本研究選用粒毛盤菌YM156進(jìn)行深層發(fā)酵,經(jīng)過提取、初步純化獲得胞內(nèi)多酚LSP156,采用液相串聯(lián)質(zhì)譜對其組成成分進(jìn)行分析,并對LSP156的保肝和降血糖活性及其作用機(jī)理進(jìn)行研究。液相串聯(lián)質(zhì)譜分析結(jié)果表明,LSP156中含有多種多酚類物質(zhì),包括大豆苷、胸苷、異鼠李素、櫻花素等。采用N-亞硝基二乙胺(NDEA)建立小鼠急性肝損傷模型,對LSP156的保肝活性進(jìn)行初步研究。結(jié)果表明,與NDEA模型組相比,LSP156顯著性降低谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(AKP)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、腫瘤壞死因子(TNF-α)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)的水平,提高超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)的含量。并且,通過肝臟組織病理學(xué)觀察,LSP156的預(yù)處理減少了NDEA導(dǎo)致的肝臟組織病變。這些結(jié)果表明LSP156具有肝保護(hù)作用。為了深入研究LSP156的保肝活性及其作用機(jī)理,采用N-亞硝基二乙胺(NDEA)誘導(dǎo)小鼠建立慢性肝損傷模型。結(jié)果表明,相比于模型組,LSP156能有效地提高SOD、CAT、谷胱甘肽(GSH)的水平,降低丙二醛(MDA)、AST、A...

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 多酚類化合物
    1.2 多酚類化合物的提取、純化及組分分析
        1.2.1 多酚類化合物的分離提取
        1.2.2 多酚類化合物的純化
        1.2.3 多酚類化合物的鑒定
    1.3 多酚類化合物的生物學(xué)功能
        1.3.1 抗氧化作用
        1.3.2 降血糖作用
        1.3.3 保肝活性
        1.3.4 免疫調(diào)節(jié)作用
        1.3.5 調(diào)節(jié)腸道菌群
        1.3.6 神經(jīng)保護(hù)作用
        1.3.7 其他生物學(xué)功能
    1.4 粒毛盤菌的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用
    1.5 本課題的研究內(nèi)容及意義
第二章 粒毛盤菌YM156多酚對二乙基亞硝胺誘導(dǎo)急性肝損傷的保護(hù)作用
    2.1 引言
    2.2 材料與儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)菌種
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 粒毛盤菌YM156胞內(nèi)多酚的提取和初步純化
        2.3.2 LSP156總酚含量的測定
        2.3.3 LC-MS/MS分析
        2.3.4 實(shí)驗(yàn)動物及分組
        2.3.5 生化指標(biāo)測定
        2.3.6 肝組織病理學(xué)分析
        2.3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 LC-MS/MS分析
        2.4.2 LSP156對小鼠肝功能指標(biāo)的影響
        2.4.3 LSP156對小鼠體內(nèi)抗氧化酶的影響
        2.4.4 LSP156 對小鼠體內(nèi)TC和 TG水平的影響
        2.4.5 LSP156對小鼠炎性因子的影響
        2.4.6 LSP156對小鼠肝組織病理學(xué)的影響
    2.5 討論
    2.6 本章小結(jié)
第三章 LSP156對NDEA誘導(dǎo)肝損傷的保護(hù)作用及其作用機(jī)理
    3.1 引言
    3.2 材料和儀器
        3.2.1 相關(guān)試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 實(shí)驗(yàn)動物及分組
        3.3.2 生理生化指標(biāo)的測定
        3.3.3 肝組織病理學(xué)分析
        3.3.4 免疫印跡分析
        3.3.5 16Sr RNA基因擴(kuò)增及Mi Seq測序
        3.3.6 統(tǒng)計(jì)分析
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 LSP156對內(nèi)臟指數(shù)和氧化應(yīng)激標(biāo)志物的影響
        3.4.2 LSP156對肝損傷標(biāo)志物及組織病理學(xué)檢查的影響
        3.4.3 LSP156對小鼠炎癥因子的影響
        3.4.4 LSP156對小鼠中腸道菌群的影響
        3.4.5 LSP156對腸道菌群中宏基因組代謝途徑的影響
        3.4.6 生理指標(biāo)與腸道微生物的相關(guān)性分析
        3.4.7 LSP156對STAT3/COX-2 信號通路的影響
    3.5 討論
    3.6 本章小結(jié)
第四章 LSP156對STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的降血糖活性及其作用機(jī)制
    4.1 引言
    4.2 材料和儀器
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 體外降血糖活性
        4.3.2 實(shí)驗(yàn)動物及分組
        4.3.3 口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)和胰島素耐量試驗(yàn)(ITT)的測定
        4.3.4 器官指數(shù)和體內(nèi)HOMA穩(wěn)態(tài)模型評估
        4.3.5 血清和組織勻漿中生物標(biāo)志物的測定
        4.3.6 組織病理學(xué)分析
        4.3.7 實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)
        4.3.8 免疫印跡分析
        4.3.9 統(tǒng)計(jì)分析
    4.4 結(jié)果
        4.4.1 LSP156對體重、空腹血糖、器官系數(shù)和胰島指標(biāo)的影響
        4.4.2 LSP156對胰島素敏感性和胰腺組織學(xué)的影響
        4.4.3 LSP156對高血糖引起的肝損傷的影響
        4.4.4 LSP156對小鼠體內(nèi)的氧化還原反應(yīng)的影響
        4.4.5 LSP156對高血糖小鼠脂質(zhì)代謝的影響
        4.4.6 LSP156對IRS/Akt/GSK-3β信號通路的影響
    4.5 討論
    4.6 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
    5.3 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文與申報(bào)的專利



本文編號：4049856