微囊藻毒素（microcystin,MCs）是一類毒性強的環(huán)七肽毒素,其會對養(yǎng)殖水環(huán)境造成嚴重危害。Keap1-Nrf2信號通路是保護細胞免受各種環(huán)境毒物的損傷的主要途徑,Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白-1（Keap1）是Cul3依賴性泛素連接酶復(fù)合物的BTB-Kelch型底物銜接蛋白,Keap1靶向促進核轉(zhuǎn)錄因子紅細胞系相關(guān)因子-2（Nrf2）的泛素化降解。在氧化應(yīng)激下,Keap1-Nrf2信號通路會調(diào)控下游Ⅱ相解毒/抗氧化酶對細胞起保護作用。本實驗對褶紋冠蚌Keap1進行鑒定與功能的分析以及對Nrf2-Keap1信號通路在微囊藻毒素作用下轉(zhuǎn)錄調(diào)控的研究,這將有助于了解貝類的氧化應(yīng)激調(diào)控機制。1.從構(gòu)建的褶紋冠蚌血細胞轉(zhuǎn)錄組文庫中篩選出兩種類型的Keap1（Keap1a和Keap1b）基因片段,設(shè)計特異引物和使用RACE PCR技術(shù)成功的克隆出了CpKeap1a和CpKeap1b基因的cDNA序列全長。CpKeap1a基因cDNA序列全長2952 bp,其中5’非編碼區(qū)有351 bp,3’非編碼區(qū)有762 bp,開放閱讀框長度為1839 bp,共編碼612個氨基酸,該蛋白含一個pol... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Keap1半胱氨酸殘基響應(yīng)多種藥物的示意圖

圖 1.3 Keap1-Nrf2 信號通路的活化機制[11]Fig. 1.3 Activation mechanism of Keap1-Nrf2 signaling pathway[11]3 Keap1-Nrf2 信號通路的抗氧化應(yīng)激作用Nrf2 是一種基本的亮氨酸拉鏈（bZIP）蛋白，已被確定為參與保護細胞免化和親電損傷的關(guān)鍵因子[51]，它的許多靶基因在維持細胞抗氧化反應(yīng)和異質(zhì)代謝方面很重要。例如過氧化氫酶（catalase, CAT），銅鋅超氧化物歧化Cu/Zn-superoxide dismutase, Cu/ZnSOD），主要負責消除源自內(nèi)源和外源的[52]，因此，其在生物體內(nèi)對消除 ROS 有著非常重要的作用[53, 54]；谷胱甘肽移酶（glutathione S-transferases, GSTs）可催化谷胱甘肽與毒性化合物的結(jié)產(chǎn)生更容易被排泄的水溶性和生物活性較低的產(chǎn)物[55]；谷胱甘肽過氧化物glutathione peroxidases, GPx）是主要的抗氧化酶，可清除過氧化氫或有機氫化物，從而保護生物膜和細胞成分免受氧化應(yīng)激[56]；硫氧還蛋白（thioredoxin

總RNA檢測Fig.2.1TotalRNAdetection

【參考文獻】：
碩士論文
[1]家蠅Keap1和Nrf2基因的克隆、表達及功能分析[D]. 于雪.河北大學(xué) 2015



本文編號：2954618