發(fā)布時間：2021-10-13 18:36

　　食品添加劑安全評估標準建立在單一的食品添加劑的毒性效應(yīng)基礎(chǔ)上,然而在食品工業(yè)中,一種食品常常包含幾種食品添加劑。多種食品添加劑一同在人體內(nèi)則可能產(chǎn)生相加、協(xié)同、拮抗等聯(lián)合作用,這對傳統(tǒng)食品毒理學(xué)及食品添加劑的毒性評估提出了新的挑戰(zhàn)。本論文采用了Caco-2細胞模型和mini-gut腸道類器官模型,對食品工業(yè)常見的食品添加劑聯(lián)合應(yīng)用的毒性進行了評價,主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:（1）首先以Caco-2細胞模型,分別研究評價了山梨酸鉀、亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、苯甲酸鈉和脫氫乙酸鈉這五種食品防腐劑以及糖精鈉、三氯蔗糖、安賽蜜、甜蜜素和阿斯巴甜這五種人工甜味劑對細胞增殖活力的影響。結(jié)果表明,它們的細胞增殖抑制毒性,都表現(xiàn)出劑量正相關(guān)性。毒性作用順序分別為:焦亞硫酸鈉>亞硫酸鈉>山梨酸鉀>脫氫乙酸鈉>苯鉀酸鈉,糖精鈉>安賽蜜>阿斯巴甜>甜蜜素>三氯蔗糖。選擇了食品工業(yè)中較常用的山梨酸鉀和糖精鈉這兩種食品添加劑進行聯(lián)合實驗,利用MTT法及2×2析因分析法發(fā)現(xiàn)對細胞增殖活力的毒性是協(xié)同聯(lián)合作用,并利用高內(nèi)涵分析系統(tǒng)及qPCR技術(shù),發(fā)現(xiàn)山梨酸鉀和糖精鈉聯(lián)合組能... 

【文章來源】：浙江工商大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 食品添加劑的使用及研究現(xiàn)狀
        1.1.1 常用的食品防腐劑的使用及研究現(xiàn)狀
        1.1.2 常用人工甜味劑的使用及研究現(xiàn)狀
    1.2 食品添加劑的安全性評價方法和研究現(xiàn)狀
        1.2.1 傳統(tǒng)的食品添加劑安全性評價方法
        1.2.2 細胞學(xué)安全性評價研究現(xiàn)狀
        1.2.3 食品添加劑聯(lián)合作用的類型和評價方法
    1.3 Mini-gut細胞模型研究現(xiàn)狀
    1.4 研究目的及內(nèi)容
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 實驗技術(shù)路線
        1.4.3 研究內(nèi)容
2 不同防腐劑和人工甜味劑單獨及聯(lián)合作用對Caco-2 細胞生長的影響
    2.1 引言
    2.2 材料及儀器
        2.2.1 主要實驗材料與試劑
        2.2.2 實驗儀器與設(shè)備
        2.2.3 實驗試劑的配制
    2.3 實驗方法
        2.3.1 細胞培養(yǎng)常規(guī)操作
        2.3.2 實驗設(shè)計
        2.3.3 MTT法檢測細胞增殖活力
        2.3.4 食品添加劑單獨及聯(lián)合作用的HCA多參數(shù)分析
        2.3.5 食品添加劑單獨及聯(lián)合作用致細胞凋亡的通路探究
        2.3.6 統(tǒng)計處理
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 5 種防腐劑和5種人工甜味劑對細胞活力的影響
        2.4.2 山梨酸鉀和糖精鈉單獨及聯(lián)合作用的多指標評價
        2.4.3 亞硫酸鈉和甜蜜素單獨及聯(lián)合作用的多指標評價
    2.5 小結(jié)
3 不同防腐劑和人工甜味劑單獨及聯(lián)合作用對mini-gut生長的影響
    3.1 引言
    3.2 材料及儀器
        3.2.1 主要實驗材料與試劑
        3.2.2 實驗試劑的配制
        3.2.3 實驗儀器與設(shè)備
    3.3 實驗方法
        3.3.1 小腸隱窩的分離與培養(yǎng)
        3.3.2 小腸類器官的傳代
        3.3.3 小腸類器官的凍存
        3.3.4 實驗設(shè)計
        3.3.5 MTT法對mini-gut細胞活力的測定
        3.3.6 不同防腐劑及人工甜味劑對mini-gut生長的影響
        3.3.7 不同防腐劑聯(lián)合人工甜味劑對mini-gut生長的影響
        3.3.8 統(tǒng)計處理
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 五種常見的防腐劑對Mini-gut生長的影響
        3.4.2 五種常見的人工甜味劑對Mini-gut生長的影響
        3.4.3 防腐劑和人工甜味劑聯(lián)合作用對Mini-gut生長發(fā)育的影響
    3.5 小結(jié)
4 山梨酸鉀和糖精鈉單獨及聯(lián)合作用對腸道細胞增殖分化的影響
    4.1 引言
    4.2 材料及儀器
        4.2.1 主要實驗材料與試劑
        4.2.2 實驗試劑的配制
        4.2.3 儀器與設(shè)備
    4.3 實驗方法
        4.3.1 小腸隱窩的分離與培養(yǎng)
        4.3.2 小腸類器官的傳代
        4.3.3 實驗設(shè)計
        4.3.4 Ed U細胞增殖檢測
        4.3.5 細胞總蛋白提取及蛋白含量檢測
        4.3.6 總SOD活性檢測
        4.3.7 總谷胱甘肽過氧化物酶檢測
        4.3.8 實時熒光PCR檢測
        4.3.9 統(tǒng)計處理
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 山梨酸鉀和糖精鈉對Mini-gut生長的影響
        4.4.2 山梨酸鉀和糖精鈉對Mini-gut細胞分化的影響
        4.4.3 山梨酸鉀和糖精鈉對mini-gut的氧化應(yīng)激分析
        4.4.4 亞硫酸鈉和甜蜜素對mini-gut生長的影響
        4.4.5 亞硫酸鈉和甜蜜素對mini-gut細胞分化的影響
        4.4.6 亞硫酸鈉和甜蜜素對mini-gut的氧化應(yīng)激分析
        4.4.7 食品添加劑促進mini-gut損傷和凋亡的相關(guān)通路探究
    4.5 小結(jié)
5 總結(jié)與展望
    5.1 總結(jié)
    5.2 創(chuàng)新點
    5.3 展望
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3435201