RUNX2、OCN和BMP2表達
    2 BMSCs定向分化培養(yǎng)后細胞中miR-485-5p低表達和DHRS3高表達
    3 miR-485-5p靶向調控DHRS3的表達
    4 轉染后BMSCs增殖情況
    5 轉染后BMSCs細胞中DHRS3、CDK4、Cyclin D1、RUNX2、OCN、BMP-2、Notch1、Jagged1和 Hes1的表達情況
討 論



本文編號：3144891